KULTURA NG BAKTERYA: MGA URI, KATANGIAN, PAMAMARAAN, KINAKAILANGAN - BIOLOGY - 2025

Ang isang kultura ng bakterya ay bunga ng pag-aanak ng mga microorganism na ito sa nutritive media, upang sila ay magparami, na magbabangon sa hitsura ng mga kolonya ng bakterya sa solidong media at kaguluhan sa likidong media.

Ang pamamaraan ng paghahasik ay napakahalaga upang maipamahagi ang inoculum sa isang paraan na ang bakteryang naroroon ay nakakalat at maaaring bumuo ng maayos na nakahiwalay na mga kolonya.

Ang iba't ibang mga pananim na nakatanim ng may-akda sa Bacteriology Laboratory ng Biomedical and Technological Sciences Building, University of Carabobo. Pinagmulan: komposisyon ng mga larawan na kinunan ng may-akda na MSc. Marielsa Gil.

Ang mga kolonya na nakuha sa medium na kultura medium ay ang bunga ng paglaganap ng microorganism na binhi. Ang bawat kolonya ay nagsisimula mula sa isang solong bakterya, na maaaring magparami ng malaki upang makabuo ng populasyon na nakikitang macroscopically.

Ang parehong nangyayari sa media ng likidong kultura ngunit sa kasong ito ang paglaki ng bakterya ay sinusunod ng kaguluhan.

Posible ang paglaki ng bakterya kapag ang napiling daluyan ng kultura ay nakakatugon sa mga kondisyon ng nutrisyon at pH na kinakailangan para sa pagbuo ng isang partikular na bacterium. Bilang karagdagan, kinakailangan upang makontrol ang iba pang mga variable, tulad ng temperatura, oras ng pagpapapisa ng itlog, konsentrasyon ng oxygen, CO ₂ , bukod sa iba pa.

Hindi lahat ng populasyon ng bakterya ay nangangailangan ng parehong mga kinakailangan, kahit na ang ilan ay maaaring karaniwan sa halos lahat, tulad ng medium na naglalaman ng mga peptones, totoo rin na mayroong mas hinihingi na mga microorganism na bukod pa sa nangangailangan ng iba pang mga tiyak na sangkap, na tinatawag na mga kadahilanan ng paglago.

Halimbawa, maaaring mabanggit na ang ilang Haemophilus ay nangangailangan ng pagkakaroon ng factor X (hemin) at factor V (NAD) na lumago.

Mga uri ng mga kultura ng bakterya

Ang mga kulturang bakterya ay maaaring polymicrobial, puro o halo-halong.

Polymicrobial bacterial culture

Ang mga kultura ng polymicrobial ay ang mga nagmula sa paghahasik ng isang sample na nakuha mula sa isang lugar na may isang normal na microbiota, kung saan ang isang tiyak na pathogen ay matatagpuan din.

Halimbawa: kapag ang pagbuo ng isang kultura ng lalamunan sa lalamunan, ang isang pathogen tulad ng Streptococcus pyogenes ay maaaring matagpuan, ngunit sasamahan ito ng isang karaniwang microbiota sa lugar.

Sa kasong ito, ang isang mahusay na striation ay mahalaga upang payagan ang paglaki ng iba't ibang uri ng bakterya na naroroon sa paghihiwalay.

Ang kolonya na may mga katangian na katugma sa isang Streptococcus pyogenes strain ay maingat na mahipo sa platinum loop at pagkatapos ay nakatanim sa isang daluyan ng kultura ng birhen at sa gayon ay makakakuha ng isang dalisay na kultura ng microorganism.

Mula sa dalisay na kultura na ito, ang lahat ng mga pagsubok na kinakailangan upang makilala ang mga bakterya ay maaaring isagawa.

Purong kultura ng bakterya

Upang mahusay na matukoy ang isang microorganism, dapat gumana ang isa mula sa isang purong kultura.

Ang mga purong kultura ay maaaring makuha tulad ng sa kaso ng nakaraang halimbawa sa pamamagitan ng pagpapatuloy ng isang nakahiwalay na kolonya ng isang kultura ng polymicrobial, o kapag ang isang sample na nagmula sa isang normal na lugar na sterile ay nakatanim at may isang pathogen na umiiral (paglaki ng isang solong uri ng bakterya). Halimbawa: kapag ang isang CSF ay binhi mula sa isang pasyente na may bacterial meningitis.

Ang isa pang paraan ay kapag ang pag-urong mula sa isang lumang purong kultura upang makakuha ng isang nabagong dalisay na kultura.

Hinahalong mga kultura ng bakterya

Ang mga kulturang ito ay binubuo ng isang halo ng mga microorganism, dahil nangyayari ito sa kalikasan. Sa ilang mga proseso ng pang-industriya ang maginhawa ang paggamit ng mga halo-halong kultura.

Maaari itong makuha sa pamamagitan ng unyon ng maraming dalisay na kultura, dahil pinapayagan nito ang pag-aaral ng mga interrelationships ng bakterya.

Ang mga ito ay kapaki-pakinabang, halimbawa, sa pagkasira ng mga xenobiotics sa wastewater ng pang-industriya, dahil kumikilos sila bilang mga ahente ng biodegradable.

Mga katangian ng mga kultura ng bakterya

Ang mga katangian ng morphological ng mga kolonya na nakuha sa mga kultura ng bakterya ay maaaring magkakaiba-iba.

Ang mga kolonya ay maaaring maging napakaliit, katamtaman, o malaki at maaaring lumitaw na tuyo o mucoid, makintab o mapurol. Depende sa texture, maaari itong mag-iba sa pagitan ng makinis at magaspang at, depende sa hugis, maaari silang maging pabilog, patag, matambok.

Depende sa kulay, maaari silang maging: walang kulay, puti, dilaw, rosas, fuchsia, pula, orange, beige, kulay-abo, berde, kayumanggi, itim o may isang metal na kinang, depende sa bakterya na kasangkot at ginamit ang medium medium.

Ang mga hangganan ng mga kolonya ay maaaring maging regular o hindi regular. Ang iba pa, sa kabilang banda, ay maaaring magpakita ng isang pantay na pelikula na ipinamamahagi sa halos buong daluyan na tinatawag na "swarming". Ito ay katangian ng Proteus sp.

Ang ilang mga kultura ng bakterya ay naglalabas ng mga amoy na medyo katangian ng mga species na kasangkot. Halimbawa, ang isang kultura ng Pseudomonas aeruginosa ay may katangian na amoy ng prutas, samantalang ang genus na Proteus ay may isang characteristically putrid na amoy.

Mga halimbawa ng mga kolonya ayon sa kanilang laki

Lubhang maliit: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Maliit: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

Katamtaman: Family Enterobacteriaceae

Malaki: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Halimbawa ng mga kolonya ayon sa kanilang hitsura

Patuyuin: Lactobacillus confusus.

Mga Mucoids: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Makinang: Klebsiella pneumoniae.

Opaque: Enterococcus faecalis, ilang mga strain ng Neisseria gonorrhoeae.

Mga halimbawa ng mga kolonya ayon sa kanilang pagkakayari

Makinis na mga kolonya: Micrococcus luteus

Mga kolonya na magaspang: Sarcina ventriculi sa agarful ng nutrient.

Halimbawa ng mga kolonya ayon sa kanilang hugis

Mga Pabilog: Listeria murrayi at Micrococcus luteus sa nutrient agar.

Flat: Staphylococcus equorum sa nutrient agar.

Convex: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Halimbawa ng mga kolonya ayon sa kanilang mga hangganan

Rounded gilid: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Hangganan ng hindi regular: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Lobed gilid: Bacillus sp.

Halimbawa ng mga kolonya ayon sa kulay nito

Transparent o walang kulay: Shigella sp sa XLD agar.

Puti: Staphylococcus hominis sa agar agar ng dugo.

Beige: Bacillus sphaericus at Lactobacillus confusus sa nutrient agar.

Dilaw: Staphylococcus aureus at Elizabethkingia meningoseptica sa dugo agar, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus sa nutrient agar,

Pink: Escherichia coli sa XLD agar, Micrococcus roseus sa nutrient agar.

Fuchsia: Escherichia coli sa Mac Conkey agar.

Lila: Chromobacterium violaceum.

Pula-pula: Ang marratia ng Serratia sa temperatura ng silid sa agar-agar.

Orange: Kurthia zopfii sa agarful ng nutrient.

Greyish: Sporosarcina ureae sa agar sa katas ng lupa.

Greenish: Pseudomonas aeruginosa sa BHI agar.

Kayumanggi: Enterococcus sp on bile esculin agar.

Itim: Salmonella enteritidis sa SS agar.

Sa metal na kinang: Escherichia coli sa Endo agar.

Mga pamamaraan ng kultura ng bakterya

Ang madamdaming aerobic o anaerobic na kultura ng bakterya

Ito ang pinaka-malawak na ginagamit na pamamaraan ng paglilinang. Ito ay dahil sa ang katunayan na, sa unang lugar, ang karamihan sa mga bakterya na pathogen para sa tao ay aerobic o facultative anaerobic; at pangalawa, ito ay mas mura at mas madali kaysa sa mga anaerobic culture. Halimbawa: Mycoplasma pneumoniae at Escherichia coli ayon sa pagkakabanggit.

Anaerobic kultura ng bakterya

Ang ganitong uri ng kultura ay nangangailangan ng kumpletong pagsugpo ng oxygen. Ang media media para sa anaerobic bacteria ay dapat na pangkalahatang naglalaman ng pagbabawas ng mga sangkap tulad ng: ascorbic acid, thioglycollate, cysteine, o asupre upang maalis ang nakakalason na epekto ng airborne oxygen.

Ang ilan ay naglalaman ng mga tagapagpahiwatig tulad ng resazurin na asul sa pagkakaroon ng oxygen at walang kulay sa anaerobiosis. Halimbawa: Clostridium tetani.

Kultura ng bakterya sa microaerophilia

Ang mga plate ng kultura ay inilalagay sa isang microaerophilic hood na may isang kandila, na sakop. Kinokonsumo ng kandila ang oxygen at lumabas. Sa kondisyong ito, lumalaki ang ilang bakterya, tulad ng Streptococcus sp.

Mga materyales at kinakailangan

materyales

Ang mga materyales na kinakailangan upang maisagawa ang isang kultura ng bakterya ay ang: Petri pinggan o tubes na may media media o sabaw, platinum loop, sample, Bunsen burner o oven.

Mga kinakailangan upang maisagawa ang isang kultura ng bakterya

Ang kultura ng bakterya ay nangangailangan ng maraming mga elemento na dapat isaalang-alang, tulad ng mga nutrisyon sa medium, pH, temperatura, konsentrasyon ng oxygen, CO2, kahalumigmigan, at iba pa.

Mga nutrisyon

Ang mga kulturang bakterya ay nangangailangan ng media media na naglalaman ng mga macroelement at microelement. Kabilang sa mga macroelement, ang mga organikong sangkap tulad ng peptones, amino acid, carbohydrates bilang mga mapagkukunan ng carbon at nitrogen ay maaaring mabanggit.

Kabilang sa mga microelement ay ang mga di-organikong sangkap o mga elemento ng bakas na manganese, zinc, nikel, boron, chlorine, selenium, silikon, kobalt, tanso, at iba pa.

Ang konsentrasyon ng ion ng hydrogen (pH)

Ang konsentrasyon ng mga ion ng hydrogen (H ⁺ ) at hydroxyl ion (OH ^- ) sa daluyan kung saan ang kultura ay bubuo ay mahalaga sa kahalagahan, dahil tinutukoy ng mga ito ang pH.

Ang pinaka-karaniwang ginagamit na pH ay neutral (pH = 7.0), gayunpaman maaaring mayroong paraan kung saan maginhawa ang isang acidic o alkaline pH, halimbawa kung nais mong ibukod ang isang acidophilic o alkaliphile bacteria ayon sa pagkakabanggit.

Temperatura

Ang temperatura ay isang napakahalagang kadahilanan na nakakaimpluwensya sa paglaki ng mga kultura ng bakterya. Ang bakterya ay maaaring maging psychrophilic (lumalaki sa temperatura <20 ° C, mesophilic (sa pagitan ng 20 ° C at 42 ° C), thermophilic (40 ° C hanggang 70 ° C), hyperthermophilic (70 ° C - 105 ° C).

Kinakailangan ng oksiheno

Aerobic: lumalaki sila sa pagkakaroon ng oxygen.

Microaerophilic: lumalaki sila sa pagkakaroon ng 5-10% CO _2.

Mahigpit na anaerobes: lumalaki sa kawalan ng oxygen.

Facilitative anaerobes: lumalaki sa pagkakaroon ng oxygen o wala ito.

Aerotolerant: lumalaki sila nang maayos nang walang oxygen at tinitiyaga ang kaunting oxygen.

Culture Media

Ang media media ay mga espesyal na paghahanda sa nutrisyon na inihanda sa laboratoryo upang makakuha ng paglago ng microbial o kultura. Ang mga media na ito ay nag-iiba sa pagkakapareho, komposisyon, at pag-andar. Ang bawat laboratoryo ay maghanda ng uri ng medium medium na naaangkop sa kanilang mga pangangailangan.

Koleksyon ng kultura ng bakterya

Mayroong mga institusyon o samahan na nakatuon sa koleksyon, pagkilala, pagpapanatili at pamamahagi ng mga bakterya na galaw ng kahalagahan ng klinikal, pangkapaligiran o pang-industriya.

Ang mga strain na ito ay ginagamit para sa gawaing pananaliksik at upang maisagawa ang mga kontrol sa kalidad sa media media.

Halimbawa: ang mga pilay ng American Type Culture Collection, Venezuelan Center para sa Koleksyon ng Microorganism (CVCM) at mga strain ng National Institute of Hygiene, Epidemiology at Microbiology ng Cuba (INHEM), at iba pa.

Mga Sanggunian

1. Benavides G, Hermida A. paghihiwalay at pagkilala sa katutubong bakterya na flora mula sa lupa ng Cruz Verde at Guasca páramos. (Cundinamarca). 2008. Bogotá. Magagamit sa: javeriana.edu.co/biblos
2. Hans S. Pangkalahatang Mikrobiolohiya. Mga edisyon ng Omega. 1991. Barcelona, ​​Spain. Magagamit sa: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R. Koleksyon ng mga microbial culture: Mga tala sa kanilang pag-unlad. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Magagamit sa: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.