PAGLAMLAM SA CAPSULE: MAKATUWIRAN AT PAMAMARAAN - BIOLOGY - 2026

Ang paglamlam na kapsula ay isang diskarte sa paglamlam ng pagkakaiba na mayroong pag-aari ng istraktura ng polysaccharide na nakapalibot sa ilang mga bakterya at yeast na tinatawag na kapsula. Ginagamit ito sa mga klinikal na laboratoryo upang matulungan ang pag-diagnose ng ilang mga pathologies na sanhi ng mga capsulated microorganism.

Ginagamit din ito sa pagtuturo sa mga laboratoryo para sa pagpapakita ng istrukturang morpolohikal na ito sa mga mag-aaral ng mga karera sa agham sa kalusugan, tulad ng: gamot, bioanalysis, pag-aalaga, o cytotechnology, bukod sa iba pa.

Ang Klebsiella pneumoniae smear ay may mantsa na may mantsa ng mantsa. Ang paraan ng tinta ng India na may safranin. Pinagmulan: А.А.В

Mayroong ilang mga simpleng pamamaraan upang ipakita ang pagkakaroon ng mga kapsula sa mga microorganism na nagtataglay nito, ito ay: ang negatibong mantsa, mantsa ng Anthony at isang variant na pinagsasama ang naunang dalawa.

Ang negatibong paglamlam ay pangunahing ginagamit sa mga halimbawa ng CSF kapag ang pagkakaroon ng lebadura na Cryptococcus neoformans ay pinaghihinalaan. Ang lebadura na ito ay isang karaniwang sanhi ng meningitis.

Ang teknolohiyang ito ay gumagamit ng tinta ng nigrosin o India at batay sa paglikha ng isang kaibahan sa pagitan ng background ng paghahanda at ang hindi maiiwasang kapsula ng microorganism. Ang background ay nagiging madilim at ang kapsula ay walang kulay. Sa ganitong paraan, ang istraktura na ito ay ipinahayag.

Tungkol sa teknik na Anthony, masasabi na kadalasang ginagamit ito sa pagtuturo sa mga laboratoryo upang ipakita ang istruktura ng polysaccharide sa bakterya tulad ng Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae at Neisseria meningitidis.

Ang paggamit ng pamamaraang ito para sa mga layuning pang-diagnostiko ay bihirang, dahil mayroong iba pang mga nakagawiang mga pagsubok na nagpapahintulot sa pagkilala sa mga microorganism na ito.

Batayan

Ang kapsula ay isang malakas na istraktura ng isang likas na polysaccharide. Pinoprotektahan nito ang mga microorganism mula sa phagocytosis, at samakatuwid ay isang mahirap na istraktura upang tumagos.

Iyon ang dahilan kung bakit ang mga mantsa ng capsule ay batay sa kaibahan. Ang mga colorant ay namantsahan sa ilalim ng paghahanda habang ang kapsula ay nananatiling walang kulay.

Samakatuwid, sa mga pamamaraan na ito ang capsule ay madaling nakikilala. Kung ang microorganism ay walang kapsula, hindi ito makikilala sa ganitong uri ng kulay, sapagkat ang lahat ay mamantsahan ng parehong kulay.

Ang lahat ng mga pamamaraan na ginamit upang kulayan ang kapsula ay may parehong katwiran sa kabila ng paggamit ng iba't ibang mga tina at pamamaraan.

Mga pamamaraan par

-Anthony mantsang

Ang mantsa ni Anthony ay gumagamit ng kristal na violet bilang mantsa. Mabulok nito ang katawan ng bakterya at lila sa background.

Sa kabilang banda, 20% tanso sulpate ang ginagamit. Naghahain ito bilang isang solusyon sa paghuhugas, iyon ay, tinatanggal ang labis na crystal na violet mula sa paghahanda, ginagawang malinaw ang mga kapsula ngunit walang bakterya na katawan o background na nawawala ang kulay.

materyales

- gatas ng iridescent.

- Slide.

- 1% violet na kristal.

- 20% tanso sulpate.

- Optical mikroskopyo.

- Langis ng langis.

Proseso

Ang pamamaraan na ito ay binubuo ng:

1. Linangin ang microorganism sa iridescent milk sa loob ng 36 oras.
2. Maglagay ng isang patak ng kultura sa dulo ng isang slide at sa tabi nito, maglagay ng isang patak ng baso ng violet, ihalo at ikalat sa pagtatapos ng isa pang slide.
3. Ang hangin ay tuyo at hindi inilalagay sa init.
4. Hugasan gamit ang 20% ​​tanso sulpate solusyon, payagan upang matuyo ang hangin.
5. Sundin sa ilalim ng isang mikroskopyo na may isang layunin ng paglulubog. Paghahanap patungo sa mga dulo ng pagkalat.

Mahalaga na huwag gumamit ng init ni upang ayusin o hindi matuyo, dahil pinapahamak nito ang kapsula. Hindi rin hugasan ng tubig.

Pagbibigay kahulugan

Ang gatas ng gatas ay isang mahusay na daluyan ng kultura dahil nagbibigay ito ng mga kinakailangang nutrisyon para sa microorganism upang makabuo ng isang kilalang kapsula.

Sa kabilang banda, ang iridescent milk ay bubuo ng isang makapal at siksik na ilalim na marumi lila kasama ang bakterya na katawan, ngunit ang kapsula na pumapaligid sa microorganism ay mananatiling walang kulay. Samakatuwid, ang isang malinaw na halo ay sinusunod sa paligid ng katawan ng bakterya.

Ang graphic na representasyon sa obserbasyon ng mikroskopiko ng isang Klebsiella pneumoniae smear na may mantsa ng mantsa ni Anthony. Pinagmulan: Ginawa ng may-akda na si MSc. Marielsa Gil.

Kalamangan

Ito ay isang simpleng pamamaraan upang maisagawa. Hindi nangangailangan ng pag-aayos.

Gayundin, dapat tandaan na ang iba pang media media ay maaaring magamit, ngunit ang daluyan ng gatas ay ginustong dahil may pakinabang ito na magbigay ng mas kilalang mga kapsula.

Mga Kakulangan

Ito ay isang bahagyang mas masinsinang pamamaraan sa paggawa kaysa sa negatibong paglamlam, at ang paggunita nito ay nangangailangan ng paghihintay para sa paghahanda na matuyo nang lubusan.

-Negative staining

materyales

- Slide slide.

- Daluyan ng kultura na may microorganism.

- Intsik tinta o nigrosine.

- Optical mikroskopyo.

- Solusyon ng phologicalological saline.

Proseso

Maglagay ng isang patak ng pisyolohikal na asin sa mga coverlip at matunaw ang isang maliit na bahagi ng kultura ng microbial. Mahalaga na ang paghahanda ay hindi masyadong makapal. Pagkatapos ay maglagay ng isang patak ng tinta o nigrosine ng Tsino at ihalo.

Ang isang takip na sheet ay pagkatapos ay ilagay sa ibabaw ng paghahanda nang hindi umaapaw ang likido. Ito ay sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo sa pamamagitan ng una na nakatuon sa isang layunin ng 10X at pagkatapos ay lumipat sa 40X.

Ang pamamaraan na ito ay maaari ding magamit sa mga sample ng CSF nang direkta. Iyon ay, sa halip na maglagay ng isang patak ng kultura ng microbial, inilalagay ang isang patak ng CSF.

Kalamangan

Ito ay isang simpleng pamamaraan upang maisagawa at sa parehong oras na mura. Hindi ito nangangailangan ng pag-aayos o pagpapatayo ng paghahanda.

Mga Kakulangan

Ang kawalan ay dapat itong sundin sa ilalim ng isang mikroskopyo bago mahihinto ang paghahanda, dahil kung nangyari ito ang kontrata ng mga microorganism, na gagawing mahirap ang paggunita.

Sa kabilang dako, ang mga maling positibo ay maaaring mangyari kung ang analyst ay walang karanasan, dahil ang mga leukocytes ay madalas na nalilito sa mga lebadura.

Ang pagmamasid sa mga kape ng lebadura na may tinta o nigrosin na pamamaraan ay dapat isaalang-alang bilang isang presumptive diagnosis ng Cryptococcus neoformans hanggang sa ito ay ipinakita kasama ang kultura.

Ito ay dahil may iba pang mga lebadura na maaaring maging sanhi ng meningitis at hindi lamang ang mga Cryptococcus neoformans, tulad ng genus na Candida at Rhodotorula, pati na rin ang iba pang mga species ng Cryptococcus.

Pagbibigay kahulugan

Kung mayroong mga capsulated microorganism, isang madilim na background ang masusunod, na may mga transparent na katawan na lumulutang sa likido, na tinatampok ang pagkakaroon ng mga kapsula.

Ang kapsula ng cryptococcus neoformans na may mantsa ng Intsik. Pinagmulan: Photo Credit: Mga Nagbibigay ng Nilalaman (s): CDC / Dr. Leanor haley

Teknik na tinta sanda

Ang pamamaraan na ito ay maaari ring gawin sa nigrosine. Ito ay isang kumbinasyon ng mga pamamaraan na dati nang ipinaliwanag. Ang pamamaraan na ito ay gumagamit ng crystal violet at Indian tinta o nigrosine.

Ang katawan ng bakterya ay lilang mula sa kristal na violet dahil negatibong sisingilin, samantalang ang nigrosin ay kulay sa ilalim ng pahid. Kung ang bakterya ay may kapsula, lilitaw ito bilang isang transparent halo sa paligid ng microorganism.

Ang kristal na violet ay maaaring mapalitan ng anuman sa mga kulay na ito: safranin, pangunahing fuchsin o asul na methylene.

materyales

- Violet glass.

- Nigrosine o tinta ng India.

- Slide slide.

- Mikroskopyo.

Proseso

- Linangin ang microorganism sa isang medium medium.

- Maglagay ng isang patak ng kultura sa dulo ng isang slide at sa tabi nito, maglagay ng isang patak ng tinta ng kristal na India o nigrosine, ihalo at kumalat sa pagtatapos ng isa pang slide.

- Ang hangin ay tuyo at huwag ayusin sa init.

- Takpan gamit ang isang violet crystal solution sa loob ng 1 minuto, hugasan ng distilled water ngunit napaka delicately (malambot na jet), hayaan itong matuyo sa bukas na hangin.

- Sundin sa ilalim ng mikroskopyo na may layunin ng paglulubog. Paghahanap patungo sa mga dulo ng pagkalat.

Pagbibigay kahulugan

Makikita ang isang lila na bacterial body at isang madilim na background. Ang kapsula, kung naroroon, ay lilitaw na walang kulay sa paligid ng mga bakterya.

Mga Sanggunian

1. Covadonga A, Silóniz M, Serrano S. Pangunahing pamamaraan ng Microbiology. Pagmamasid sa bakterya. Reduca (Biology). Series ng Microbiology. 2010; 3 (5): 15-38. D
2. López-Jácome L, Hernández-Durán M, Colín-Castro C, Ortega-Peña S, Cerón-González G, Franco-Cendejas R. Pangunahing mga mantsa sa laboratoryo ng microbiology. Mediagraphic.org. 2014; 3 (1): 10-18. Magagamit sa: medigraphic.com
3. Gil M. Negative staining: rationale, technique, pakinabang at disadvantages. Lifeder.com.
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
5. Tankeshwar A. Capsule Stain: Prinsipyo, Pamamaraan at Resulta. 2019. Gabay sa Medikal na Mikrobiolohiya. Magagamit sa: microbeonline.com