MAAARING GRAINWALD-GIEMSA MANTSA: PANGANGATWIRAN, PAMAMARAAN AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2026

Ang May Grünwald-Giemsa o Pappenheim mantsang ay isang diskarte sa paglamlam ng pagkakaiba na naghahalo sa Giemsa at May Grünwald reagents. Ginagamit ito para sa pagkita ng kaibahan ng normal at abnormal na mga selula ng dugo sa mga peripheral na dugo at utak ng utak ng buto, pati na rin para sa paglamlam ng mga seksyon ng histological at mga sample ng cytological.

Parehong reagents -Giemsa at May Grünwald- ay nagmula sa Romanowsky-type staining, isang pamamaraan na batay sa pinagsama ng acidic at basic dyes.

Ang smear na nagpapakita ng isang naka-segment na neutrophil at isang milleocyte sa isang kaso ng Chronic Myeloid Leukemia, na may mantsa ng May Grünwald Giemsa stain. Dr Ramon Simon-Lopez (https://es.m.wikipedia.org/wiki/Archivo:LMC-1.JPG) sa pamamagitan ng Wikipedia.org.

Pinabuti ni Giemsa ang pamamaraan sa pamamagitan ng pag-stabilize ng halo ng eosin, methylene blue at ang kanilang mga derivatives, na may gliserol. Sa halip, si May Grünwald ay gumagamit ng asul na eosin at methylene, gamit ang methanol bilang solvent. Ang estratehikong kumbinasyon na ito ay nagbunga ng mahusay na mga resulta.

Bagaman sa mga tuntunin ng pag-obserba ng cell morphology kumikilos ito sa isang katulad na paraan sa mga mantsa ng Giemsa at Wright, pinapabuti ng pamamaraang ito ang mga nauna sa pamamagitan ng pagpino ng paglamlam ng mga parasito na nagdudulot ng malaria, sakit na Chagas, leishmaniasis at trichomoniasis.

Bilang karagdagan, napatunayan na ito ay isang napaka-kapaki-pakinabang na pamamaraan para sa cytological na pag-aaral ng spermatic fluid. Nakatayo ito hindi lamang sa pamamagitan ng pagpapakita ng mga katangian ng morphological ng sperm, kundi pati na rin sa pamamagitan ng pagpapahintulot sa lubos na mahusay na pagkita ng mga leukocytes, epithelial cells at spermatogenesis cells.

Batayan

Ang pamamaraan ay sinusunod ang pundasyon ng mga batik ng Romanowsky, na kung saan ang mga acidic na dyes ay may selective na pagkakaugnay para sa mga pangunahing bahagi ng cellular at acidic na mga sangkap ay nakakaakit ng mga pangunahing mantsa.

Ipinaliwanag sa ibang paraan, ang parehong mga istruktura ng cell at tina ay may positibo o negatibong singil sa kuryente; tulad ng mga singil na pagtataboy at iba't ibang mga singil na akit.

Halimbawa, ang mga pangunahing tina tulad ng asul na methylene ay positibong sisingilin at naaakit sa mga negatibong istruktura. Iyon ang dahilan kung bakit ang pangulay na ito ay namantsahan ang nuclei na mayaman sa DNA at RNA na negatibong sisingilin ng mga pangkat na pospeyt.

Ang mga butil ng mga segment na basophils at ang mga cytoplasma ng RNA na naglalaman ng mononuclear puting mga selula ng dugo ay namantsahan din.

Gayundin, ang dye ng acid ay nagdadala ng isang negatibong singil, na kung bakit ito ay nagbubuklod sa mga positibong sisingilin na istruktura tulad ng mga erythrocytes at granules ng mga segment na eosinophil. Tulad ng para sa mga butil ng mga neutrophil na may segment, ayusin ang parehong mga tina.

Iba't-ibang mga kulay

Sa diskarteng ito, isang kumbinasyon ng mga reaksyon sa pagitan ng mga orthochromatic at metachromatic dyes coexists. Ang mga orthochromatics (eosin at methylene blue) ay nakatali sa istraktura ng cell na kung saan sila ay may kaugnayan at nagbibigay ng isang matatag na kulay na hindi magkakaiba.

Sa kabilang banda, ang metachromats (ang mga derivatives ng methylene asul na azure A at azure B), ay nag-iiba-iba ng kanilang orihinal na kulay sa sandaling nakakabit sila sa tiyak na istraktura, at maaaring kahit na may iba't ibang mga kakulay.

Sa wakas, ang hakbang na kinukuha ng solusyon sa Mayo Grünwald ay nangangailangan ng pagkakaroon ng tubig, dahil kung wala ito ang dye ay tumagos sa mga istruktura ngunit hindi ayusin. Upang mangyari ito, ang pangulay ay dapat na maging polar o pag-ionize, at sa gayon ay maaaring mag-ayos at magbigkis sa mga nauugnay na istruktura.

Teknik

materyales

- Slide slide.

- Mga Bridges ng pangkulay.

- solusyon sa Mayo-Grünwald.

- Giain na mantsa.

- Distilled water.

Nawa’y Grünwald dye concentrated solution

Ang 0.25 g ng asul na eosin-methylene (mantsa ayon kay May Grünwald) ay dapat timbangin at matunaw sa 100 ml ng methanol. Pagkatapos ang paghahanda ay halo-halong para sa 1 oras at kaliwa upang magpahinga ng 24 oras. Sa pagtatapos ng oras, nai-filter ito.

Upang mailapat ang pamamaraan, ang pangulay ng Mayo Grünwald ay dapat na lasaw tulad ng sumusunod: para sa 200 ML ng diluted dye, sukatin ang 30 ml ng puro na solusyon, magdagdag ng 20 ml ng buffer solution at 150 ml ng distilled water na nababagay sa pH7.2-7.3 . Kalaunan ay pinaghalo at sinala ito.

Giemsa stain concentrate

Ang 0.5 g ng azure-eosin-methylene na asul (mantsa ayon kay Giemsa) ay dapat timbangin, natunaw sa 50 ml ng methanol at 50 ml ng gliserin na idinagdag sa pinaghalong.

Upang maisagawa ang pamamaraan, palabnawin ang 1:10 na may solusyon sa buffer at hayaan itong magpahinga ng 10 minuto. Maaari itong mai-filter kung kinakailangan.

Paghahanda ng solusyon sa buffer sa pH 7.2

Dapat silang timbangin:

- 40 mg ng potassium di-hydrogen phosphate (KH2PO4).

- 151 mg ng di-sodium hydrogen phosphate 12-hydrate (Na2HPO4).

Ang parehong mga compound ay natutunaw sa 100 ML ng tubig.

Pamamaraan sa paglamlam ng dugo sa utak o buto

Mayroong dalawang mga mode: isang klasikong at isang mabilis.

Classic mode

1. Takpan ang mga smear para sa 2 hanggang 3 minuto gamit ang diluted na May-Grünwald solution.
2. Hugasan gamit ang buffered distilled water upang alisin ang nakaraang solusyon.
3. Takpan na may parehong buffered wash solution at mag-iwan ng 1 minuto. Ang ideya ay ang nakaraang dye ay naayos sa mga istruktura at na, sa parehong oras, ang mga cell ay hydrated.
4. Magdagdag ng 12 patak ng diluted Giemsa tincture sa buffered water at pumutok upang ihalo at homogenize. Hayaan itong magpahinga ng 15 hanggang 20 minuto.
5. Hugasan ang mga smear na may buffered distilled water at lugar upang matuyo ang hangin.
6. Ituon at tingnan ang marumi mga selula ng dugo sa ilalim ng isang light mikroskopyo gamit ang 40X layunin. Kung kinakailangan, ang 100X ay maaaring magamit.

Mabilis na mode

1. Takpan ang pahid na may tinunaw na mantsa ng May Grünwald ng 1 minuto.
2. Hugasan gamit ang buffered distilled water.
3. Takpan ng tubig na may buffered na tubig at hayaan itong magpahinga ng 1 minuto.
4. Idagdag ang tinunaw na mantsang Giemsa at umalis sa loob ng 5 minuto.
5. Hugasan gamit ang buffered distilled water at payagan upang matuyo ang hangin.

Ang mga pamamaraan na inilarawan dito ay isang gabay, ngunit dapat itong isaalang-alang na ang mga pamamaraan at oras ng paglamlam ay naiiba ayon sa komersyal na kumpanya na namamahagi ng mga reagents. Maipapayo na sundin ang mga hakbang na mahigpit na ipinahiwatig ng bawat komersyal na bahay.

Mga pamamaraan para sa pangkulay ng mga smearatic fluid

1- Takpan ang smear sa isang manipis na layer ng Mayo Grünwald solution sa loob ng 4 na minuto.

2 - Alisin ang kulay at hugasan ng distilled water.

3- Maglagay ng isang layer ng diluted Giemsa (1:10) sa distilled water sa loob ng 15 minuto.

4- Alisin ang pangulay at hugasan ng distilled water.

5- Hayaan ang tuyo at obserbahan sa ilalim ng mikroskopyo.

Inaasahang mga kulay na may mantsa ng May Grünwald Giemsa

Mahalagang Pagtutukoy

Kinakailangan ng pamamaraan na ang mga reagents at mga solusyon sa paghuhugas ay may isang pH na nababagay sa 7.2 -7.3, upang ang mga pagkakaugnay ng mga tina para sa mga istruktura ng cellular ay hindi magulong at ang inaasahang pangwakas na kulay ay hindi magkakaiba.

Aplikasyon

Ang diskarteng ito ay ginagamit ng mga laboratoryo ng klinikal upang mantsang mga paligid ng dugo at mga buto ng utak ng utak, mga seksyon ng tisyu, at cytologies.

Sa larangan ng hematological, ang pamamaraan na ito ay napakahalagang kahalagahan sa pag-aaral ng mga abnormalidad ng mga cell sa mga tuntunin ng hugis, sukat at bilang. Ito ay isang napakahalagang tool para sa pagsusuri ng ilang mga sakit, tulad ng leukemias at anemias.

Bilang karagdagan, ito ay nasa pambihirang utility kapag naghahanap ng mga parasito sa hematological (Plasmodium sp at Trypanosoma cruzi) o histological (Leishmanias sp) na mga lugar.

Malaking sittolohiya

Tungkol sa vaginal cytology, ang pamamaraan na ito ay lalong kapaki-pakinabang para sa pagmamasid sa Trichomonas vaginalis. Ito ay isang mahalagang paghahanap, dahil ang pagkakaroon nito ay nagpapasimulyo ng carcinoma sa mga larawan na kalaunan ay nawawala kapag ang parasito ay tinanggal.

Sperm sample

Ito ay isang mainam na tool para sa pag-aaral ng mga sample ng tamud, dahil nagbibigay ito ng mahalagang impormasyon sa kalidad ng tamud.

Ang data na iniaalok nito ay kailangang gawin higit sa lahat sa bilang at morpolohiya, pati na rin sa mga concomitant cells na maaaring naroroon at napakahalagang kahalagahan, tulad ng mga cell ng mikrobyo, leukocytes at epithelial cells.

Sa pagsusuri na ito posible na ilarawan ang mga abnormalidad na sinusunod sa tamud sa ulo, leeg, midpiece at pangunahing piraso.

Bilang karagdagan, maaari rin silang makatulong na ipakita ang mga kaso ng hemospermia (pagkakaroon ng mga pulang selula ng dugo sa tabod) at leucospermia o piospermia (pagtaas sa bilang ng mga leukocytes sa tamod).

Mga Sanggunian

1. Costamagna S, Prado M. Pagpapatunay ng sariwang pagsubok, Mayo Grünwald-Giemsa at Gram stains at kultura media para sa pagsusuri ng Trichomonas vaginalis. Parasitol. 2001; 25 (1-2): 60-64. Magagamit sa: scielo.
2. Merck KGaA Laboratory. Maaari Grünwald eosin methylene na asul para sa mikroskopya.
3. "May mantsa ng Mayo-Grünwald-Giemsa." Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 15 Nov 2018, 14:37 UTC. 8 Jan 2019, 04:29: en.wikipedia.org
4. Glass Chemical Panreac Laboratory. Reagents para sa mga teknolohikal na pamamaraan, hematology at microbiology. Magagamit sa: glasschemicals.com
5. Retamales E, Manzo V. Rekomendasyon para sa paglamlam ng mga smear ng dugo upang mabasa ang hemogram. Pambansang Laboratoryo at Sanggunian Biomedikal. Institute of Public Health ng Chile.
6. Sarabia L. Spermiogram ayon sa pamantayan ng WHO. Developmental Anatomy at Programang Biology. Paaralan ng Medisina. Unibersidad ng Chile. Magagamit sa: pp.centramerica.com