MANTSA NG WRIGHT: MAKATUWIRAN, MATERYALES, PAMAMARAAN, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2026

Ang Wright mantsang ay isang paglamlam pamamaraan na nilikha sa pamamagitan ng sa American pathologist James Homer Wright sa 1902, batay sa mga Romanowsky mantsa. Dahil ang mantsa ng Romanowsky ay hindi matatag, isinama ng Wright ang methanol bilang isang solvent at fixative.

Ang pangkulay na ito ay polychromatic, na nangangahulugang bumubuo ito ng maraming mga kulay depende sa istraktura na sumisipsip ng pangulay. Ang pamamaraan ng paglamlam na ito ay malawakang ginagamit upang magsagawa ng pagkakaiba-iba ng mga bilang ng puting selula ng dugo at pag-aralan ang morpolohiya ng mga pulang selula ng dugo, mga platelet, at mga leukocytes sa peripheral na dugo at utak ng buto.

Ang iba't ibang mga peripheral blood smears na may mantsa ng mantsa ni Wright. A. Talamak na leukemia B. Plasmodium vivax sa loob ng erythrocyte. C. Plasmodium falciparum, macrogametocyte. D. Lymphocyte

Napakahalaga ng aplikasyon nito, dahil ang mga abnormalidad ay makikita sa iba't ibang mga linya ng cell ng dugo, pinadali ang pagsusuri ng mga sakit tulad ng leukemia o impeksyon sa bakterya o parasito.

Marahil ito ang mga pinaka-karaniwang aplikasyon kung saan ginagamit ang diskarteng ito, gayunpaman hindi lamang ang mga ito. Kapaki-pakinabang din ito sa mga halimbawa maliban sa dugo at buto utak, tulad ng paglabas ng ilong, fecal mucus, plema, mga sample ng balat, bukod sa iba pa.

Rationale para sa mantsa ni Wright

Ang mantsa ni Wright ay ipinanganak mula sa mantsang Romanowsky, na binubuo ng isang methyl alkohol solution ng isang acidic dye (eosin Y) at isang pangunahing tinain (methylene blue) at ang kanilang mga produktong oksihenasyon.

Ang pinaghalong mga tina na ginamit sa mantsa ng Wright ay nagdudulot ng epekto na kilala bilang Romanowsky, iyon ay, nagbibigay ito ng isang magandang kulay ng lila sa nuclei ng mga leukocytes at neutrophilic granules, habang ang mga pulang selula ng dugo ay mantsa rosas.

Ang mga sangkap na responsable sa pagbibigay ng karaniwang kulay gamut ng mantsa ng Wright ay asul na B at eosin Y. Ang epekto na sinusunod ay depende sa pagbubuklod ng mga dyes sa mga istrukturang kemikal at ang pakikipag-ugnayan ng asul na B at eosin Y.

Ang mga istruktura ng acid tulad ng mga nucleic acid, nuclear protein, at ang reactive immature cytoplasm ng ilang mga uri ng cell, ayusin ang asul na B (pangunahing mantsa).

Habang ang mga pangunahing istruktura tulad ng hemoglobin, ang mga butil ng mga segment na eosinophil, bukod sa iba pang mga istruktura ng cellular, nagbubuklod ng eosin Y (acid dye).

Ang resulta ng paglamlam ay maaaring maimpluwensyahan ng iba't ibang mga kadahilanan, tulad ng pH ng Wright dye, buffer at ang solusyon sa paghuhugas; pati na rin ang oras ng paglamlam at pag-aayos.

Samakatuwid, ang bawat hakbang sa paghahanda ng mga reagents ay mahalaga at dapat isagawa nang may pansin sa bawat detalye.

materyales

Mantsa ni Wright. Para sa 100 ML ay kinakailangan:

Tumimbang ng 0.3 g ng mantsa ng Wright, sukatin ang 97 ml ng methanol at 3 ml ng gliserol.

Paghahanda

Sa isang mortar, ilagay ang mabigat na dami ng colorant ng Wright at dahan-dahang isama ang gliserol hanggang sa tuluyang matunaw ang pulbos.

Kasunod nito, idinagdag ang methanol, halo-halong at ibinuhos sa isang bote ng amber.

Bago gamitin, ang solusyon ay dapat na maialog nang may banayad na paggalaw at na-filter.

Solusyon sa buffer

Sa isang litro ng distilled water, 3.76 g ng disodium hydrophosphate (Na ₂ HPO ₄ 2H ₂ 0) kasama ang 2.1 g ng dihydrogen potassium phosphate (KH ₂ PO ₄ ) ay idinagdag.

Paghaluin nang mabuti hanggang sa matunaw ang lahat ng mga isinamang reagents. Ayusin ang pH hanggang 7.2. Ibuhos sa isang baso ng baso at panatilihin sa temperatura ng silid.

Karagdagang mga materyales na kinakailangan upang maisagawa ang pangkulay

Bilang karagdagan, ang iba pang mga materyales ay kinakailangan upang maisakatuparan ang pamamaraan ng pangkulay, ito ay: mga slide ng object o sumasaklaw sa mga bagay, tulay na pangkulay, t-shirt na may tubig o buffer para sa paghuhugas, isang timer upang mapanatili ang mga oras ng pangkulay at ilang mga materyales sa pagpapatayo. (sumisipsip na papel, gasa o koton).

Mga bahagi ng mantsa ng Wright

Methanol

Ang alkohol (methanol) ay nagsisilbing isang fixative ng dugo smear sa slide.

Ito ay karaniwang isang magkakaugnay na pagbabawas, pag-aalis ng tubig at pag-aayos ng reagent. Samakatuwid, ang pag-andar nito ay ang pag-coagulate ng mga protina at gawin itong hindi matutunaw, ngunit nang hindi talaga tinatanggihan ang mga ito.

Ang Methanol ay ang pinaka-malawak na ginagamit na pag-aayos ng smear na reagent sa lahat ng mga laboratoryo, dahil nagbibigay ito ng mas mahusay na mga resulta kaysa sa etanol. Ang perpektong konsentrasyon ay 99%.

Damper

Ang buffer (buffered solution) ay may function ng pag-aayos o pagpapanatili ng pH ng pangulay, dahil ang isang pH na nababagay sa 7.2 ay napakahalaga para sa mga istruktura ng cell upang maipasok nang maayos ang mga tina.

Sa kabilang banda, ang hakbang ng pag-aayos ng methanol ay nag-aalis ng tubig sa mga selula at tumutulong sa buffer upang matunaw ang mga ito.

Eosin (Y)

Ang Eosin ay may kaakibat para sa pagbubuo ng mga bloke dahil ito ay isang acid dye. Ang dalawang uri ng eosin ay kilala na halos kapareho sa bawat isa, kaya't ang alinman sa dalawa ay maaaring magamit, pagkuha ng parehong resulta.

Ang isa ay tinatawag na eosin Y, dilaw na eosin, o tetrabromofluorescein, at ang iba pa ay tinatawag na eosin B, mala-bughaw na erythrosin B, o dibromodinitrofluorescein. Gayunpaman, ang eosin Y ay ang pinaka-karaniwang ginagamit.

Ang pinakamahalagang pag-aari ng pangulay na ito ay ang negatibong polarya, ginagawa nitong nakakaakit ito sa positibong sisingilin na mga istruktura ng cell.

Asul na Methylene

Ito ang pangunahing pangkulay. Ang pangunahing pag-aari nito ay metachromasia, iyon ay, hindi lahat ng mga istraktura ay marumi ng parehong kulay, nakasalalay ito sa kemikal na komposisyon ng mga istruktura na kinukulay.

Ang ilan ay magiging ilaw o madilim na asul, at ang ilan ay magiging maitim na lila o maputlang lilac.

Teknik

1-Gawin ang pagkalat ng sample upang ang isang manipis na pelikula ay nananatili, alinman sa isang slide o coverlip.

2-Hayaan itong matuyo sa hangin ng halos 2 oras.

3-Ilagay ang dry smear sa paglamlam ng tulay o paglamlam ng tray na may pagkalat ng sample na nakaharap sa itaas.

4-Takpan ang sheet gamit ang Wright stain drop sa pamamagitan ng pagbagsak hanggang sa ang buong ibabaw ay sakop. Mag-iwan para sa 5 - 8 minuto.

5-Ang mantsa ay dapat na ganap na takpan ang slide, nang walang pag-ikot sa mga gilid. Kung sa panahon ng pangulay ay nagsisimula itong sumingaw, magdagdag ng ilang karagdagang mga patak.

6-Kasunod na magdagdag ng isang pantay na dami ng shock absorber, pumutok ng kaunti hanggang lumitaw ang katangian na metal na kislap. Oras 10 hanggang 15 minuto.

7-Hugasan gamit ang tubig na gripo, paglalagay ng malumanay na stream hanggang sa kulay-rosas ang sheet.

8-Sa pamamagitan ng isang gauze na nababad sa alkohol, alisin ang dye na sinunod sa likod ng slide.

9-Hayaan nang maayos ang pahid bago ilagay ang paglulubog ng langis upang tingnan ito sa ilalim ng mikroskopyo.

Kagamitan

Hematolohiya

Ito ay mainam para sa paglamlam ng peripheral blood smear, para sa pagsusuri ng makapal na mga smear ng dugo at para sa pag-aaral ng mga cell mula sa mga sample ng utak ng buto.

Dahil sa mga kemikal na katangian ng kumbinasyon ng mga tina, ang mga istruktura ng cell ay madaling makilala, at ang iba't ibang uri ng mga cell na naroroon ay maaaring makilala.

Sipon

Ang pamamaraan na ito ay lubhang kapaki-pakinabang upang makilala ang mga cell ng paglabas ng ilong (epithelial cells, segmented eosinophils, polymorphonuclear cells) sa pagsusuri ng allergy rhinitis.

parasitolohiya

Sa ganitong kahulugan, naging kapaki-pakinabang ito para sa pag-aaral ng Leishmania sp sa loob ng mga histiocytes ng subcutaneous cellular tissue sa mga ulser sa balat. Gayundin, ginagamit ito upang makilala ang mga leukocytes sa mga sample ng dumi ng tao (fecal leukogram).

Sa kasong ito, interesado sa manggagamot na malaman kung ang leukocytosis na naroroon sa dumi ng tao ay polymorphonuclear o mononuklear. Ang paghanap na ito sa fecal leukogram ay gagabay kung ito ay isang bacterial o viral infection ayon sa pagkakabanggit.

Sa kabilang banda, ang mga parasito na nagpapalipat-lipat sa dugo ay matatagpuan sa loob ng erythrocyte o libre sa plasma. Ang mga parasito na hinahangad ay Plasmodium spp, Trypanosoma cruzii at filarias, at sa beterinaryo gamot ito ay kapaki-pakinabang sa paghahanap para sa Theileria equi at Babesia caballi, mga sanhi ng ahente ng bebesiosis, lalo na sa mga kabayo.

Ang mantsang Wright at din ang mantsang Giemsa ay ginagawang posible upang makilala ang mga haemoparasite mula sa normal na mga bahagi ng cellular. Dalawang uri ng pagkalat ay maaaring magamit para sa:

Kumalat manipis

Ang dugo ay kumalat bilang isang manipis na pelikula sa isang slide. Ito ay may mantsa ng mantsa ng Wright, na inilalantad ang mga katangian ng nucleus at cytoplasm.

Makapal na pagbagsak

Ang pamamaraang ito ay ginagamit upang siyasatin ang pagkakaroon ng mga parasito sa isang mas malaking dami ng dugo.

Upang gawin ito, isang malaking patak ng dugo ang inilalagay sa isang slide. Kapag doon, dapat itong ma-defibrillated, na ginagawang mas malaki at mas malaking bilog mula sa gitna palabas, gamit ang gilid ng isa pang slide.

Sa wakas, upang ma-obserbahan ang mga parasito sa makapal na pahid, ang mga erythrocytes ay dapat lysed na may tubig.

Mga impeksyon sa paghinga

Sa antas ng paghinga, ang pamamaraan na ito ay kapaki-pakinabang din, dahil ang mga cell na naroroon sa mga sample ng plema, brongkumal ng braso o bronchoalveolar, ay mahalaga upang maitaguyod ang diagnosis.

Katulad nito, ang mga cell na polymorphonuclear at mga cell mononuclear ay maaaring makilala dito.

Bacteriology

Ang paggamit ng diskarteng ito sa bacteriology ay limitado, dahil hindi ito mabuti para sa paglamlam ng bakterya, na ang dahilan kung bakit ang iba pang mga dalubhasang pamamaraan sa paglamlam ay ginagamit para sa kanilang paglamlam.

Gayunpaman, ginamit ito upang maghanap para sa mga epithelial cells na may Chlamydia trachomatis na pagsasama ng mga katawan sa mga smeth urethral o endocervical mucosa, bagaman dapat itong kilalanin na hindi ito ang pinakamahusay na pamamaraan para dito.

Posible rin na obserbahan ang mga tulad-spiral na tulad ng bakterya tulad ng Borrelia burgdorferi sa mga pulang selula ng dugo sa mga nahawaang pasyente, pati na rin ang morulae o pagsasama ng mga katawan ng Ehrlichia sp sa cytoplasm ng mga lymphocytes, monocytes, o neutrophils sa isang smear ng dugo.

Mycology

Ang histoplasma capsulatum ay isang pathogen fungus na madalas na nasuri ng mikroskopikong pagmamasid ng iba't ibang mga sample ng tisyu, na may mantsa ng Wright.

Paano sinusunod ang mga istruktura ng sample ng dugo na may mantsa ng Wright?

Pinagmulan: Retamales E, Mazo V. Institute of Public Health, Pamahalaan ng Chile. Mga rekomendasyon para sa paglamlam ng mga smear ng dugo para sa pagbabasa ng hemogram.

Mga rekomendasyon para sa mahusay na paglamlam

Ang mga slide ng sample ng dugo ay dapat na tuyo nang kusang tuyo. Ang mga luha ay dapat na manipis hangga't maaari upang makakuha ng mas mahusay na pag-aayos ng pangulay at maiwasan ang sobrang paglamlam.

Para sa mataas na kalidad na paglamlam, ipinapayo na mantsang sa loob ng dalawang oras ng paghahanda ng pahid. Sa kabilang banda, ang perpektong sample ay dugo ng capillary, nang walang anticoagulant.

Gayunpaman, kung ang dugo ng venous ay ginagamit, dapat itong gamitin bilang isang anticoagulant EDTA at hindi heparin, dahil ang huli ay maaaring mag-deform ng mga istruktura ng cell.

Upang maiwasan ang pagkasira ng inihandang kulay, dapat itong maiimbak sa mga tuyong lugar.

Sa panahon ng proseso ng paghuhugas ang paggamit ng tubig na nababagay sa isang neutral na pH ay inirerekomenda.

Sa wakas, ipinapayong subukan ang mga pamamaraan ng paglamlam na ginagamit sa laboratoryo paminsan-minsan.

Ginagawa ito sa pamamagitan ng paglamlam ng mga sample o pinalawig na mga pattern, bilang isang kontrol sa kalidad. Mahalaga ang hakbang na ito, dahil tinitiyak nito na maayos ang paghahanda at ang mga oras ng paglamlam ay maayos na pamantayan.

Kung ang pattern ng sheet ay hindi maganda ang kulay, pagkatapos ay may mga problema na dapat malutas.

Karaniwang mga pagkakamali sa paglamlam ng Wright

Napaka maputla ang paglamlam

Ang napaka-maputla na mga smear ay karaniwang dahil sa isang napakaikling oras ng paglamlam o labis na paghuhugas. Ito ay naitama sa pamamagitan ng pagpapahaba ng oras ng pakikipag-ugnay sa pangulay o pagbawas sa oras ng paghuhugas.

Makulay na mga precipitates

Ang pagkakaroon ng mga precipitates ng pangulay sa smear ay maaaring magkaroon ng maraming mga kadahilanan, gayunpaman, ang madalas na sanhi ay: paggamit ng hindi natapos na pangulay, paglamlam sa hindi pantay na paglamlam ng mga tulay, gamit ang mga sheet na marumi sa alikabok o grasa, hindi hugasan ng mabuti kumpleto na paglamlam.

Lubhang pula o asul na smear

Ang buffer ay may pananagutan para sa pH ng pangulay. Ang mga tina na may isang pH sa ibaba na ipinahiwatig (acidic) ay magreresulta sa napaka-mapula-pula na mga smear.

Kung ang pH ng pangulay ay nasa itaas (alkalina) isang lubos na mala-bughaw na pahid.

Mode ng imbakan

Ang reagent ay dapat na naka-imbak sa temperatura ng kuwarto.

Mga Sanggunian

1. Gutiérrez V. Paghahambing sa pag-aaral sa pagitan ng pamamaraan ng paglamlam ng Wright at pagsubok ng Elisa para sa pagsusuri ng canine Ehrlichiosis sa lungsod ng San Pedro Sula, Honduras. 2008. Degree Thesis upang maging kwalipikado para sa Veterinary Medical Degree. Unibersidad ng San Carlos ng Guatemala.
2. López-Jácome L, Hernández-Durán M, Colín-Castro C, Ortega-Peña S, Cerón-González G, Franco-Cendejas F. Pangunahing mga mantsa sa laboratoryo ng microbiology. Pananaliksik sa Kapansanan. 2014; 3 (1): 10-18.
3. "Ang mantsa ni Wright." Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 18 Mayo 2018, 12:05 UTC. 8 Dis 2018, 20:37
4. Calderón A, Cardona J, Vergara Ó. Dalas ng Babesia spp. sa pangangaso ng mga kabayo, Córdoba (Colombia). Si Rev. udcaactual divulg cient. 2013; 16 (2): 451-458.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
6. Retamales E, Mazo V. Institute of Public Health Government ng Chile. Mga rekomendasyon para sa paglamlam ng mga smear ng dugo para sa pagbabasa ng hemogram.