Ang mannitol salt agar o manitol salt ay isang solidong medium na pumipili at kaugalian na kultura. Nilikha ito ni Chapman para sa paghihiwalay ng pathogenic Gram-positive cocci, lalo na ang Staphylococcus aureus.
Gayunpaman, kapaki-pakinabang din na ibukod ang Staphylococus epidermidis, na kung minsan ay maaaring maging isang oportunistikong pathogen, at Staphylococcus saprophyticus, isang kinikilalang urinary pathogen, bukod sa iba pang mga species.
A. Fiola na may handa na maalat na mannitol agar medium. B. Mga salt plate na mannitol agared na may fermenting at non-fermenting mannitol bacterial strains. Pinagmulan: A at B: Mga larawan na kinunan ng may-akda na MSc. Marielsa Gil.
Ang ilang Enterococcus ay may kakayahang lumaki sa daluyan na ito, pati na rin ang ilang mga rod rod-positive spore-form na gram.
Ang daluyan na ito ay lubos na kapaki-pakinabang sa pagsusuri ng mga klinikal na sample, ngunit ginagamit din ito sa pag-aaral ng microbiological ng pagkain at sa kalidad na kontrol ng mga produktong pang-industriya, tulad ng mga pampaganda, gamot, at iba pa.
Ang Salty Mannitol Agar ay binubuo ng mga extract at peptones mula sa karne ng baka, triptein, mannitol, sodium chloride, phenol red at agar.
Batayan
Ang mannitol agar ay pumipili salamat sa mataas na konsentrasyon ng asin. Ang kaasalan ay kumikilos bilang isang inhibitory na sangkap at pinipigilan ang paglaki ng mga negatibong bakterya ng Gram.
Ito rin ay pagkakaiba-iba dahil sa pagkakaroon ng mannitol ng karbohidrat at ang tagapagpahiwatig ng phenol red pH. Mula dito, ang bakterya na may kakayahang mag-fermenting mannitol ay gumagawa ng mga acid, acidifying the medium, pag-on ang mga kolonya at medium yellow.
Sa kabilang banda, ang mga kolonya na hindi nagpapataba ng mannitol ay lumalaki sa medium na kumukuha ng mga sustansya na ibinigay ng mga extract at peptones ng karne at triptein. Mula doon kinuha ng bakterya ang carbon, nitrogen, bitamina at mineral na kinakailangan para sa kanilang paglaki.
Ang mga kolonya sa kasong ito ay maaaring mahina o malakas na kulay-rosas, at ang daluyan ay nananatiling parehong kulay o pagbabago sa fuchsia.
Ang Agar ay ang sangkap na nagbibigay ng pare-pareho sa medium.
Paghahanda
Upang maghanda ng isang litro ng maalat na mannitol agar, ang 111 g ng dehydrated medium mula sa ginustong komersyal na kumpanya ay timbang at natunaw sa 1000 ml ng distilled water, gamit ang isang prasko.
Ang init ay inilalapat na may madalas na pagpapakilos ng daluyan upang mapagbuti ang proseso ng paglusaw. Pakuluan nang isang minuto.
Ang flask ay inilalagay sa autoclave sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto.
Sa pagtatapos ng oras, alisin ang takilya mula sa autoclave, hayaang magpahinga ito at maglingkod sa pagitan ng 15 hanggang 20 ml sa sterile pinggan na Petri kapag ang temperatura ay humigit-kumulang na 50 hanggang 55 ° C.
Pinapayagan itong palakasin, pag-order sa isang baligtad na paraan sa mga plaqueros at panatilihin sa refrigerator hanggang sa gamitin. Bago mag-seeding ng isang sample, hintaying maabot ang plato sa temperatura ng silid.
Ang mga plato ay binubuo sa pamamagitan ng pagtusok o sa pamamagitan ng pang-ibabaw na punla na may drigalski spatula. Ang pangwakas na pH ng handa na daluyan ay dapat na 7.4 ± 0.2
Ang kulay ng dehydrated medium ay light beige at ang kulay ng handa na daluyan ay orange na pula.
Aplikasyon
Dahil sa mataas na pagkakapili nito, ang daluyan na ito ay mainam para sa paghahasik ng mga sample na may halo-halong flora kung saan ang pagkakaroon ng Staphylococus aureus, bilang pangunahing pathogen ng genus na ito, ay hinahangad.
Sa kahulugan na ito, ang isa sa mga madalas na paggamit nito ay sa pagsusuri ng microbiological ng pharyngeal exudates at mga sample ng ilong na naglalabas, lalo na upang makita ang mga carrier ng asymptomatic S. aureus.
Ang ilang mga bansa ay nagpatupad ng pagsusuri na ito bilang isang kinakailangang sapilitan para sa mga taong nais magtrabaho bilang mga nagtitinda ng pagkain.
Pinipigilan ng kontrol na ito ang pagkontrata ng mga taong carrier ng S. aureus, kaya maiwasan ang napakalaking pagkalason sa pagkain, dahil sa pagkonsumo ng pagkain na kontaminado ng staphylococcal enterotoxin.
Maaari rin itong isama sa pag-aanak ng mga impeksyon sa sugat, kultura ng dugo, CSF, lavage ng bronchoalveolar, bukod sa iba pa.
Ang salted mannitol agar ay kapaki-pakinabang para sa muling pagsasaayos ng mga kolonya mula sa mga kultura ng ihi mula sa CLED agar o dugo agar na ang Gram ay nagsiwalat ng Gram na positibong cocci sa mga kumpol.
May bisa din ito sa pagsusuri ng microbiological ng pagkain, inuming tubig, mga lupa, bukod sa iba pang mga aplikasyon.
QA
Kapag ang isang batch ng mga plate na may maalat na mannitol agar ay inihanda, ipinapayong magsagawa ng isang kontrol na kalidad. Ang mga kontrol ng mga galaw ay inihasik upang ipakita kung mayroong paglago o hindi.
Ang kilalang Staphylococcus aureus strains ay maaaring magamit bilang isang positibong kontrol. Dapat itong lumago nang kasiya-siyang pagbuo ng mga dilaw na kolonya, at ang medium ay lumiliko din sa parehong kulay.
Gayundin, ito ay maginhawa upang isama ang isang kilalang pilay ng Staphylococcus epidermidis. Dapat itong lumago nang kasiya-siyang pagbuo ng mga kulay rosas na kolonya, at ang daluyan ay nananatili ang parehong kulay o nagpapadilim sa isang mas malakas na rosas.
Bilang isang negatibong kontrol, ginagamit ang mga strain na hindi dapat lumago sa daluyan na ito. Halimbawa, ang isang kilalang pilay ng Escherichia coli o Klebsiella pneumoniae ay maaaring lumaki. Ang inaasahang resulta ay kumpleto na pagsugpo, iyon ay, walang paglaki.
Bilang karagdagan, ang isang hindi edukadong plate ay dapat na ma-incubated. Sa loob nito ay dapat na walang paglago o pagbabago ng kulay.
Mahalaga na ang plate ay hindi ginagamit kung may mga palatandaan ng pagkasira, tulad ng kontaminasyon, pag-aalis ng tubig, pagkawalan ng kulay, bukod sa iba pa.
Pangwakas na mga saloobin
Kapag gumagamit ng maalat na mannitol agar medium, may ilang mahahalagang aspeto na dapat isaalang-alang:
- Ang pagkuha ng isang paglaki ng dilaw na kolonya ay hindi nagpapahiwatig na ito ay Staphylococcus aureus. Dapat alalahanin na ang ilang mga strain ng Enterococcus ay may kakayahang lumaki sa daluyan na ito at pagbuburo ng mannitol, pati na rin ang ilang mga spore-positive rod rod.
Samakatuwid, mahalaga na magsagawa ng Gram sa kolonya at isang pagsubok para sa catalase.
- Sa kabilang banda, dapat itong isaalang-alang na ang iba pang mga species ng Staphylococcus maliban sa aureus ay may kakayahang mag-fermenting mannitol. Samakatuwid, mahalaga na i-subculture ang kolonya sa isang nutrient na sabaw na kukuha mula doon at magsagawa ng coagulase test.
Kabilang sa mga species ng Staphylococcus na kahalagahan ng klinikal para sa tao na ang pagbuburo sa mannitol ay: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, bukod sa iba pa.
Ang iba ay maaaring magbigay ng isang variable na reaksyon, iyon ay, kung minsan positibo at kung minsan negatibo. Ang ilan ay ang S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, at iba pa.
-Hindi inirerekumenda na kumuha ng mga kolonya nang diretso mula sa mannitol agar upang maisagawa ang pagsubok ng coagulase, dahil ang mataas na konsentrasyon ng asin sa daluyan ay maaaring makagambala sa resulta.
- Sa pangkalahatan, inirerekumenda na mapalubha ang mga plato na binhing may maalat na mannitol hanggang sa 48 oras, dahil ang ilang mga galaw ng S. aureus ay maaaring mabagal na mag-ferment ng mannitol, bagaman hindi ito madalas.
Mga Sanggunian
- Britannia Laboratories. Salty mannitol agar. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
- "Salty mannitol agar". Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 31 Oct 2018, 19:08 UTC. 17 Jan 2019, 20:55, magagamit sa: es.wikipedia.org.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. (Ika-5 ed.). Argentina, Editorial Panamericana SA
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
- Mga Laboratoryo ng BD. BD Mannitol Salt Agar. 2013.Magagamit sa: bd.com.