PAGHIWALAY NG MGA MICROORGANISM: MGA DISKARTE AT KAHALAGAHAN - BIOLOGY - 2025

Ang paghihiwalay ng mga microorganism ay nagsasangkot ng isang hanay ng mga pamamaraan na ginamit upang kunin at paghiwalayin ang mga species ng microbes na interes mula sa kanilang likas na tirahan sa isang vitro habitat. Ang mga pamamaraan na ito ay isang hanay ng maraming mga pangunahing at kinakailangang mga tool para sa mga pag-aaral ng microbiological.

Karamihan sa mga microorganism na kilala at na tinukoy ng agham, ay ang mga nagawang ihiwalay at itago sa mga lalagyan na gayahin, sa bahagi, ang mga intrinsikong kondisyon ng mga lugar kung saan sila nakatira.

Karaniwang imahe ng mga kolonya ng mga bakterya na tulad ng mga microorganism na nakahiwalay sa isang solidong daluyan sa loob ng isang ulam na Petri (Larawan ni nadya_il sa www.pixabay.com)

Marahil ang isa sa mga unang lalaki na nagsasanay sa paghihiwalay ng mga microorganism ay si Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), na nangolekta at naghiwalay na mga halimbawa ng mga microbes mula sa isang malaking bilang ng mga lugar at ekosistema upang maingat na obserbahan ang mga ito sa ilalim ng daan-daang mga mikroskopyo na kanyang idinisenyo. .

Gayunpaman, hindi hanggang sa panahon ng mga siyentipiko na sina Louis Pasteur at Robert Koch, sa panahon ng ika-19 na siglo, ang mga mahigpit na kasanayan ay nagsimula na isinasagawa upang ihain ang mga tiyak na microorganism, lahat upang mapag-aralan ang mga ito nang detalyado. .

Hindi tulad ni Leeuwenhoek, ang mga mananaliksik na ito ay nakatuon sa paghiwalayin ang mga tinukoy na species mula sa iba pang mga species ng mikrobyo sa kapaligiran. Bilang karagdagan, interesado silang panatilihing buhay sila hangga't maaari sa labas ng kanilang likas na kapaligiran.

Ngayon, ang mga tumpak na pamamaraan ay binuo para sa paghihiwalay at paglaki ng maraming iba't ibang mga microorganism na nakuha mula sa halos anumang kapaligiran sa biosoffer.

Mga diskarte sa paghihiwalay ng mikroorganismo

Ang lahat ng mga microorganism na paghihiwalay ay nagsisimula sa koleksyon ng isang sample sa ligaw kung saan matatagpuan ang mga microorganism ng interes. Ang mga lugar na ito ay maaaring maging mga sugat sa mga tisyu ng hayop o halaman, soils o substrates, puddles, dagat, mga ibabaw tulad ng balat, atbp.

Ang sample ay kinukuha sa pamamagitan ng pagpindot o pagsuporta sa isang lalagyan na may daluyan na may naaangkop na mga kinakailangan para sa paglaki ng mga microorganism sa ibabaw mula sa kung saan ito ay nais na ibukod. Sa lalagyan na ito makakakuha ka ng kung ano ang kilala bilang isang "kultura" ng mga microbes.

Kadalasan, ang unang ani na makuha mula sa likas na tirahan ay walang alinlangan na isang "halo-halong ani", iyon ay, binubuo ito ng isang malaking bilang ng mga iba't ibang mga species ng microbes.

Gayunpaman, ang karamihan sa mga species ng microorganism ay maaaring ihiwalay sa bawat isa sa laboratoryo, na naghahanap upang makakuha ng mga kultura ng microorganism kung saan ang mga species ng interes lamang ay lumalaki o, sa madaling salita, nakakakuha ng "purong kultura".

Sa esensya, ang proseso na isinasagawa upang makakuha ng "purong kultura" ay kilala bilang "paghihiwalay ng mga microorganism".

Mayroong isang malaking bilang ng mga pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga microorganism, at may ilang mga tiyak sa isang tiyak na uri ng microorganism sa partikular. Sa iba pang mga kaso, posible na makakuha ng isang purong kultura lamang sa pamamagitan ng pagkolekta ng sample mula sa natural na kapaligiran.

Kabilang sa mga pinaka ginagamit na diskarte sa paghihiwalay upang paghiwalayin ang isang species ng interes na matatagpuan sa halo-halong media media ay:

Mga gasgas o guhitan

Marahil ito ang pinaka malawak na ginagamit na pamamaraan para sa paghiwalayin ang mga microorganism. Ang pamamaraan na ito ay binubuo ng paghahanda ng isang sterile solid medium kasama ang lahat ng mga nutritional compound na kinakailangan para sa paglaki ng microorganism sa isang lalagyan ng baso, tulad ng isang ulam na Petri.

Ang paggamit ng isang pinong instrumento, sa pangkalahatan ay itinuturo, ang microorganism na ihiwalay sa halo-halong kultura ay hinawakan, kung gayon, sa sterile solid medium, ang dulo ng instrumento na kung saan ang microorganism ay naantig ay nagsimulang mag-slide mula sa gilid papunta sa buong buong Plaka.

Ginagawa itong intensively pabalik-balik sa buong ibabaw ng solid o nababagabag na daluyan, na parang isang zig-zag. Ito ay karaniwang ginagawa hanggang sa isang third ng diameter ng agar sa plate ay sakop.

Pagsasanib sa daluyan o patong

Para sa pamamaraang ito, ang isang paglusaw ng daluyan kung saan ang nakolekta na live na microbes ay isinasagawa hanggang sa punto na ilang daang mga selula lamang ang natitira para sa bawat milliliter ng daluyan kung saan sila ay natunaw.

Mula sa pagbabanto na ito ng ilang mga milliliter ay kinuha at halo-halong may medium na idadagdag sa lalagyan bago ito solidify. Bilang isang pinaghalong ay ginawa sa pagitan ng agarized medium at ang likidong daluyan kung saan ang mga microorganism, nananatili silang nalulubog sa medium at makikita lamang hanggang sa lumaki sila bilang isang kolonya.

Tulad ng pagbuo nila bilang isang kolonya, mas madaling paghiwalayin ang mga ito mula sa natitirang bahagi ng mga microorganism kasama ang iba pang mga pamamaraan tulad ng pagkalusot, halimbawa.

Mga seryal na pantunaw

Ang pamamaraang ito ay binubuo ng paggawa ng mga serial dilutions ng medium kung saan natagpuan ang mga microorganism. Ang isang halimbawa nito ay ang mga panlabas na ginawa upang linisin ang Lactococcus lactis o Lactobacillus acidophilus, mga bakterya na responsable para sa paggawa ng keso at yogurt.

Humigit-kumulang sa 1 milliliter ay kinuha mula sa isang tubo na naglalaman ng maasim na gatas o dati na may fermented na yogurt at ang milliliter na ito ay inoculated sa sterile milk na walang microorganism. Nang maglaon, humigit-kumulang isang milliliter ng nasabing gatas ay kinuha at ang proseso ay paulit-ulit.

Ito ay paulit-ulit na humigit-kumulang tatlo o apat na magkakasunod na beses, na ginagawang mas malamang na makakuha ng Lactococcus lactis o Lactobacillus acidophilus sa isang daluyan na nakahiwalay mula sa mga kontaminado na maaaring kumakatawan sa iba pang mga microbes.

Mga detalyadong litrato ng site at mga tipikal na materyales para sa paghiwalay ng mga microorganism (Larawan ni Sintija Valucka sa www.pixabay.com)

Pamamaraan ng Pagpapayaman

Ang pamamaraang ito ay nakamit sa pamamagitan ng paglaki ng mga microorganism sa media media na may mga kondisyon na nagpapasigla o nagpapadali sa paglaki ng mga species ng interes at, sa maraming kaso, sa ilalim ng mga kondisyon na pumipigil sa paglaki ng iba pang mga kontaminadong microorganism.

Ang bakterya ng genus Salmonella ay lumalaki sa media media na yumayaman sa selenite, dahil ang mga microorganism na ito ay nagbabago sa selenium upang mai-metabolize ito. Ang selenite sa daluyan ay nahihirapan na asimahin ang mga nutrisyon para sa mga microorganism maliban sa salmonellas.

Natatanging o eksklusibong pamamaraan

Ito marahil ang pinakamahirap at hindi gaanong epektibong pamamaraan para sa paghiwalayin ng mga microbes. Ito ay nagsasangkot ng paglalagay ng isang patak ng daluyan (sample) kung saan ang mga microorganism ay nakalagay sa isang sterile na coverlip, at pagkatapos ay ilagay ito sa entablado ng mikroskopyo.

Nang maglaon, habang sinusubaybayan, ang isang solong cell ay tinanggal sa tulong ng isang sterile micro-pipette. Ang pagbaba ay inilalagay sa isa pang sterile na coverlip na natupok sa naaangkop na temperatura para sa microorganism. Sa wakas, muli itong sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo upang ipakita ang paglaki.

Kung sa muling pag-obserba ang mga bagong selula ay nabuo mula sa indibidwal na cell na kinuha, ang mga ito ay idinagdag sa isang sterile medium medium upang makakuha ng isang ganap na nakahiwalay na purong kultura.

Mga pasadyang pamamaraan

Maraming mga iba't ibang mga mikrobyo sa planeta Lupa na nakakalat sa halos lahat ng mga kilalang ekosistema. Ang ilang mga microorganism ay kilala bilang Extremophiles at nangangailangan ng natatanging mga kondisyon para sa kanilang pag-unlad at paglaki.

Ang mga matinding kondisyon na ito ay kapaki-pakinabang at hindi nakakapinsala para sa paghihiwalay, dahil, bagaman pinapayagan lamang nila ang paglaki ng mga microorganism na ito, maaari silang maging mahirap na muling likhain sa vitro.

Kahalagahan

Ang paghihiwalay ng mga microorganism ay kumakatawan sa isa sa pinakamahalagang pagsulong para sa lugar ng agham at gamot. Pinayagan nito ang sangkatauhan na pag-aralan at bumuo ng mga epektibong paggamot laban sa iba't ibang mga mikrobyo na pathogen.

Sa kasalukuyan kilala itong sigurado na ang mga microorganism ay bumubuo ng isang mahalagang bahagi ng lahat ng mga ecosystem, kaya ang pagkamit ng paghihiwalay ng ilan sa mga ito na may kamag-anak na kahalagahan para sa tao ay pinapayagan ng mga mananaliksik na pag-aralan silang masinsinang, upang maunawaan nang malalim. ang papel nito sa bawat ekosistema.

Mga Sanggunian

1. De Kruif, P. (1996). Mga mangangaso ng mikrobyo. Houghton Mifflin Harcourt.
2. López, MJ, Nichols, NN, Dien, BS, Moreno, J., & Bothast, RJ (2004). Ang paghihiwalay ng mga microorganism para sa biological detoxification ng lignocellulosic hydrolysates. Inilapat na Mikrobiolohiya at Biotechnology, 64 (1), 125-131.
3. Spigno, G., Tramelli, L., Galli, R., Pagella, C., & De Faveri, DM (2005). Biofiltration ng dichloromethane vapors: paghihiwalay ng mga microorganism.
4. Tresner, HD, & Hayes, JA (1970). Pinahusay na pamamaraan para sa pagbubukod ng mga microorganism ng lupa. Appl. Kalangitan. Microbiol. , 19 (1), 186-187.
5. Willey, JM, Sherwood, L., & Woolverton, CJ (2009). Ang mga prinsipyo ng Prescott ng microbiology. Boston (MA): McGraw-Hill Mas Mataas na Edukasyon.