BAIRD PARKER AGAR: PUNDASYON, PAGHAHANDA AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang agar Baird Parker ay isang solidong medium na pumipili at kaugalian na kultura. Nilikha ito noong 1962 para sa pagtuklas at pagbibilang ng positibong staphylococci (Staphylococcus aureus).

Binubuo ito ng pancreatic hydrolyzate ng kasein, extract ng karne, lebadura ng lebadura, lithium klorida, glycine, sodium pyruvate, potassium tellurite, agar at egg yulsion.

Karaniwang Staphylococcus aureus colonies sa Baird Parker agar. Pinagmulan: Daizy John

Ang Baird Parker Agar ay batay sa kakayahan ng S. aureus upang mabawasan ang tellurite at makagawa ng lecithinase. Ang parehong mga pag-aari ay bumubuo ng isang kolonya na may mga tiyak na katangian para sa species na ito. Samakatuwid, ito ay lubos na epektibo sa pagtuklas ng microorganism na ito.

Ang karaniwang mga kolonya ng S. aureus ay itim o madilim na kulay-abo, na may isang walang kulay na hangganan at isang light halo na pumapaligid sa kanila, na nag-iiba sa kanila mula sa iba pang mga microorganism. Ang pathogen na ito ay matatagpuan sa mga klinikal na sample, tubig, kosmetiko, at hilaw o lutong pagkain.

Ang diagnosis o pagtuklas nito ay pinakamahalaga, dahil sa iba't ibang mga pathologies na ginawa nito, tulad ng pagkalason sa pagkain, scalded na balat sindrom, nakakalason na shock syndrome, abscesses, meningitis, septicemia, endocarditis, bukod sa iba pa.

Batayan

Nakapagpapalakas na kapangyarihan

Ang pancreatic hydrolyzate ng casein, extract ng karne at yeast extract ay ang mga mapagkukunan ng mga nutrisyon, bitamina at mineral na kinakailangan para sa pangkalahatang pag-unlad ng microbial, habang ang pyruvate at glycine ay mga compound na pabor sa tiyak na paglago ng Staphylococcus aureus.

Pinili

Ang Baird Parker Agar ay pumipili dahil naglalaman ito ng mga sangkap na pumipigil sa paglaki ng kasamang flora, habang isinusulong ang pagbuo ng S. aureus. Ang mga inhibitory compound ay lithium klorido at potassium tellurite.

Pagkakaiba-iba

Ginagawa ng daluyan na ito upang maiba ang S. aureus mula sa natitirang coagulase negatibong Staphylococci. Ang S. aureus ay may kakayahang bawasan ang tellurite upang malaya ang metal na blackuriuri, na bumubuo ng itim o madilim na kulay-abo na mga kolonya.

Gayundin, ang egg yolk ay nagbibigay ng mga substrate upang ipakita ang pagkakaroon ng enzyme lecithinase at lipase. Ang S. aureus ay lecithinase positibo at samakatuwid ang isang malinaw na halo ay masusunod sa paligid ng kolonya, na nagpapahiwatig na ang lecithin ay hydrolyzed.

Sa kahulugan na ito, ang hitsura sa agar na ito ng makintab na itim o madilim na kulay-abo na mga kolonya na may isang light halo sa paligid ng mga ito ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng S. aureus.

Kung ang isang zone ng pag-ulan ay bumubuo ito ay nagpapahiwatig ng aktibidad ng lipase. Ang ilang mga strain ng S. aureus ay lipase positibo at ang iba ay negatibo.

Sa kaganapan na ang S. aureus ay lipase positibo, isang lugar ng kakatakot ay masusunod sa paligid ng itim o madilim na kulay-abo na kolonya, na sinusundan ng isang light halo dahil sa pagkilos ng lecithinase.

Ang mga kolonya ng bakterya maliban sa S. aureus na may kakayahang lumaki sa daluyan na ito ay bubuo ng mga kolonya na walang kulay o kayumanggi na walang nakapaligid na halo.

Ang mga itim na kolonya ng itim ay maaari ring makita na may o walang isang walang kulay na hangganan, ngunit walang ilaw na halo. Ang mga kolonyang ito ay hindi dapat isaalang-alang, hindi sila tumutugma sa S. aureus.

Paghahanda

Egg na pula ng itlog

Kumuha ng isang sariwang itlog ng manok, hugasan mo ng mabuti at ilagay ito sa 70% na alkohol sa loob ng 2 hanggang 3 oras. Ang itlog ay pagkatapos ay binuksan nang aseptiko at ang puti ay maingat na nakahiwalay sa pula ng itlog. Pagkaraan nito, ang 50 ML ng pula ng itlog ay kinuha at halo-halong may 50 ml ng sterile na physiological solution.

Poturum na namumulaklak 1% w / v

Ang ilang mga komersyal na bahay ay nagbebenta ng 1% potassium tellurite na handa nang gamitin. Ito ay idinagdag sa daluyan bago ang medium ay matatag.

Upang ihanda ang solusyon na ito sa laboratoryo, ang 1.0 g ng potassium tellurite ay timbangin at natunaw sa isang bahagi ng tubig. Kasunod nito, ang dami ng tubig ay nakumpleto hanggang sa umabot sa 100 ml. Ang solusyon ay dapat isterilisado ng paraan ng pagsasala.

Paghahanda ng medium medium

Tumimbang ng 60 g ng dehydrated medium at matunaw sa 940 ml ng distilled water. Hayaang umupo ang pinaghalong halos 5-10 minuto.

Mag-apply ng init sa pamamagitan ng pagpapakilos ng daluyan ng madalas upang mapabuti ang proseso ng paglusaw. Dalhin sa isang pigsa nang isang minuto. Sterilize sa autoclave sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto.

Hayaang tumayo hanggang sa maabot ang isang temperatura ng 45 ° C at magdagdag ng 50 ML ng emolisyon ng pula ng itlog at 10 ml ng 1% tellurite. Paghaluin nang mabuti at ibuhos ang 15-20 ML sa sterile pinggan Petri.

Payagan na palakasin, mag-order baligtad sa mga plaquer at mag-imbak sa ref hanggang magamit.

Ang panghuling pH ng handa na daluyan ay dapat na 6.8 ± 0.2.

Bago mag-seeding ng isang sample, hintaying maabot ang plato sa temperatura ng silid. Binhi ang mga plato sa pamamagitan ng pag-agaw o sa pamamagitan ng pagbubulusok sa ibabaw ng isang Drigalski spatula.

Ang kulay ng dehydrated medium ay light tan at ang kulay ng handa na daluyan ay light amber.

Gumamit

Mga sample sa klinika

Ang mga klinikal na sampol ay inihasik nang diretso, na naghuhugas ng bahagi ng materyal sa isang dulo ng plato, at mula doon ay nahilo ito sa pagkapagod. Mag-incubate ng 24 hanggang 48 na oras sa 35-37 ° C.

Mga sample ng pagkain

Tumimbang ng 10 gr ng sample ng pagkain at homogenize sa 90 ml ng 0.1% na tubig ng peptone, mula doon ay naghanda kung kinakailangan. Inoculate ang mga plate sa triplicate na may 0.3 ml ng mga handa na solusyon, at mga binhi sa ibabaw na may isang Drigalski spatula. Mag-incubate ng 24 hanggang 48 na oras sa 35-37 ° C.

Ang pamamaraang ito ay nagbibigay-daan upang mabilang ang karaniwang mga kolonya na nakuha at perpekto kapag ang pagkakaroon ng S. aureus ay pinaghihinalaang higit sa 10 CFU bawat g / ml ng sample.

Kung ang halaga ng S. aureus ay pinaghihinalaang maliit o mayroong maraming kasamang flora, iminumungkahi na pagyamanin ang sample sa trypticase toyo na may 10% NaCl at 1% sodium pyruvate. Itaguyod nito ang paglago ng S. aureus at pagbawalan ang pag-unlad ng kasamang flora. Ang mga turbid na tubo ay nakatanim sa Baird Parker agar.

Mga sample ng tubig

Sa isang isterilisadong sistema ng pagsasala ng vacuum, 100 ml ng tubig ng pag-aaral ay na-filter, at pagkatapos ay ang 0.4 micron microporous lamad ay tinanggal na may isang sterile forceps at inilagay sa isang plate ng Baird Parker. Mag-incubate ng 24 hanggang 48 na oras sa 35-37 ° C. Ang pamamaraan na ito ay nagbibigay-daan para sa pagbibilang ng mga pangkaraniwang kolonya ng S. aureus.

QA

Ang mga kilalang strain tulad ng Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071 ay maaaring magamit upang suriin ang kalidad ng Baird Parker agar.

Sa kaso ng S. aureus ATCC strains, kilala ito upang mabawasan ang tellurite, at ang mga ito ay positibo ng lipase at lecithinase. Samakatuwid, dapat mayroong isang kasiya-siyang pag-unlad at palaguin ang mga kolonya ng matambok na may isang itim na sentro at walang kulay na hangganan, na may isang hindi kanais-nais na halo at isang magaan na kalawakan.

Para sa bahagi nito, inaasahang mabubuo ng S. epidermidis na hindi maganda sa daluyong ito, na may kayumanggi-kulay-abo sa mga itim na kolonya, nang walang magaan na halo.

Para sa E. coli at P. mirabilis inaasahan na maging ganap o bahagyang pipigilan. Sa kaso ng pag-unlad, ang mga kolonya ng kayumanggi ay bubuo nang walang opaque area o isang light halo.

mga rekomendasyon

-Ang daluyan ay hindi dapat pinainit pagkatapos ng pagdaragdag ng tellurite at itlog ng itlog.

-Ang paghahanda ng emolisyon ng itlog ng itlog at ang pagdaragdag nito sa gitna ay isang napaka-mahina na hakbang para sa kontaminasyon. Ang matinding pangangalaga ay dapat gawin.

-Kung mayroong pagkakaroon ng mga tipikal na kolonya ng S. aureus, dapat itong kumpirmahin sa pamamagitan ng pag-mount ng coagulase test sa sinabi na pilay.

-Kung mayroong mga pagdududa na mga resulta sa coagulase, dapat na mai-mount ang iba pang mga pagsubok sa pagpapatunay.

-Haging maingat na huwag malito ang pagkakaroon ng mga tipikal na kolonya ng S. aureus na may mga itim na kolonya ng itim.

Mga Sanggunian

1. Mga nag-aambag sa Wikipedia. Baird-Parker agar. Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. Marso 15, 2017, 19:36 UTC. Magagamit sa: wikipedia.org/ Nasuri noong Pebrero 18, 2019
2. Mga Laboratoryo ng BD. Baird Parker Agar. 2006.Magagamit sa: bd.com
3. Britannia Laboratories. Baird Parker agar base. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
4. Francisco Soria Melguizo Laboratories. 2009. Baird Parker Agar. Magagamit sa: http://f-soria.es/Inform
5. Britannia Laboratories. Potasa tellurite. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. Pagdala ng enterotoxigenic Staphylococcus aureus type A, sa nasopharyngeal smears sa mga handler ng pagkain. Rev Med Chile 2017; 145: 1559-1564
7. Pamantayang Pangunahing Tipan ng Venezuelan 1292-89. (1989). Mga Pagkain. Paghiwalay at enumeration ng Staphylococcus aureus. Magagamit sa: sencamer.gob.ve