Ang cetrimide agar o cetrimide ay isang selective solid medium medium na idinisenyo para sa paghihiwalay ng Pseudomonas aeruginosa. Ito ay batay sa pagpapakita ng paggawa ng mga katangian ng mga pigment ng species na ito at ginawa mula sa pagbabago ng Tech agar, na nilikha ni King, Ward at Raney.
Ang orihinal na pormula ay naglalaman ng mga asing-gamot ng magnesium chloride, potassium sulfate, pancreatic digestion ng gelatin, at agar-agar. Ang pagbabago ng pormula ay binubuo ng pagdaragdag ng cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) at gliserol.
Cetrimide agar seeded na may Pseudomonas aeruginosa Pinagmulan: BiotechMichael, mula sa Wikimedia Commons
Ang cetrimide agar ay kapaki-pakinabang para sa pag-aaral ng microbiological ng mga sample kung saan ang pagkakaroon ng Pseudomonas aeruginosa ay pinaghihinalaang. Dapat pansinin na ang bacterium na ito ay napakahalaga, dahil bagaman bahagi ito ng normal na microbiota ng kapaligiran, madalas itong kumikilos bilang isang oportunidad na pathogen.
Para sa kadahilanang ito, ang isa sa mga pinaka-karaniwang problema na sanhi ng mikrobyo na ito ay ang mga impeksyon sa nosocomial, iyon ay, ang mga nangyayari sa loob ng kapaligiran ng ospital, na umaatake sa mga pasyente na may nalulumbay na immune system.
Sa kabilang banda, dahil sa kaakibat ng microorganism na ito na may kahalumigmigan, ang pinaka-mahina na target na kontaminasyon ay: tinulungan ang mga kagamitan sa paghinga, gamot, nebulizer, mga mapagkukunan ng tubig, air conditioner, disimpektante, solusyon sa sabon, injectable solution, bukas na sugat , catheters, urinary tubes, bukod sa iba pa.
Sa kahulugan na ito, ang cetrimide agar ay kapaki-pakinabang upang maisakatuparan ang mga kontrol ng microbiological at kultura sa mga naunang nabanggit na elemento.
Batayan
Ang cetrimide agar ay batay sa kakayahan ng daluyan upang maitaguyod ang paglaki ng P. aeruginosa, pasiglahin ang paggawa ng mga pigment nito at pagbawalan ang paglaki ng iba pang mga microorganism.
Ang mga pag-aari na ito ay dahil sa pag-andar ng bawat isa sa mga sangkap nito. Ang gelatin peptone na kasalukuyan ay nagsisilbing mapagkukunan ng nitrogen, bitamina at mineral. Ang gliserol o gliserin ay gumagana bilang isang mapagkukunan ng carbon.
Para sa bahagi nito, ang cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) ay ang sangkap na pumipigil sa paglaki ng bakterya maliban sa P. aeruginosa, kabilang ang iba pang mga species na kabilang sa parehong genus.
Ang paglitaw ay nangyayari dahil ang pintramide ay kumikilos bilang isang cationic detergent, na namamahala upang ma-destabilize ang lamad ng plasma ng karamihan sa mga bakterya, maliban sa P. aeruginosa at ilang iba pa na namamahala upang mabuhay.
Sa kabilang banda, naglalaman ito ng magnesium chloride at potassium sulfate. Ang mga compound na ito ay nagpapasigla ng expression na phenotypic na nauugnay sa kakayahan ng Pseudomonas aeruginosa upang makabuo ng iba't ibang mga pigment, kabilang ang: pyocyanin, pyoverdin, pyorrubin, pyomelanin, at fluorescein. Sa wakas, naglalaman ito ng agar-agar, na nagbibigay ito ng isang matatag na pagkakapare-pareho.
Pagbibigay kahulugan
Ang interpretasyon ng paglago na nakuha sa agar na ito ay isinasagawa tulad ng sumusunod:
Ang pagmamasid sa bilog, makinis na mga kolonya na may regular na mga gilid, kasama ang paggawa ng asul-berde, berde, kayumanggi o mapula-pula na mga pigment, kasama ang paglabas ng amoy ng prutas (aminoacetophenone), ay isang presumptive na resulta ng pagkakaroon ng bacterium na ito sa sinabi sample.
Sa kabilang banda, ang pagmamasid ng isang maliwanag na berde-dilaw na pigment sa mga kolonya ay nagpapahiwatig ng P. aeruginosa kapag ang plato ay nakalantad sa ultraviolet light.
Fluorescence ng P. aeruginosa colonies sa cetrimide agar sa ilalim ng ilaw ng ultraviolet.
Dapat pansinin na ang bawat kulay na sinusunod ay dahil sa paggawa ng isang tiyak na pigment. Ang asul-berde na pigment ay tumutugma sa paggawa ng pyocyanin, berde sa pyoverdin, ang mapula-pula sa pyorubin, kayumanggi sa pyomelanine, at ang maliwanag na dilaw-berde na fluorescence sa ilalim ng ilaw ng UV sa fluorescein.
Paghahanda
Tumimbang ng 43 g ng dehydrated medium at matunaw sa distilled water. Magdagdag ng 10 ml ng gliserol. Dalhin ang pinaghalong sa isang mapagkukunan ng init. Hayaan itong pakuluan ng ilang minuto hanggang sa kumpletong pagkabulok.
Ang Autoclave sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto. Hayaang tumayo at maglingkod sa sterile pinggan Petri kapag ang temperatura ay nasa paligid ng 50 ° C.
Payagan na palakasin, baligtarin, mag-order sa mga plaqueros at mag-imbak sa ref hanggang magamit. Ang mga plato ng cetrimide agar ay dapat na tinanggal mula sa ref ng paunang abala sa pag-punla at pinahihintulutang makapunta sa temperatura ng silid.
Ang pangwakas na pH ng daluyan ay dapat na 7.2 ± 0.2.
Ang kulay ng dehydrated medium ay beige at ang paghahanda ay malabo ang puti.
Aplikasyon
Ang lahat ng mga uri ng mga sample kung saan ang pagkakaroon ng Pseudomonas aeruginosa ay pinaghihinalaang ay maaaring itanim sa cetrimide agar. Samakatuwid, ito ay kapaki-pakinabang sa lahat ng mga lugar ng microbiology (kapaligiran, pang-industriya, klinikal, tubig at pagkain).
Napakahalaga na pag-aralan ang mga kapaligiran sa ospital at sa gayon ay maaaring mag-aplay ng mga hakbang sa pagwawasto, dahil ang microorganism na ito ay umaabot sa mga pasyente sa pamamagitan ng mga kontaminadong kagamitan, gamot, solusyon at mga gamit na ginagamit ng pasyente.
Sa ganitong paraan, ang microorganism ay maaaring makahawa sa mas mababang respiratory tract, ihi tract at sugat ng mga pasyente na immunosuppressed.
Ang mga bilang ng kolonya ng P. aeruginosa ay maaari ding gawin sa mga pagsubok sa limitasyong microbial.
Sown
Maaaring magamit ang Cetrimide agar bilang pangunahing kultura. Ang plato ay inoculated sa isa sa mga gilid nito at mula doon ay ipinamamahagi ito ng pagkapagod sa nalalabi na plato. Ang mga sample ng likido ay maaaring maging supling na may drigalski spatula.
Ang mga plato ay napapawi ng aerobically sa 37 ° C para sa 24 na oras ng pagpapapisa ng itlog.
Mga Limitasyon
-Ang maliit na porsyento ng Pseudomonas aeruginosas strain ay hindi gumagawa ng pyocyanin, kaya ang isang maling negatibong maaaring bigyang kahulugan.
-Some Pseudomonas species ng klinikal na kahalagahan ay inhibited sa medium na ito.
-Nagpapansin ng mga katangian na inilarawan para sa Pseudomonas aeruginosa, dapat silang corroborated na may karagdagang mga pagsubok sa pagkakakilanlan. Ang isang pagsubok na hindi dapat palampasin ay ang oxidase test, dapat itong magbigay ng positibo.
-Some Enterobacteriaceae ay maaaring lumago sa daluyan na ito at bumuo ng isang dilaw na pigment, ngunit naiiba ito mula sa Pseudomonas aeruginosa sa na kapag ang plato ay sumailalim sa ultraviolet light walang fluorescence.
- Si Serratia marcescens ay namamahala upang makabuo at gumawa ng isang kulay rosas na pigment.
-Kung ang mga plato na nakatanim ng cetrimide agar ay nalantad nang isang oras sa temperatura ng silid, ang mga P. aeruginosa strains ay maaaring mawala ang pag-ilaw na sinusunod sa ilalim ng ilaw ng ultraviolet, gayunpaman ang ari-arian ay mababawi kung sila ay nai-incubated muli sa 37 ° C.
QA
Upang pag-aralan ang mahusay na pagganap ng cetrimide agar, maaaring magamit ang mga control strains, tulad ng: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 at Staphylococcus aureus ATCC 25923.
Ang inaasahang resulta ay:
- Magandang paglaki para sa P. aeruginosa, na may bughaw-berde na pigment at positibong fluorescein.
- Ang S. maltophilia at S. aureus ay magiging bahagyang upang lubos na mapigilan.
- Ang Escherichia coli ay inaasahan na ganap na mapigilan.
Mga Sanggunian
- Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Phenotypic at serological characterization ng mga klinikal na mga isolate ng Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
- Mga Laboratories ng Conda. Batayan para sa Cetrimide. 2014.Magagamit sa: condalab.com
- Britannia Laboratories. Cetrimide agar. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
- Mga Laboratoryo ng BD. BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013.Magagamit sa: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratory, CA Cetrimide agar. 2009.Magagamit sa: http://f-soria.es