NUTRITIVE AGAR: MAKATUWIRAN, PAGHAHANDA AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang nutrient agar ay isang n Telefonective medium at walang kaugalian solid culture. Ang lahat ng mga uri ng bakterya na hindi hinihingi mula sa isang nutritional point of view ay lumalaki sa daluyan na ito.

Ito ay isang simpleng daluyan at, sa kabila ng pangalan nito, naglalaman ito ng isang mas mababang halaga ng nutrisyon kumpara sa iba pang katulad na media, tulad ng Brain Heart Infusion Agar o Trypticase Soy Agar.

Colony ay umaasa sa nutrient agar

Ang pagiging kapaki-pakinabang sa laboratoryo ay iba-iba. Ito ay pangunahing ginagamit para sa mga species ng subculturing, pagpapanatili ng mga strain, pagbibilang ng mga kolonya, bilang isang batayan para sa paghahanda ng agar para sa dugo, bukod sa iba pa.

Gayundin, dahil sa magaan na kulay ng murang kayumanggi, ang paggawa ng mga pigment na nabuo ng ilang mga bakterya ng bakterya ay maaaring makilala nang iba, tulad ng greenish na pigment ng Pseudomonas aeruginosa, ang brick red pigment na ginawa ni Serratia marcescens sa temperatura ng silid, ang gintong dilaw na pigment ng Staphylococcus aureus, bukod sa iba pa.

Bilang karagdagan, ito ay isa sa pinakamurang lumalagong media na matatagpuan sa merkado.

Batayan

Tulad ng nabanggit na sa itaas, ito ay isang napaka-simpleng daluyan na umaasa sa pagbibigay ng mga nutrisyon para sa paglaki ng bakterya nang walang paghihigpit at walang kumplikadong reaksyon upang bigyang kahulugan.

Bilang medium ay translucent, mainam para sa pagbibilang ng mga kolonya sa pamamagitan ng malalim na pamamaraan ng seeding.

Komposisyon

Ito ay binubuo pangunahin ng karne katas o lebadura, peptones o gelatin pancreatic digest, agar-agar, sodium chloride at distilled water.

Ang katas ng karne o lebadura at ang mga peptones ay kumakatawan sa mahahalagang mapagkukunan ng carbon at mineral (nitrogen, posporus at asupre), na gagamitin ng bakterya bilang isang mapagkukunan ng enerhiya at paglago ng mga kadahilanan.

Gayundin, ang agar-agar ay ang batayan ng lahat ng solidong media ng kultura, na darating upang palitan ang gelatin, na siyang unang base compound na ginamit ni Robert Koch na magbigay ng matatag na pagkakapareho sa kanyang media.

Ang Agar ay isang polysaccharide na binubuo ng galactose, galactomannan, agarose, at agaropectin. Nagtatakda ito sa 40 ° C at natutunaw malapit sa 100 ° C.

Para sa bahagi nito, ang sodium klorido ay nagbibigay ng daluyan ng osmolarity na kinakailangan para sa pag-unlad ng bakterya.

Sa wakas, ang tubig ay nagsisilbi upang mag-hydrate at matunaw ang mga lyophilized compound. Ang nalulusaw na tubig na nababagay sa neutral na pH ay dapat gamitin. Hindi dapat gamitin ang pag-tap ng tubig dahil naglalaman ito ng calcium at magnesium na maaaring mag-reaksyon sa mga pospeyt sa medium at form na hindi matutunaw na mga asing-gamot.

Paghahanda

Para sa isang litro ng nutrient agar, 31 g ng dehydrated medium ay dapat timbangin. Ilagay ito sa isang basahan at matunaw sa isang litro ng distilled water. Matapos ang 5 minuto na nakatayo, mag-init sa isang mapagkukunan ng init at patuloy na ihalo hanggang sa kumukulo ng 1 o 2 minuto.

Paghahanda ng medium medium.

Ang flask ay inilalagay sa isang autoclave at isterilisado sa 121 ° C sa loob ng 20 minuto.

Sterilisasyon sa autoclave

Sa pagtatapos ng oras, tinanggal ito mula sa autoclave at nagsilbi sa mga sterile pinggan Petri, gamit ang isang laminar flow hood o ang Bunsen burner.

Kung ang pinggan ng Petri ay maaaring itapon (plastic), ang daluyan ay dapat na ibinahagi kapag ang agar ay may temperatura na humigit-kumulang na 50 ° C, upang maiwasan ang mga ito na ma-deformed ng labis na init.

Payagan na palakasin at mag-imbak sa isang baligtad na may hawak na plato at palamig sa 2-8 ° C hanggang sa gamitin.

Ang mga plato ay dapat na mapusok bago ma-seeded. Ang mga plate na para sa nutrisyon ng nutrisyon ay hindi dapat gamitin kung sila ay nahawahan o nag-aalis ng tubig.

Ang pH ng handa na daluyan ay dapat na nababagay sa 7.3 ± 0.2.

Aplikasyon

Ito ang pinakasimpleng daluyan ng kultura na ginamit sa laboratoryo ng microbiology. Ang pagbabalangkas nito ay mahusay para sa paglaki ng mga hindi hinihingi na bakterya.

Ang pangunahing mga gamit nito ay ipinaliwanag sa ibaba:

Bilang batayan para sa paghahanda ng agar agar ng dugo

Ang daluyan na ito ay kung minsan ay ginagamit bilang isang base upang maghanda ng agar agar ng dugo, gayunpaman hindi ito ang karaniwang ginagamit na base.

Palakasin ang sporulation ng bacteria na bumubuo ng spore

Ang daluyan ng kultura na ito ay kapaki-pakinabang lalo na para sa pagpapasigla ng pagbuo ng mga bakterya na bumubuo ng spore tulad ng Bacillus sp.

Para sa mga ito, ang isang pilay ng Bacillus genus ay inihasik at natubuan sa loob ng 24 na oras sa 37 ° C sa aerobiosis. Kapag ang mga kolonya ay lumago, ang plato ay sumailalim sa temperatura ng temperatura, iyon ay, ang temperatura ng oven ay nadagdagan sa 44 ° C at naiwan para sa karagdagang 24 na oras o inilagay sa isang refrigerator sa loob ng 24 na oras.

Sa pagtatapos ng oras, ang mga smear ng kultura ay ginawa at nasaksihan ng mantsa ng Gram o sa Shaeffer-Fulton spore stain. Sa kanila, ang bacilli na may mga endospores (spores sa loob ng bacillus) at mga exospores (spores sa labas ng bacillus) ay susundin.

Pagpapanatili ng strain

Ang ilang mga laboratoryo sa suporta sa pagtuturo sa unibersidad ay nangangailangan ng pagpapanatili ng mabubuhay na bakterya ng kahalagahan ng klinikal hangga't maaari, upang magamit ang bakterya bangko (bacterioteca) para sa gawaing pananaliksik o para sa paghahanda ng mga kasanayan sa pagtuturo, kung saan Ang mga mag-aaral ay matutong manipulahin at makilala ang mga microorganism na ito.

Ang nutrrient agar, pati na rin ang utak ng pagbubuhos ng utak, ay maaaring magamit para sa layuning ito. Ang agaro ay inihanda, ibinuhos sa mga tubo na may takong ng bakelite at tumagilid sa isang base, sa paraang ang solidong bumubuo ay bumubuo ng isang bloke sa ilalim at isang bevel sa ibabaw (flute beak).

Ang bawat tubo ay may label na may pangalan ng bakterya na ma-seeded at ang petsa. Ang bawat isa sa mga bakterya ay maihahasik sa bevel at mabubuhay nang 24 oras. Kapag ang mga kolonya ay lumaki, ang mga tubo ay nakaimbak sa temperatura ng silid.

Ang bacterioteca ay dapat na mabago mula 1 hanggang 3 buwan, upang maiwasan ang kontaminasyon at pag-aalis ng tubig ng daluyan at pati na rin ang pagkamatay ng bakterya.

Ang mga bakteryang hindi picky lamang ang maaaring mapanatili sa ganitong paraan.

Bilang ng kolonya

Bagaman may mga dalubhasang paraan para sa pagbibilang ng mga kolonya, tulad ng standard count agar, ang nutrient agar ay maaaring magamit para sa layuning ito, alinman sa pamamagitan ng pang-ibabaw na punla na may drigalski spatula o sa pamamagitan ng lalim. Para sa kadahilanang ito ay lubhang kapaki-pakinabang sa pagsusuri ng microbiological ng pagkain at tubig.

Pagpapatakbo ng mga pagsubok sa diagnostic

Dahil ito ay isang daluyan na hindi naglalaman ng dugo, o anumang iba pang mga additives, mainam para sa pagkuha ng mga kolonya na lumago sa daluyan na ito upang maisagawa ang catalase test.

Gayundin, dahil sa magaan na kulay nito, ipinapahiwatig na magsagawa ng mga pagsusuri sa oxidase nang direkta sa isang lugar ng agar na binhi, nang walang pagkagambala.

Pagbawi ng mga aerobes ng mesophilic mula sa libangan ng asin ng tubig (Beaches)

Ang nutritional agar na inihanda na may 10% na tubig sa dagat ay kapaki-pakinabang para sa pagsusuri ng mesophilic aerobes sa mga tubig sa beach.

Sa ganitong paraan, ang aktwal na antas ng kontaminasyon ng mga tubig na may mga microorganism na ito ay maaaring pahalagahan, dahil sa ganitong uri ng mga halimbawa ang mga resulta ay na-overlay kapag ginagamit ang media media na inihanda sa maginoo na paraan.

Ipinakita ito ni Cortez et al. noong 2013 sa isang gawaing pananaliksik.

Maaari itong maipaliwanag dahil sa biglaang pagbabago na dumaranas ng bakterya kapag nagpunta mula sa isang hypersalted na kapaligiran sa isang mababang-asin na kapaligiran, samakatuwid ang mga microorganism ay pumapasok sa isang estado ng lethargy kung saan sila mabubuhay, ngunit hindi maaarili.

Mga Sanggunian

1. "Nutritive agar." Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 13 Sep 2016, 20:33 UTC. 29 Dis 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. (Ika-5 ed.). Argentina, Editorial Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Epekto ng media media na inihanda gamit ang tubig sa dagat sa mga tagapagpahiwatig ng kalusugan sa mga tubig sa dagat ng mga spa sa Chichiriviche, estado ng Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M at Cardoso M. Mikrobiolohikal na kalidad ng tubig para sa inseminating dosis, para sa mga baboy. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktikal na klinikal na microbiology. Unibersidad ng Cadiz, ika-2 edisyon. Serbisyo sa Publication ng UCA.