SALMONELLA-SHIGELLA AGAR: MAKATUWIRAN, PAGHAHANDA, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang agar Salmonella Shigella na kilala rin bilang SS agar ay isang selective at kaugalian medium na katamtaman, lalo na idinisenyo para sa paghihiwalay ng mga enteropathogenic na bakterya ng genera na Salmonella at Shigella, parehong mga sample sa kapaligiran tulad ng klinikal.

Ang SS agar ay may isang kumplikadong komposisyon; Binubuo ito ng katas ng karne, peptone, lactose, bile salts, sodium citrate, sodium thiosulfate, ferric citrate, agar, neutral na pula, maliwanag na berde at distilled water. Dahil sa mahusay na pagpili, ang mga sample na may masamang halo-halong flora ay maaaring itanim.

SS agar na may mga kolonya ng Salmonella sp. Pinagmulan: Manurx27, mula sa Wikimedia Commons

Sa mga laboratoryo ng microbiology, ang Salmonella-Shigella medium ay malawakang ginagamit upang mag-imbestiga sa pagkakaroon ng Salmonella at Shigella sa mga diarrheal stool sample, dumi sa alkantarilya, inuming tubig at pagkain.

Minsan kinakailangan na gumamit ng sabaw ng pre-enrichment (sabaw ng lactose) at sabaw ng pagpayaman (selenite cystine sabaw) upang mabawi ang mga strain ng Salmonella.

Ang mga hakbang na ito ay kinakailangan kapag ang pagkakaroon ng Salmonella sa napakababang dami ay pinaghihinalaang, o kung saan ang pilay ay maaaring maabuso sa pamamagitan ng mga proseso na karaniwang pang-industriya na produksyon, pangunahin na mga pagkaing naproseso. Maipapayo na pagyamanin ang mga sample ng dumi mula sa mga pasyente na pinagamot ng mga antibiotics.

Kasunod nito, ang enriched sabaw ay maaaring ma-seeded sa Salmonella-Shigella agar at iba pang katulad na media, tulad ng xylose agar, lysine deoxycholate (XLD) at enteric Hektoen agar (HE).

Batayan

Ang bawat bahagi ng daluyan ng kultura ng Salmonella-Shigella ay may isang tukoy na pag-andar, at ang halo bilang isang kabuuan ay nagbibigay ito sa mga katangian na nagpapakilala nito.

Nakapagpapalakas na kapangyarihan

Ang katas ng karne at peptone (hinukay mula sa kasein at tisyu ng hayop) ay nagbibigay ng kinakailangang mga sustansya (nitrogens, carbon at bitamina) para sa pagbuo ng mga microorganism na may kakayahang tiisin ang natitirang bahagi.

Hindi pagbabago

Ang agar-agar ay responsable para sa pagbibigay ng solidong pare-pareho sa medium.

Pinili

Ang daluyan na ito ay lubos na pumipili sapagkat naglalaman ito ng mga asing-gamot na apdo, sodium citrate, at maliwanag na berde. Samakatuwid, pinipigilan ang paglaki ng lahat ng mga positibong bakterya ng Gram at karamihan sa mga negatibong Gram na negatibong bacilli, kabilang ang ilang mga coliform.

Habang ang bakterya ng genus Salmonella at ilang mga Shigella strains ay sumusuporta sa mga compound na ito.

Pangunahin, ang genus Salmonella ay napaka-lumalaban sa mga asin ng apdo, kaya't kaya na sila ay nakatira sa gallbladder ng ilang mga pasyente ng carrier na patuloy na naghuhulog ng bakterya sa kanilang mga dumi.

Pagkakaiba-iba

Ang lactose ay ang fermentable na karbohidrat na tumutulong sa pagkakaiba-iba ng mga lactose-fermenting na galaw mula sa mga di-pagbuburo. Ang ari-arian na ito ay napatunayan sa pamamagitan ng pagkakaroon ng tagapagpahiwatig ng pH, na sa daluyan na ito ay pula ang phenol.

Ang mga lactose fermenting strains ay nagbibigay ng mga pulang kolonya, habang ang mga non-fermenting strains ay walang kulay. Mahalaga ang katangian na ito, dahil ang Salmonella at Shigella ay hindi nag-ferment lactose.

Sa kabilang banda, ang daluyan na ito ay naglalaman ng sodium thiosulfate bilang isang mapagkukunan ng sulfide at ferric citrate bilang isang mapagkukunan ng bakal. Ang parehong mga compound ay magagawang magkakaibang mga bakterya na may kakayahang gumawa ng hydrogen sulfide. Ang mga ito ay gumanti upang makabuo ng isang nakikita, hindi matutunaw, matingkad na pag-ulan ng itim na ferric sulfide.

Ang pag-aari na ito ay matatagpuan sa ilang mga strain ng genus Salmonella. Karaniwan ang kanilang mga kolonya ay patag na walang kulay na may itim na tuldok sa gitna nito. Ang natitirang Salmonellas ay hindi gumagawa ng H ₂ S at bubuo bilang walang kulay na mga kolonya.

Sa kabilang banda, ang mga kolonya ng genus na Shigella ay flat na walang kulay na walang blackening.

Paghahanda

Ang daluyan na ito ay napaka-simple upang maghanda.

Tumimbang ng 63 g ng dehydrated komersyal na daluyan at natunaw sa isang litro ng distilled water. Painitin ang solusyon at pukawin. Ang halo ay maaaring pakuluan ng hanggang sa minuto.

Ang daluyan na ito ay hindi dapat ma-autoclaved. Matapos matunaw ito ay naghahatid nang direkta sa solong o dobleng sterile plate.

Kapag pinapatibay nila, inayos ang mga ito sa isang baligtad na paraan sa mga platelet at nakaimbak sa isang ref (2-8 ° C) hanggang sa gamitin.

Ang daluyan pagkatapos ng paghahanda ay dapat manatili sa pH 7.2 ± 0.2 at may kulay na orange-pula.

Mahalagang payagan ang mga plato na magpainit bago mag-seeding ng mga sample. Ang orihinal na sample ay maaaring maihasik nang direkta, ang pag-aalis ng materyal sa isang bahagi ng agar at pagkatapos ay mag-agos mula doon.

Sa kaso ng paggamit ng mga enriched na sabaw, ipasa ang isang bahagi ng selenite na sabaw at maghasik ng isang drigalski spatula.

Mag-incubate sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras sa aerobiosis.

Tandaan na ang bilang ng gramo na timbangin at ang pangwakas na pH ng daluyan ay maaaring mag-iba mula sa isang komersyal na bahay hanggang sa isa pa. Ang gitnang base ay palaging nagdadala ng mga indikasyon para sa paghahanda nito.

Gumamit

Madalas itong ginagamit sa pagsusuri ng kultura ng dumi at sa pag-aaral ng microbiological ng wastewater, pag-inom ng tubig at mga sample ng pagkain.

Ang mga madalas na dobleng plate ay inihanda, sa isang tabi Salmonella-Shigella agar ay inilalagay at sa iba pang mga XLD agar.

Mga Limitasyon

-Some Shigella strains ay hindi lumalaki sa daluyan na ito. Samakatuwid, hindi inirerekomenda para sa pangunahing paghihiwalay ng genus na ito.

-Hindi bawat transparent kolonya na may isang itim na sentro ay nagpapahiwatig ng Salmonella; Kailangang isagawa ang mga biochemical test upang makagawa ng wastong pagkakakilanlan, yamang ang mga kolonya ng ilang mga Proteus strains ay hindi mailalarawan sa mga taga-Salmonella.

-Ang dehydrated medium ay dapat mag-ingat sa pagkakalantad sa kapaligiran, dahil napaka hygroscopic. Samakatuwid, dapat itong itago sa isang tuyo at maayos na sarado na kapaligiran. Buksan para sa napakaikling panahon.

-Ang oras ng bile salts sa daluyan ay maaaring tumubo, na bumubuo ng isang imahe na katulad ng isang banig sa loob ng agar, ngunit hindi ito nakakaapekto sa mga resulta.

-Some Shigella strains ay maaaring mabagal pagbuburo lactose.

QA

Upang patunayan na ang daluyan ay gumagana nang tama, ipinapayong magtanim ng kilalang o sertipikadong mga galaw ng kontrol at obserbahan kung ang paglaki ay nakakatugon sa inaasahang mga katangian.

Para sa mga ito, maaaring magamit ang mga strain ng E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Ang inaasahang resulta ay:

Enterobacter at Klebsiella ------ malaking kolonya at pula o rosas na mucoids.

Shigella flexneri ---------- transparent o walang kulay na mga kolonya na flat.

Salmonella typhimurium ------ walang kulay na mga kolonya na may itim na sentro.

Enterococcus faecalis -------- kabuuang pagsugpo.

Mga Sanggunian

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009.Magagamit sa: f-soria.es
2. Laboratoryo ng BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013.Magagamit sa: bd.com
3. Britannia Laboratories. Salmonella-Shigella Agar. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
4. Mga diagnostic ng Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) 2010. Magagamit sa: tekstoamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.