Ang bismuth sulphite agar ay isang solidong medium na pumipili at kaugalian na kultura, na espesyal na nabuo para sa paghihiwalay ng Salmonella enterica subspecies enterica serotype Typhi, bukod sa iba pang mga species ng Salmonella. Ang daluyan ay kilala bilang BSA agar para sa acronym nito sa English Bismuth Sulfite Agar.
Ang orihinal na formula para sa bismuth sulfite agar ay nilikha noong 1927 nina Wilson at Blair (Glucose Bismuth Sulphite Iron Medium); naglalaman ito ng sodium sulfite, glucose, solution sa bismuth, ammonium citrate, ferrous sulfate, at agar-agar.
Paglago ng 48 na oras ng pagpapapisa ng Salmonella sp sa bismuth sulfite agar. Pinagmulan: Pixnio.com May-akda: Dr WR Erving, USCDCP
Ngayon mayroong isang pagbabago ng orihinal na daluyan, na binubuo ng extract ng karne, karne at casein peptones, bismuth sulfite indicator, glucose, disodium phosphate, ferrous sulfate, maliwanag na berde at agar-agar.
Mayroong maraming mga paraan para sa paghihiwalay ng mga species ng Salmonella, ngunit pagdating sa pagbawi ng typhi serotype, ang bismuth sulfite agar ay may kapansin-pansin na bentahe sa kanila, dahil sa napakababang o walang pagbawi ng microorganism na ito ay nakuha .
Gayunpaman, kinakailangan na gumamit ng higit sa isang uri ng daluyan kapag sinusubukang ihiwalay ang mga enteropathogens, dahil ang bismuth sulphite agar ay hindi gaanong epektibo para sa iba pang mga species ng Salmonella at para sa genus Shigella, na kung saan ay hinarang o umuunlad nang hindi maganda. sa agar na ito.
Dapat pansinin na sa lahat ng mga species ng Salmonella, ang typhi serotype ay isa sa pinakamahalagang enteropathogens sa mga tao, ito ang tanging reservoir nito. Ang serovar na ito ay nagdudulot ng typhoid fever, gastroenteritis, bacteremia, at septicemia.
Para sa kadahilanang ito, may kaugnayan na isama ang agar na ito kapag sinusuri ang tubig, feces o mga sample ng pagkain kung saan ang pagkakaroon nito ay pinaghihinalaan.
Batayan
Tulad ng karamihan sa media media, ang Bismuth Sulfite Agar ay naglalaman ng mga nutrisyon upang maitaguyod ang paglaki ng bakterya, tulad ng peptones at katas ng karne. Gayundin, ang glucose ay gumana bilang isang mapagkukunan ng enerhiya at carbon.
Gayunpaman, hindi lahat ng bakterya ay lalago sa daluyan na ito, dahil ang Bismuth Sulfite Agar ay isang pumipili na daluyan. Naglalaman ito ng mga compound na pumipigil sa paglaki ng mga Gram positibong microorganism at ilang mga negatibong bakterya ng Gram. Ang mga compound na ito ay: ang tagapagpahiwatig ng bismuth sulfite at maliwanag na berde.
Para sa bahagi nito, ang disodium phosphate ay nagpapanatili ng osmolarity at pH ng medium.
Bilang karagdagan, ang bismuth sulfite agar ay isang kaugalian na medium salamat sa pagkakaroon ng ferrous sulfate, na nagpapakita ng pagbuo ng H 2 S. Ang H 2 S na nabuo ng mga bakterya ay gumanti sa ferrous sulfate at bumubuo ng isang malinaw na nakikitang hindi matutunaw na itim na pag-ulan.
Sa wakas, ang agar-agar ay nagbibigay ng solidong pare-pareho sa medium.
Paghahanda
Timbang 52.3 g ng dehydrated medium at matunaw sa isang litro ng tubig. Initin ang halo upang pakuluan para sa 1 minuto na may madalas na pagpapakilos, hanggang sa ganap na matunaw. Huwag masyadong maaksidente. Ang daluyan na ito ay hindi mai-autoclavable, dahil ang matinding init ay sumisira sa medium medium.
Payagan ang cool sa 45 ° C at iling bago maghatid sa mga sterile pinggan. Inirerekomenda na gumawa ng mga plate na may mahusay na kapal. Para sa mga ito, ang 25 ML ay dapat ibuhos sa bawat plato. Hayaan ang matatag. Dahil ito ay isang daluyan na hindi isterilisado, normal ito para sa agarang paggamit na iminungkahi.
Gayunpaman, ang isang pag-aaral na isinagawa ng D'aoust noong 1977, ay nagpakita na mayroong isang mas mahusay na pagbawi ng Salmonella typhimurium at Salmonella enteritidis bilang ang bismuth sulphite agar medium age, hindi nakakaapekto sa pagganap para sa mga serovars na Typhi at Paratyphi B.
Inirerekumenda ng D'aoust ang paggamit ng mga plato sa araw na 4 ng pagpapalamig, bagaman binabalaan nito na habang ang mga katamtamang edad, bumababa ang pagkasunud-sunod, at ang mga Proteus vulgaris strains ay madaling umunlad.
Para sa kadahilanang ito, para sa lubos na kontaminadong mga sample, tulad ng feces, mas mainam na gumamit ng sariwang handa na daluyan. Kung hindi man gagamitin sa araw na 4 ng paghahanda nito. Inirerekomenda ng iba pang mga may-akda na gamitin ang mga plato sa araw pagkatapos ng kanilang paghahanda, na nakaimbak sa ref.
Ang pinalamig na mga plato ay dapat na mapusok bago gamitin. Ang pH ng daluyan ay dapat na 7.5 ± 0.2. Ang hilaw na daluyan ay murang kayumanggi at ang handa na daluyan ay berde-kulay-abo na kalakal.
Aplikasyon
Kabilang sa mga halimbawang maaaring itanim sa daluyan na ito ay mga halimbawa ng mga faeces, pag-inom o pag-aaksaya ng tubig at pagkain.
Upang mapabuti ang mga nakahiwalay, inirerekumenda na magsagawa ng isang pre-enrichment na paggamot na may sabaw ng lactose at pagkatapos ng pagpapayaman na may tetrathionate na sabaw o cystine selenite na sabaw, bago ang pag-seeding sa bismuth sulfite agar.
Ang mga plato ay natupok sa 35 ° C ± 0.2 sa loob ng 24 hanggang 48 na oras, sa aerobiosis.
Mga katangian ng mga kolonya sa bismuth sulfite agar
Ang mga kolonya ng Salmonella Typhi ay karaniwang nakikita sa agar para sa loob ng 24 na oras na may isang itim na sentro at napapaligiran ng isang maliwanag na berdeng halo. Samantalang, sa 48 oras ay lumiliko silang ganap na itim dahil sa pagbuo ng hydrogen sulfide.
-Ang daluyan na ito ay pumipigil sa karamihan ng mga species ng genus Shigella.
- S. Ang Typhi at S. arizonae ay maaaring magbigay ng magkatulad na mga kolonya.
-Ang mga coliforms na gumagawa ng H 2 S tulad ng Proteus at Citrobacter ay gumagawa ng mga kolonya na katulad ng sa Salmonella, kaya kinakailangan upang magsagawa ng mga pagsubok sa pagkilala sa biochemical.
-Ang isang mahusay na striation ay dapat gawin upang makakuha ng nakahiwalay na mga kolonya; Ito ay ang tanging paraan upang obserbahan ang mga karaniwang katangian ng mga kolonya ng genus Salmonella.
QA
Para sa control ng sterility, isang uninoculated plate ay natupok sa 37 ° C, inaasahan na walang magiging paglago o pagbabago ng kulay.
Para sa control control, kilalang mga pilay tulad ng:
Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Escherichia coli at Shigella flexneri ay inaasahan na maging bahagyang naharang sa pamamagitan ng pagbuo ng berde-kayumanggi at kayumanggi na mga kolonya. Sapagkat, ang parehong salmonellas ay dapat magkaroon ng isang mahusay na pag-unlad na may mga itim na kolonya na may metal na ningning, at sa wakas ay dapat na lubos na mapigilan ng Enterococcus faecalis.
Mga Sanggunian
- Wilson, W., & EM McV. Blair. Paggamit ng isang Glucose Bismuth Sulphite Iron Medium para sa paghihiwalay ng B. typhosus at B. proteus. Ang Journal of Hygiene, 1927; 26 (4), 374-391. Nakuha mula sa .jstor.org
- D'aoust JY. Epekto ng mga kondisyon ng imbakan ng pagganap ng bismuth sulfite agar. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122–124. Magagamit sa: ncbi.nlm.nih.gov
- IVD Laboratories. Bismuth-sulfite agar ayon sa WILSON-BLAIR. 2009.Magagamit sa: BismuthSulfitagar_span_Jan_2009% 20 (2) .pdf
- Himedia Laboratories. Bismuth Sulphite Agar. 2017.Magagamit sa: himedialabs.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
- Morales R, de la Cruz D, Leyva G at Ybarra M. Bacteriological Marka ng Raw Goat Milk na Ginawa sa Miravalles, Puebla. Rev Mex de Ing Quím 2012; 11 (1): 45-54