MACCONKEY AGAR: MAKATUWIRAN, PAGHAHANDA, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang agar ng MacConkey ay isang solidong daluyan na nagbibigay-daan sa eksklusibong paghihiwalay ng mga negatibong bakterya ng Gram. Para sa kadahilanang ito, ito ay isang pumipili daluyan at pinapayagan din ang pagkakaiba sa pagitan ng lactose fermenting at non-fermenting bacilli, na ginagawang isang medium medium. Ito ay isa sa mga pinaka-malawak na ginagamit na media media sa isang laboratoryo ng microbiology.

Ang daluyan na ito ay pangunahing ginagamit para sa pag-ihiwalay ng Gram negatibong bacilli na kabilang sa pamilya ng Enterobacteriaceae, kabilang ang mga oportunista at enteropathogenic species.

Ang MacConkey agar seeded na may dalawang uri ng bakterya. Kaliwang bahagi lactose fermenting colony, kanang bahagi non-lactose fermenting colony.

Maaari rin itong magamit upang ibukod ang iba pang mga bacilli ng enteric na naninirahan sa gastrointestinal tract, ngunit hindi kabilang sa Enterobacteriaceae, tulad ng Aeromonas sp, Plesiomonas sp, bukod sa iba pa.

Sa wakas, maaari itong ibukod ang iba pang mga di-glucose-fermenting Gram-negatibong bacilli na matatagpuan sa kapaligiran, tubig o soils, ngunit kung minsan ay maaaring maging oportunistang mga pathogens tulad ng Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, at iba pa.

Batayan

MacConkey agar

Ang pundasyon ng daluyan na ito ay maaaring ipaliwanag sa pamamagitan ng paglalarawan ng mga bahagi nito, dahil ang bawat isa ay may isang layunin na tumutukoy sa isang pag-aari nito.

Mga asing-gamot ng apdo at kristal na lila

Sa kahulugan na ito, ang MacConkey agar ay may isang kumplikadong komposisyon. Una sa lahat naglalaman ito ng mga bile salt at crystal violet.

Ang mga elementong ito ay responsable para sa pag-iwas sa paglaki ng Gram positibong bakterya at ilang masidhing Gram na negatibong bacilli. Kaugnay nito, pinapaboran ang pagbuo ng Gram negatibong bacilli na hindi apektado ng mga sangkap na ito. Samakatuwid ito ay isang napiling daluyan.

Sinasabing bahagyang pumipili kumpara sa iba pang media na pinipigilan din ang paglaki ng mga positibong bakterya ng Gram at karamihan din sa mga negatibong bakterya ng Gram.

Ang mga peptones, polypectones at lactose

Naglalaman ito ng mga sangkap na nagbibigay ng kinakailangang mga sustansya sa mga microorganism na umuunlad sa kapaligiran na ito, tulad ng peptones, polypectones at lactose.

Ang Lactose ay ang pangunahing punto para sa daluyan upang maging isang medium medium, dahil ang mga microorganism na may kakayahang mag-ferment lactose ay bubuo ng malakas na kulay rosas na kolonya.

Ang ilang mga bakterya ay maaaring mabagal ang lactose ng dahan-dahan o mahina, na bumubuo ng maputlang kulay rosas na kolonya at manatiling positibo sa lactose.

Ang mga hindi nag-ferment lactose ay gumagamit ng mga peptones bilang isang mapagkukunan ng enerhiya, paggawa ng ammonia, alkalizing ang daluyan. Para sa kadahilanang ito, ang mga kolonya na nagmula ay walang kulay o transparent.

Tagapagpahiwatig ng PH

Ang pagbabago ng kulay ay nakamit sa pamamagitan ng isa pang mahahalagang tambalan na mayroon ang MacConkey agar. Ang tambalang ito ay ang tagapagpahiwatig ng pH, na sa kasong ito ay neutral na pula.

Ang pagbuburo ng lactose ay bumubuo ng paggawa ng halo-halong mga acid. Pinasimulan nila ang daluyan sa isang pH sa ibaba 6.8.

Ito ang nagiging sanhi ng tagapagpahiwatig ng pH na lumiko patungo sa isang malalim na kulay rosas na kulay. Ang intensity ng kulay ay maaaring mag-iba depende sa panghuling pH.

Natunaw na tubig, sodium klorido, at agar

Sa kabilang banda, naglalaman ito ng distilled water at sodium chloride na nagbibigay ng medium hydration at osmotic balanse. Sa wakas, ang medium ay naglalaman ng agar, na kung saan ay ang base na nagbibigay ng pare-pareho ng solid medium.

Ang handa na MacConkey agar medium ay dapat magkaroon ng isang pangwakas na pH na nababagay sa 7.1 ± 0.2.

Paghahanda

Para sa isang litro ng agarC ng MacConkey, 50 g ng dehydrated medium ay dapat timbangin, pagkatapos ay ilagay sa isang basahan at matunaw sa isang litro ng distilled water. Matapos ang 10 minuto na nakatayo ay pinainit, pinaghahalo nang tuluy-tuloy hanggang kumukulo ng 1 minuto.

Ang flask ay inilalagay sa autoclave at isterilisado sa 121 ° C sa loob ng 20 minuto. Sa pagtatapos ng oras, tinanggal ito mula sa autoclave at pinapayagan na palamig hanggang sa maabot ang isang temperatura ng 45 ° C, upang mamaya maglingkod sa mga sterile na pinggan ng Petri sa loob ng isang laminar flow hood o sa harap ng Bunsen burner.

Payagan na palakasin at mag-imbak sa isang baligtad na may hawak na plato at palamig sa isang ref sa 2-8 ° C hanggang sa gamitin.

Upang makakuha ng isang MacConkey agar na pumipigil sa epekto ng swarning na ginawa ng genus na Proteus, ginagamit ang isang mababang asin na MacConkey agar.

Gumagamit ng maginoo na MacConkey agar

Ang MacConkey Agar ay kasama sa lahat ng mga hanay ng kultura ng kultura na nakaayos para sa paghahasik ng mga klinikal na sample na natanggap sa laboratoryo. Kapaki-pakinabang din ito sa microbiology ng pagkain at microbiology ng kapaligiran.

Ang iba't ibang mga negatibong baras ng Gram na lumalaki sa daluyan na ito ay nagpapahayag ng mga katangiang hindi pangkaraniwang bagay na makakatulong upang makagawa ng isang presumptive diagnosis ng mga species na pinag-uusapan. Halimbawa ang laki, kulay, pagkakapareho at amoy ng mga kolonya, ay ilan sa mga katangian na maaaring gabayan.

Sa daluyan na ito, ang Escherichia coli, Klebsiella sp at Enterobacter sp species ay gumagawa ng malakas na kulay rosas na kolonya, na napapalibutan ng isang zone ng pinutol na apdo.

Samantalang, ang bakterya tulad ng Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp at Hafnia sp ay maaaring lumitaw nang walang kulay pagkatapos ng 24 na oras o maputla na rosas sa 24 -48 na oras.

Gayundin, ang genera na Proteus, Edwadsiella, Salmonella at Shigella ay gumagawa ng mga walang kulay o transparent na kolonya.

Iba pang mga variant ng MacConkey agar

Mayroong iba pang mga variant ng MacConkey Agar na may mga tukoy na layunin. Nabanggit ang mga ito sa ibaba:

MacConkey agar na may sorbitol

Dinisenyo ang daluyan na ito upang makilala ang enteropathogenic na pilay (enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) mula sa natitirang bahagi ng mga eskretik coli ng Escherichia.

Ang medium na ito ay nagpapalitan ng carbohydrate lactose para sa sorbitol. Ang enterohemorrhagic E. coli strains O157: H7 naiiba mula sa natitira dahil hindi nila binibigyan sormentol sorbitol at samakatuwid ang mga transparent na kolonya ay nakuha, samantalang ang natitirang bahagi ng E. coli strains ferment sorbitol at ang mga kolonya ay malakas na kulay-rosas.

MacConkey agar na walang crystal violet, o asin

Ang agar na ito ay lubos na naiiba mula sa klasikong MacConkey agar, dahil wala itong isang violet crystal at Gram positibong bakterya ay maaaring lumago.

Sa kabilang banda, ang kawalan ng asin ay pumipigil sa hitsura ng pag-swarm sa agar na ginawa ng ilang mga enteric bacilli, tulad ng mga genus na Proteus, at sa gayon ay pinapadali ang paghihiwalay ng lahat ng mga bakterya na naroroon, kabilang ang Gram positibong bakterya.

MacConkey agar na may cefoperazone

Ang variant ng MacConkey agar na idinisenyo upang una na ibukod ang Laribacter hongkongensis at kalaunan ay natagpuan na kapaki-pakinabang para sa paghihiwalay ng Arcobacter butzleri. Parehong bahagyang hubog Gram negatibong rods na lumalaban sa cefoperazone.

Ang mga bakteryang ito ay kamakailan na na-link upang maging sanhi ng gastroenteritis at nakuha ang pagtatae sa mga indibidwal na Asyano at Europa, na lumilitaw bilang dalawang malakas na umuusbong na mga pathogen.

Pinapayagan ng antibiotic na pigilan ang kasamang flora ng gastrointestinal tract, na pinapaboran ang pag-unlad ng mga bakteryang ito, na pinipigilan ang mga ito na hindi napansin, dahil nangangailangan sila ng 72 oras upang lumago.

Inihanda ang MacConkey agar na may seawater sa 10% v / v

Ang variant na ito ay kapaki-pakinabang para sa pagsusuri ng mga tagapagpahiwatig ng bacterial sanitary ng fecal contamination, kabilang ang kabuuang coliforms at fecal coliforms sa libangan na maalat na tubig (mga beach at bays).

Ipinakita ni Cortez et al noong 2013 na ang daluyan na inihanda sa ganitong paraan makabuluhang pinatataas ang pagbawi ng mga microorganism na ito sa kapaligiran ng asin, kumpara sa paggamit ng MacConkey agar na inihanda ng distilled water.

Ito ay dahil sa ang katunayan na ang nabagong daluyan ay pinasisigla ang paglaki ng mga bakterya na pisyolohikal sa isang estado ng latency na "mabubuhay ngunit hindi masunurin", samakatuwid hindi sila mababawi sa maginoo na media.

Mga Sanggunian

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Paggamit ng cefoperazone MacConkey agar para sa selective na paghihiwalay ng Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. MacConkey agar. Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 4 Abr 2018, 18:16 UTC. 29 Dis 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. (Ika-5 ed.). Argentina, Editorial Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Epekto ng media media na inihanda gamit ang tubig sa dagat sa mga tagapagpahiwatig ng kalusugan sa mga tubig sa dagat ng mga spa sa Chichiriviche, estado ng Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktikal na klinikal na microbiology. Unibersidad ng Cadiz, ika-2 edisyon. Serbisyo sa Publication ng UCA.