TRYPTICASEIN TOYO AGAR: PANGANGATWIRAN, PAGHAHANDA, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang toyo agar tryptone o Trypticase Soy Agar ay isang solidong medium medium, at nutritional nonselective. Ito ay hinirang ng mga letrang TSA para sa acronym nito sa English Trypticase Soy Agar. Ito ay binubuo ng triptein, toyo peptone, sodium chloride, at agar-agar.

Dahil sa mataas na lakas ng nutrisyon, mainam para sa paglilinang ng moderately hinihingi at hindi hinihinging microorganism. Ang medium na walang karagdagang mga suplemento ay hindi inirerekomenda para sa mga pangunahing kultura, ngunit ito ay lubos na kapaki-pakinabang para sa subculturing purong mga galaw at pinapanatili itong maaasahang, bukod sa iba pang mga gamit.

Trypticasein soy agar wedge sa mga tubes na may mga takong bakelite. Pinagmulan: Kuha ng litrato na kinuha ng may-akda na si MSc. Marielsa Gil.

Gayundin, ang agar na ito ay nagsisilbing isang batayan para sa paghahanda ng enriched media tulad ng agar agar, lalo na kung kinakailangan na obserbahan ang mga pattern ng hemolysis at i-mount ang optoquine at bacitracin taxa, na kinakailangan sa pagsusuri ng Streptococcus pneumoniae at Streptococcus pyogenes ayon sa pagkakabanggit.

Sa kabilang banda, kapag pinagsama sa antibiotics kapaki-pakinabang na ibukod ang mga klinikal na mahalagang facultative at mahigpit na anaerobic microorganism mula sa mga sample na may halo-halong flora.

Sa wakas, ang komposisyon ng trypticasein soy agar at ang pagganap nito ay nakakatugon sa mga iniaatas na itinatag ng iba't ibang mga pharmacopoeias (European, Japanese at North American).

Batayan

Para sa tamang pag-unlad ng bakterya, ang pagkakaroon ng mga suplay ng enerhiya ay kinakailangan, tulad ng mga amino acid, bitamina, puric at pyrimidic base.

Sa ganitong kahulugan, ang triptein at soy peptone ay nagbibigay ng mga sustansya sa mga microorganism, kaya pinapayagan ang kanilang buong pag-unlad. Gayunpaman, para sa mabilis na bakterya kinakailangan upang madagdagan ang agar na ito na may defibrined na dugo o pinainit na dugo upang madagdagan ang pagpapayaman nito.

Sa kabilang banda, kung ang mga antibiotics ay idinagdag sa daluyan, ito ay nagiging isang pumipili na daluyan. Ang 0.6% na lebadura ng lebadura ay maaari ding idagdag upang mapabor ang paghihiwalay ng mga species ng genus Listeria, habang ang pagdaragdag ng cystine tellurite at dugo ng kordero ay mainam para sa Corynebacterium diphteriae.

Sa wakas, ang sodium klorido ay nagbibigay ng balanse ng osmotic sa medium at ang agar ay nagbibigay ng solidong pagkakapare-pareho.

Paghahanda

Mga Linya ng Trypticasein Soy Agar

Upang maghanda ng trypticasein soy agar, 40 g ng dehydrated komersyal na daluyan ay dapat timbangin sa isang digital scale. Natunaw ito sa isang litro ng distilled water na nasa isang prasko.

Ang timpla ay naiwan upang magpahinga ng 5 minuto at pagkatapos ay dadalhin sa isang mapagkukunan ng init upang matunaw ang medium. Dapat itong pinukaw nang madalas at pinakuluan ng 1 hanggang 2 minuto. Kasunod nito, ang daluyan ay isterilisado sa autoclave sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto.

Payagan ang cool sa 50 ° C at ipamahagi sa sterile pinggan Petri. Payagan na palakasin, baligtarin, mag-order sa mga plaqueros at mag-imbak sa ref.

Ang pangwakas na pH ng daluyan ay dapat na 7.3 ± 0.2.

Dapat pansinin na ang kulay ng dehydrated medium medium ay light beige at dapat na nakaimbak sa pagitan ng 10 hanggang 35 ° C, sa isang tuyo na lugar.

Para sa bahagi nito, ang handa na agar ay light amber na kulay. Ang mga inihandang plate ay dapat na naka-imbak sa isang ref (2-8 ° C) hanggang sa gamitin.

Ang mga plate ay dapat maabot ang temperatura ng silid bago gamitin.

Trypticasein soy agar plate na pupunan ng dugo

Ang agar agar ng dugo ay inihanda sa pamamagitan ng pagdaragdag ng 5% na defibrinated na dugo sa oras ng paglamig ng trypticasein soy agar sa 50 ° C. Ang halo ay homogenized sa pamamagitan ng pag-ikot na may banayad na paggalaw.

Paglilingkod sa sterile pinggan Petri. Ang gitnang kulay ay dapat na pula ng cherry.

Ang mga plate na topticasein soy agar plate na pupunan ng pinainit na dugo

Upang ihanda ang agar-based na TSA na dugo, magpatuloy pareho sa mga pamamaraan na inilarawan, ngunit kapag umalis sa autoclave ay naiwan upang magpahinga hanggang ang temperatura ng daluyan ay humigit-kumulang sa pagitan ng 56 hanggang 70 ° C. Sa oras na iyon ang dugo ay inilalagay at halo-halong hanggang ang medium ay nagiging brown.

Paglilingkod sa sterile pinggan Petri. Ang kulay ng daluyan ay kayumanggi kayumanggi.

Trypticasein Soy Agar Wedges

Ang pamamaraan ng paghahanda ng agar ay pareho tulad ng inilarawan para sa mga plato, na may pagkakaiba na sa halip na maghatid ng daluyan sa mga pinggan ng Petri, ipinamamahagi ito sa pagitan ng 10 hanggang 12 ml sa mga tubo na may takip ng Bakelite bago isterilisado.

Kasunod nito, ang mga tubo ay autoclaved sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto. Kapag umalis sila, sila ay may hilig sa tulong ng isang suporta at pinapayagan na palakasin.

Ang inihanda na mga wedge ay inihasik sa pamamagitan ng lugar ng ibabaw at maglingkod upang mapanatili ang ilang mga hindi hinihingi na mga microorganism na mabubuhay para sa isang tinukoy na oras.

Aplikasyon

Ang Trypticasein Soy Agar ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:

-Ang isang base upang ihanda ang klasikong agar agar ng dugo na ginagamit na regular sa karamihan sa mga laboratoryo.

-Ang paghihiwalay ng hinihingi na bakterya.

-Pag-iingat ng pattern ng hemolysis.

-Pagpatupad ng mga pagsusuri sa diagnostic.

-Ang isang base upang maghanda ng espesyal na agar para sa dugo para sa Corynebacterium diphteriae, na may cystine tellurite at dugo ng tupa.

-Ang isang base upang maghanda ng lambing ng dugo ng tupa, kasama ang kanamycin-vancomycin para sa paglaki ng anaerobes, lalo na ang Bacteroides sp.

- Para sa pagpapanatili ng mga hindi hinihingi na mga strain (Bacterioteca).

- Aerobic microbial count sa pag-aaral ng limitasyon ng microbial ng tubig, kapaligiran, pagkain at kosmetikong sample.

Sown

Ang mga sample ay maaaring maihasik nang direkta sa ibabaw ng Trypticasein Soy Agar na pupunan ng dugo o iba pang mga additives. Ito ay inihasik sa pamamagitan ng pagkapagod.

Samantalang, ang mga plato ng trypticasein soy agar na walang mga additives ay karaniwang ginagamit sa subculture microbial strains (bacteria o lebadura).

QA

Sterility control

Upang suriin ang tibay ng iba't ibang media na inihanda gamit ang trypticasein soy base agar, ang mga sumusunod ay inirerekomenda: mula sa bawat handa na batch, ang 1 o 2 na mga di-nakaayos na mga plato o tubes ay dapat na mapalubha sa 37 ° C para sa 24 na oras upang maipakita ang kanilang tibay. Sa lahat ng mga kaso dapat itong manatili nang walang paglaki.

Kung ang kontaminasyon ay natagpuan, ang buong batch ay dapat itapon.

Kontrol ng paglago

Ang sumusunod na mga bakterya ng bakterya ay maaaring magamit upang pag-aralan ang wastong paggana ng trypticasein soy agar: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 at Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Ang mga strain ay seeded at incubated aerobically sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras.

Sa lahat ng mga kaso ay dapat na kasiya-siya ang paglaki.

Ang mga fungi tulad ng Candida albicans Complex ATCC 10231 at Aspergillus niger ATCC 16404 ay maaari ding gamitin.Ang mabuting paglago ay inaasahan para sa parehong mga galaw.

Ang kontrol ng paglago at hemolysis pattern ng trypticasein soy agar na pupunan ng dugo

Upang mapatunayan ang wastong paggana ng agar agar ng dugo na inihanda gamit ang batayang ito, maaaring gamitin ang mga sumusunod na mga galaw: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 at Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Sila ay seeded at incubated sa 37 ° C sa microaerophilicity sa loob ng 24 na oras.

Sa lahat ng mga kaso, ang paglago ay dapat maging kasiya-siya, isinasaalang-alang na ang beta-hemolysis (light halo sa paligid ng kolonya) ay dapat sundin sa S. pyogenes at alpha hemolysis (maberde na halo sa paligid ng kolonya) ay dapat na sundin sa parehong mga strain ng S. pneumoniae. mga kolonya).

Mga Sanggunian

1. Mga nag-aambag sa Wikipedia. Trypticase ako para. Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. Disyembre 17, 2018, 15:47 UTC. Magagamit sa: https://en.wikipedia.org
2. Britannia Laboratories. Triptein toyo. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Tryptic toyo agar. Magagamit sa: foodsafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Argentina. Editoryal Panamericana SA
5. Mga Laboratoryo ng BD. Trypticase Ako ay Agar. 2014.Magagamit sa: .bd.com