- Mga katangian ng isang smear sa dugo
- Mga uri ng smear sa dugo
- Mga pamamaraan para sa pagkuha ng mga sample ng dugo
- Mga pamamaraan para sa paghahanda ng smear ng dugo
- -Slides ng mga smear
- Mga bahagi ng smear na ginawa sa mga slide
- Ang kontrol ng kalidad sa diskarteng slide
- -Step sa coverlip
- Ang kontrol sa kalidad sa diskarte sa mga coverlip
- -Mga awtomatikong kagamitan
- Makapal na pamamaraan ng pahid
- Pagnanasa ng pahid
- Mantok ng Giemsa
- Mantsa ni Wright
- Mga uri ng depekto ng mga smear
- Ang mga smear na may mga lugar na may iba't ibang kapal (manipis at makapal na interspersed)
- Masyadong maikli ang smear smear
- Smear na may raked area patungo sa dulo ng smear
- Smear na may pagbuo ng vacuole o malinaw na bilugan o elliptical na lugar
- Napaka makapal o sobrang manipis na mga smear
- Kasaysayan
- -Erythrocytes o pulang selula ng dugo
- -Mga cell cells o leukocytes
- Segerong neutrophil
- Ang mga naka-segment na eosinophil
- Mga naka-segment na basophils
- Lymphocytes
- Monocytes
- -Platelets
- Mga elemento ng pathological
- Mga parasito ng dugo
- Bakterya
- Mga immature na cell
- Mga Sanggunian
Ang blood smear ay isang peripheral blood smear na ginagamit upang pag-aralan ang mga sangkap na naroroon sa sirkulasyon ng dugo. Ang pagmamasid sa isang smear ng dugo ay nagbibigay ng data na hematological na lubhang kapaki-pakinabang para sa pagsusuri at pag-follow-up ng maraming mga pathologies.
Ginagawa ng smear ng dugo na posible upang mabuo ang bilang ng mga iba't ibang uri ng mga puting selula ng dugo (leukocyte formula), pati na rin upang suriin ang morpolohiya at hugis ng mga erythrocytes, leukocytes at platelet.
Paghahanda ng dugo smear. Pinagmulan: Dugo sa isang baso ng laboratoryo. Pampublikong DomainPictures.net
Sa loob nito, ang mga abnormalidad sa bilang ng mga cell ay maaaring napansin, tulad ng: leukocytosis o leukopenias, lymphocytosis o lymphopenia, neutrophilia o neutropenia, thrombocytosis o thrombocytopenias at eosinophilia. Ang laki ng cell at mga abnormalidad ng hugis ay maaari ring makita.
Bilang karagdagan, posible na makita ang iba't ibang uri ng anemias, leukemias, at impeksyon sa bakterya o dugo.
Para sa mga ito, may iba't ibang uri ng mga smear na ginanap depende sa layunin ng pag-aaral. May mga manipis na smear at makapal na mga smear. Ang mga smear na ito ay naiiba sa pamamaraan ng pagpapatupad at ang layunin ng pag-aaral.
Ang mga may pinong patak ay ginagamit bilang isang katugmang makumpleto ang hematology. Nagbibigay ito ng data sa leukocyte formula, bilang karagdagan sa pagsusuri ng hugis at morpolohiya ng tatlong serye ng cell na bumubuo ng dugo: pulang serye, puting serye at platelet. Bagaman nagsisilbi rin sila bilang isang pandagdag sa pag-aaral ng makapal na film ng dugo.
Ang makapal na pelikula ay ginagamit para sa diagnosis ng mga sakit na dulot ng hemoparasites, tulad ng malaria o malaria, toxoplasmosis, leishmaniasis, Chagas disease, babesiosis at microfilariasis.
Mga katangian ng isang smear sa dugo
Ang isang mahusay na smear ng dugo ay dapat matugunan ang ilang mga katangian. Kabilang sa mga ito maaari nating banggitin:
-Ang sample ay dapat matugunan ang mga minimum na kinakailangan sa kalidad upang maging kinatawan.
-Ang sampling ay dapat na maisagawa nang maayos.
-Matapos ang pagpapatupad ng pahid.
-Kung gumanap ng may venous blood, gumamit ng isang anticoagulant na hindi nababalisa ang mga cell at paghaluin ang tubo bago gawin ang smear.
-Kung ginagawa ito sa dugo ng capillary, itapon ang unang pagbagsak.
-Ang pagkalat ay dapat na homogenous. Tinitiyak nito na ang mga cell ay pantay na ipinamamahagi at na ang mga selula ng dugo ay maaaring masuri nang mabuti para sa hugis at bilang.
-Ang mga panig ng pahid ay dapat na makinis mula sa simula hanggang sa katapusan.
-Ang smear ay dapat igalang ang isang margin ng 1 hanggang 2 mm sa mga gilid ng slide.
-Ang layer ng smear ay dapat na unti-unting bumaba sa kapal mula sa simula hanggang sa dulo (smear na may isang mahusay na pagbaba sa pamamaraan ng slide).
-Kailangan itong maayos na tatak upang maiwasan ang pagkalito sa halimbawang.
-Fix at mantsang maayos para sa malinaw na pagmamasid sa mga elemento ng dugo.
-Naggawa ng tuyo ang smear bago i-mount ang paghahanda sa ilalim ng mikroskopyo. Ang paglalagay ng langis sa paglulubog sa isang basa na pahid ay magiging sanhi ng pagbuo ng mga micelles na pumipigil sa mga cell na makita.
Mga uri ng smear sa dugo
Ang mga smear ng dugo ng peripheral ay maaaring maiuri sa manipis na smear at makapal na smear. Ang mga may manipis na layer ay ginagamit para sa pag-aaral ng leukocyte formula at morphological na pagmamasid sa mga selula ng dugo. Ang extrracellular bacteria tulad ng borrelia at intracellular hemoparasites, tulad ng plasmodium, bukod sa iba pa, ay maaari ding makita.
Sa pinong blob, ang mga species ng parasito ay maaaring makilala, samakatuwid, ito ay isang mas tiyak na pamamaraan kaysa sa makapal na blob, ngunit ang makapal na blob ay mas sensitibo, dahil ito ay isang diskarte sa konsentrasyon na ginagamit para sa labis na paghahanap para sa extracellular hemoparasites.
Mayroong dalawang uri ng mga smear na masarap: ang gumanap sa mga slide at ang gumanap sa mga coverlips. Ang makapal na mga smear ay isinasagawa sa mga slide.
Mga pamamaraan para sa pagkuha ng mga sample ng dugo
Ang mga smear ng dugo ay maaaring gawin mula sa isang capillary puncture o isang venous sample na kinuha gamit ang anticoagulant. Kung isinasagawa mula sa dugo na may anticoagulant, ang smear ay maaaring ihanda hanggang sa 2 oras pagkatapos kunin ang sample.
Ang pag-iingat ay dapat gawin upang magamit ang mga anticoagulant na hindi nagpapahiwatig ng mga selula ng dugo. Ang pinakamahusay na pagpipilian ay ang EDTA. Sa kabilang banda, ang pag-iwas sa anticoagulants tulad ng trisodium citrate ay dapat iwasan.
Kung ang sample ay kinuha sa pamamagitan ng capillary puncture, ang smear ay dapat na palawakin kaagad, bago mag-clots ang dugo.
Ang unang pag-drop ay dapat na itapon, na nagpapahintulot sa susunod na pagbagsak upang makatakas ng kusang upang maiwasan ang pagbabanto ng sample na may fluid ng tissue. Ito ang pinaka pinapayong pamamaraan para sa pagmamasid ng cell morphology, dahil ang dugo ay walang anumang mga additives.
Para sa pagmamasid ng mga hemoparasites, si Solari et al. Natapos sa kanilang gawaing pananaliksik na ang parehong mga pamamaraan (venipuncture at capillary) ay pantay na mahusay.
Mga uri ng sampling dugo: A. Pagbutas ng capillary. B. Malubhang mabutas. Pinagmulan: A. Flickr.com B. Pxhere.com
Mga pamamaraan para sa paghahanda ng smear ng dugo
Ang dugo smear ay maaaring gumanap nang manu-mano sa mga slide ng mikroskopyo o sa isang takip o slide. Posible rin ito sa pamamagitan ng awtomatikong kagamitan.
-Slides ng mga smear
Ito ang pamamaraan na ginusto ng karamihan sa mga laboratoryo dahil sa madaling paghawak.
Gamit ang isang Pasteur pipette, ilagay ang isang hindi masyadong makapal o napakahusay na pagbagsak ng dugo sa gitna ng isang dulo ng isang malinis na slide.
Ang smear ay ginawa sa tulong ng isa pang slide na may pagtatapos ng lupa. Ang ground glass slide ay inilalagay patayo sa kabaligtaran na dulo ng kung saan matatagpuan ang patak.
Tumagilid ito sa isang anggulo sa pagitan ng 30 - 45 ° at dumulog patungo sa pagbagsak; Kapag hinawakan, lumalawak ito nang magkakasunod sa gilid ng ground slide at may isang palaging at tinukoy na paggalaw ang sheet ay bumalik; bago maabot ang dulo ang slide ay nakataas.
Sa ganitong paraan, ang isang homogenous layer ay kumakalat sa ibabaw ng natanggap na slide.
Ang pahid ay pinapayagan na matuyo. Ito ay pagkatapos ay naayos at marumi sa ginustong mantsang. Payagan na matuyo nang mabuti bago matingnan sa ilalim ng mikroskopyo. Ang isang patak ng langis ay inilalagay sa mukha na nagpapakita ng pahid at sinusunod sa ilalim ng isang light mikroskopyo.
Ang smear ng dugo sa slide. Nangungunang imahe: hindi matatag na smear. Ibabang imahe: marumi smear. Pinagmulan: Coinmac
Mga bahagi ng smear na ginawa sa mga slide
Sa ganitong uri ng smear, tatlong natukoy na lugar ay maaaring makilala: ang ulo, katawan at buntot. Ang ulo ay tumutugma sa lugar kung saan nagsisimula ang smear, ito ang pinakamakapal na lugar at hindi ito magandang tingnan.
Ang katawan ay ang gitnang o intermediate na bahagi ng smear, ito ang pinakamahusay na lugar na obserbahan sa ilalim ng mikroskopyo, dahil doon ay pantay na ipinamamahagi ang mga cell at ang kanilang morpolohiya ay napanatili.
Ang buntot ay tumutugma sa pangwakas na bahagi ng pahid; dito ang pamamahagi ay hindi na pantay at erythrocyte morphology ay may posibilidad na mawala.
Ang kontrol ng kalidad sa diskarteng slide
Sa pamamaraang ito gumaganap ng isang pangunahing papel:
-Nagpaparamdam at nagpapabagal ng slide: ginagarantiyahan nito ang mahusay na pag-slide ng sample.
-Ang laki ng pagbagsak: na may napakalaking patak ay isang mas makapal at mas mahaba ang pahid ay makuha, na may isang napakaliit na patak ang pagkalat ay magiging mas maikli at lubos na pagmultahin.
-Ang bilis na inilapat sa extension: mas mababa ang bilis ng smear ay magiging mas payat, mas mataas ang bilis na ito ay magiging mas makapal.
-Ang anggulo ng pagpapatupad: mas maliit ang anggulo ng mas pinong smear, mas malaki ang anggulo na mas makapal.
-Step sa coverlip
Hindi ito malawak na ginagamit sapagkat ang paghawak ng mga marupok na coverlips ay mahirap, gayunpaman nag-aalok ito ng mahusay na kalamangan, dahil ang isang mas mahusay na pamamahagi ng mga cell ay nakuha sa buong pahid.
Ang isang hindi masyadong makapal, hindi masyadong pinong drop ay inilalagay sa gitna ng isang takip. Kaagad ang isa pang coverlip ay inilalagay sa tuktok nito sa paraang ang mga tip ng parehong mga takip na protrude, na bumubuo ng isang bituin.
Ang pagbagsak ay kusang kumakalat sa ibabaw ng parehong mga takip. Sa pagtatapos ng pagpapalawak, ang bawat slide ay dumulas sa kabaligtaran ng bawat isa (ang isa sa kanan at ang isa sa kaliwa) nang mabilis.
Ang pamamaraan ay nagbibigay ng dalawang smear sa halip ng isa.
Ang mga ito ay inilalagay upang matuyo kasama ang pagkalat sa gilid. Sa sandaling tuyo, ito ay naayos at marumi sa pamamaraan na pinili. Hayaan itong matuyo. Ang isang patak ng langis ng paglulubog ay inilalagay sa isang slide, ang smear ay inilalagay kasama ang smear side, at tiningnan sa ilalim ng isang mikroskopyo.
Ang kontrol sa kalidad sa diskarte sa mga coverlip
Upang makakuha ng isang mahusay na pahid para sa pamamaraang ito mahalaga na:
-Pagsasara ng mga takip (tumutulong sa halimbawang slide nang maayos).
-Ang laki ng pagbagsak (nakakaimpluwensya sa kapal ng smear).
-Ang bilis na kung saan ang mga takip ay nakahiwalay (nakakaimpluwensya sa homogenous ng pagkalat).
-Mga awtomatikong kagamitan
Maaari silang magawa sa pamamagitan ng alinman sa mga pangkat na ito: Spinner at Autoslide.
Ang Spinner ay binubuo ng paglalagay ng isang slide na may isang patak ng dugo sa isang espesyal na plato ng sentrip. Ang sample ay nakasentro sa mataas na bilis; sa ganitong paraan nabuo ang isang homogenous at fine smear ng sample. Mayroon itong kawalan ng posibilidad ng hemolysis ng sample.
Ang Autoslide ay isang instrumento na mekanikal na nagsasagawa ng mga paggalaw para sa pagpapatupad ng smear sa mga slide. Maaari mo ring ayusin at mantsahan ang smear. Maaari itong maiakma sa ilang mga awtomatikong counter ng hematology.
Makapal na pamamaraan ng pahid
Upang maghanap para sa mga hemoparasites, inirerekomenda ang dalawang smear: ang isa ay may isang mahusay na pagbagsak at ang isa ay may isang makapal na patak.
Magsagawa ng isang capillary puncture, linisin ang unang pagbagsak. Maglagay ng isang mahusay na pagbagsak sa isang slide at smear tulad ng naunang ipinaliwanag. Para sa makapal na bead, maglagay ng isang malaking kuwintas sa isa pang slide at kumalat sa isang 1.55mm square. Hayaang matuyo ang dalawang smear.
Pagnanasa ng pahid
Ang mga stain ng Giemsa o Wright, bukod sa iba pa, ay maaaring magamit para sa mga pinong patak. Giemsa o May-Grunwald Giemsa mantsa ay inirerekomenda para sa makapal na mga smear.
Mantok ng Giemsa
Ang smear ay naayos para sa 3 minuto na may methanol, pinatuyo at pinapayagan na muling matuyo. Ang smear ay natatakpan ng mantsa ng Giemsa sa loob ng 10-15 minuto. Ito ay hugasan ng distilled water at pinapayagan na matuyo. Upang obserbahan sa ilalim ng mikroskopyo ay inilalagay ang isang patak ng langis ng paglulubog.
Mantsa ni Wright
Ang smear ay natatakpan ng mantsa ni Wright ng 5 minuto. Itapon at ilagay ang solusyon sa buffer sa pH 6.8 para sa 6 minuto. Pumutok ang paghahanda sa homogenize. Hugasan gamit ang distilled water at payagan na matuyo. Sundin sa ilalim ng mikroskopyo.
Mga uri ng depekto ng mga smear
Ito ay nangyayari sa mga trainees sa pinong pag-drop technique na may mga slide.
Ang mga smear na may mga lugar na may iba't ibang kapal (manipis at makapal na interspersed)
Ito ay dahil ang paggalaw na naisakatuparan ay hindi palaging sa panahon ng pagkalat, paggawa ng mga paghinto at pag-restart.
Masyadong maikli ang smear smear
Mayroon silang 2 mga sanhi: ang isa ay dahil sa ang katunayan na ang ground slide ay naangat bago maabot ang kabilang dulo ng slide. Sa kasong ito ito ay lubos na makapal at maikli.
Sa kabilang banda, kung ang smear ay maikli ngunit payat, ito ay dahil ang laki ng pagbagsak ay napakaliit.
Smear na may raked area patungo sa dulo ng smear
Mayroon itong maraming mga kadahilanan: ang isa ay na ang ground edge ay may depekto, na ang presyon na ipinataw sa natanggap na slide ay nadagdagan sa oras ng pagkalat o na ang gilid ng ground ng slide ay isinusuot.
Smear na may pagbuo ng vacuole o malinaw na bilugan o elliptical na lugar
Ang mga ito ay dahil sa paggamit ng mga madulas na smear (hindi maganda hugasan at degreased).
Napaka makapal o sobrang manipis na mga smear
Ang mga patak na napakalaki ay makakagawa ng napakakapal na mga smear mula umpisa hanggang katapusan at napakaliit na patak ay makakapagdulot ng napakadaming mga smear.
Kasaysayan
Ang mga selula ng dugo ay makikita sa isang smear ng dugo. Kabilang sa mga ito ay:
-Erythrocytes o pulang selula ng dugo
Ang dugo ng tao, erythrocytes o pulang selula ng dugo at dalawang puting selula ng dugo. Kinuha at na-edit mula sa: Viascos. Ang iyong pagmamasid ay pinakamahalaga. Sa antas na ito, maaaring makita ang anemias, thalassemia, sakit sa utak ng buto, atbp.
Ang bilang ng mga erythrocytes o pulang selula ng dugo ay humigit-kumulang na 5 x 10 6 mm3 sa mga kalalakihan at 4.5 x 10 6 sa mga kababaihan. Ang mga pulang selula ng dugo ay hugis tulad ng mga biconcave disc, na may gitnang physiological pallor. Maaari silang makita nang hiwalay (normal) o bumubuo ng mga rouleaux stacks (abnormal).
Nagpapakita din ang mga luha ng poikilocytosis (mga pulang selula ng dugo na may iba't ibang mga hugis), anisocytosis (pulang mga selula ng dugo ng iba't ibang laki), anisopoikilocytosis (iba't ibang mga hugis at sukat), anisochromia (iba't ibang kulay), erythroblasts (wala pa masyadong pulang selula ng dugo), microcytosis (mas maliit na pulang selula ng dugo) ) at mga macrocytes (mas malaking erythrocytes).
Kapag naglalahad sila ng kakulangan sa dami ng hemoglobin at pagtaas ng gitnang papag, sinasabing mayroong hypochromia. Kung sinusunod ang isang normal na pulang serye, maiuulat ito bilang normocytic at normochromic.
-Mga cell cells o leukocytes
Mga puting selula ng dugo
Ang normal na halaga ay mula sa 5,000 hanggang 10,000 mm 3 . Binago ang mga ito sa mga nakakahawang proseso, sa mga alerdyi at sa lukemya. Maraming mga uri ay maaaring makilala sa dugo smear, na ipinaliwanag sa ibaba.
Segerong neutrophil
Kinakatawan nila ang 55-65% ng kabuuang leukocytes. Sinusukat nila ang pagitan ng 10-15 μm. Mayroon silang isang segmented o lobed nucleus na gumagamit ng iba't ibang mga morpolohiya, samakatuwid ay tinatawag itong polymorphonuclear.
Mayroon silang masaganang neutrophilic granules sa kanilang cytoplasm at ilang azurophils. Dagdagan nila ang mga impeksyong bakterya (neutrophilia), pagbaba sa mga impeksyon sa virus (neutropenia).
Ang mga abnormalidad ng Morolohikal tulad ng pleokaryocytosis (hyper-segmented nuclei), mga arko (mga immature cell) o macro-polices (hugis-hugis at malaki) ay maaaring sundin.
Iba pang mga pagbabago
-Toxic butil
-Pseudo Pelger neutrophils (ang nucleus ay hindi lobed o bilobed).
-Mga katawan: madilim na asul na mga inclusyon ng cytoplasmic.
-Increased cytoplasmic basophilia.
-Intracytoplasmic vacuoles.
-Cellular picnosis (pagkawala ng mga tulay na pang-industriya).
Ang mga naka-segment na eosinophil
Kinakatawan nila ang 1-3% ng kabuuang mga puting selula ng dugo. Sinusukat nila ang 9-10 μm. Ang mga ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagkakaroon ng masaganang acidophilic cytoplasmic granules at ilang azurophiles. Ang nucleus nito ay may dalawang lobulasyon. Ang kanilang bilang ay nagdaragdag sa mga alerdyi at sakit ng parasito na pinagmulan.
Mga naka-segment na basophils
Ang mga ito ay napaka-bihira, na kumakatawan sa 0-1% ng mga leukocytes. Sinusukat nila ang 10-12μm. Ang nucleus ay karaniwang hindi regular sa mga margin at maaaring bilob, ngunit hindi ito sinusunod dahil sa malaking bilang ng mga basophilic coarse granulations sa cytoplasm nito. Sobrang bihira, makikita ang basophilia.
Lymphocytes
Ang mga ito ay maliit na mga cell na may basophilic cytoplasm, na may isang nucleus, mahusay na tinukoy, bilog, na may condensed chromatin. Ang nucleus ay sumasaklaw sa halos buong cell. Kinakatawan nila ang 26-40% ng mga leukocyt ng dugo. Tumataas sila sa mga impeksyon sa viral (lymphocytosis). Makikita ang reaktibo na mga lymphocytes.
Monocytes
Ang mga cell na mas malaki kaysa sa mga lymphocytes, na may mas malaking cytoplasm at looser, oval na chromatin nuclei. Sinusukat nila ang 9-12μm. Ang cytoplasm ay sagana at karaniwang lilitaw na maputlang kulay-abo na asul na may karaniwang mga pamamaraan ng paglamlam. Ang mga nabago na monocytes at monocytosis ay maaaring sundin sa mga pagbabago.
-Platelets
Sinusukat nila ang pagitan ng 1.5-3 μm. Ang hugis nito ay bilog o hugis-itlog. Ang normal na halaga ay mula sa 150,000 hanggang 350,000 platelet / mm3. Maaari silang bumaba sa ilang mga impeksyon sa virus. Wala silang nucleus at may kulay na lila. Ang mga abnormalidad ay maaaring makita sa seryeng ito, tulad ng macro o micro platelet, thrombocytosis o thrombocytopenia, at mga fragment ng platelet.
Mga elemento ng pathological
Mga parasito ng dugo
Ang mga hemoparasites, tulad ng causative agent ng malaria o malaria (mga parasito ng genus Plasmodium), ay maaaring makita sa mga smear ng dugo. Para sa kadahilanang ito, mahalaga na manu-manong aralan ang smear, dahil ang mga awtomatikong kagamitan ay napalampas ang paghahanap na ito.
Bakterya
Sa mga pathology tulad ng relapsing fever o Lyme disease, maaaring maobserbahan ang causative agent nito. Sa kasong ito, tumutugma ito sa Borrelia recurrenti spirochetes at Borrelia burgdorferi sa dugo smear.
Mga immature na cell
Ang mga malubhang kaso ay sinusunod sa leukemias, leukemoid reaksyon, at reaksyon ng leukoerythroblastic, bukod sa iba pa. Sa mga impeksyon sa bakterya ay maaaring may kaunting mga paglihis sa kaliwa (pagkakaroon ng mga crooks). Ang mga erythroblast ay maaari ring makita sa ilang mga anemias.
Mga Sanggunian
- Dugo at hematopoietic tissue. Magagamit sa: sld.cu
- Gomez A, Casas M. 2014. Anghel. Pagsasalin sa klinika sa klinika. Ika-8 na Edisyon. Editoryal na Médica Panamericana.
- Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Mga Account sa Llanos A. Paghahambing ng mga dulot ng mga parasito sa makapal na venous blood drop kumpara sa acupressure sa diagnosis ng Malaria vivax. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Magagamit sa: scielo.org.
- Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. Kahalagahan ng pag-aaral ng peripheral blood smear sa matatanda. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Magagamit sa: scielo.sld
- Grinspan S. Ang pag-aaral ng peripheral blood smear. Pagpapatuloy na edukasyon sa medisina. Magagamit sa: bvs.hn/RMH