- Batayan
- Paghahanda
- Aceto-orcein solution 1%
- Lacto-proponic solution orcein 1%
- Orcein A at Orcein B
- Pangwakas na mga saloobin
- Mga Sanggunian
Ang orceína ay isang likas na kulay na lila, na nakuha mula sa iba't ibang mga lichens bilang orchilla o archill, fruticose lichen Rocella tinctoria at Lecanora parella higit sa lahat. Ang Rocella tinctoria ay matatagpuan sa kontinente ng Africa at Amerikano, bagaman maaari itong mapalitan ng iba pang mga species na matatagpuan sa Europa.
Ang mantsa na ito ay malawakang ginagamit sa mga pag-aaral ng cytogenetic mula pa noong unang panahon. Sa kahulugan na ito, ang paghahanda ng orcein na kinabibilangan ng acetic acid ay ipinakilala ng LaCourt noong 1941, na kung saan ito ay una na tinawag na pamamaraan ng LaCourt.
Ang istraktura ng kemikal ng solusyon sa orcein at orcein. Pinagmulan: Wikipedia.org/ Oguenther sa de.wikipedia (Dr. Guenther)
Gayundin, dahil sa pagiging simple at mababang gastos, ginamit ito para sa paggawa ng litmus (isang mantsa na nakuha mula sa mga lichens) at sa mga pag-aaral sa kasaysayan (paglamlam ng mga cell at tisyu).
Maraming mga pag-aaral ang ginamit ang paglamlam na ito na pinagsama sa iba pang mga kemikal, tulad ng ammonia picrocarminate at acetic acid, upang mantsahan ang nababanat na mga hibla at chromosome ayon sa pagkakabanggit. Sa kasalukuyan, ang orcein ay patuloy na ginagamit sa mga pag-aaral ng cytogenetic ng mga hayop at halaman.
Kamakailan lamang, si Silva et al. Matagumpay na ginamit ng 2017 ang mantsa na ito upang ma-obserbahan ang iba't ibang mga pagbabago na nagaganap sa nababanat na mga hibla ng balat ng hinlalaki sa Chile na mas matanda. Inilahad ng pag-aaral na ito kung paano nagbabago ang mga hibla ng hinlalaki na may pagtanda.
Sa kahulugan na ito, ang nababanat na mga hibla ay na-obserbahan na maging brownish-itim ang kulay sa mga indibidwal na mas matanda sa 80 taon; habang sa bunso (mula sa 60 taon) nakikita sila bilang mapula-pula. Ang cytoplasm at iba pang mga istruktura ng cell ay nagiging dilaw-berde.
Pinapayagan nito ang corroborating ang pagkakaroon at kondisyon ng nababanat na mga hibla, sa mga tuntunin ng kanilang disposisyon, dami at integridad. Sa kabilang banda, itinuro din na ang orcein ay malaking tulong sa pagkilala sa mga aneurisma at pag-diagnose ng arteritis, bukod sa iba pang mga kondisyon.
Batayan
Ang Orcein ay bahagi ng pangkat ng mga oxazine, at ang paglamlam ay batay sa pagkakaugnay nito para sa DNA. Ang dye ay nagbubuklod sa negatibong singil ng molekulang ito, na kinakatawan ng pangkat na pospeyt. Iyon ang dahilan kung bakit, ang mga kromosoma ay namantsahan ng lila.
Gayunpaman, ang natitirang mga istraktura ng cell ay kumuha ng ibang kulay. Partikular, sa kaso ng nababanat na mga hibla, ang mga ito ay may kulay na mapula-pula na kayumanggi, cell nuclei mula sa asul hanggang madilim na lila, habang ang collagen ay hindi mantsang.
Para sa kadahilanang ito, ang orcein ay ginagamit upang mantsang chromatin at magkakaiba sa sex sa ilang mga species ng lilipad. Gayundin, ang mga nuklear at ilang mga pagkakasama sa atay na ginawa ng mga antigen ng hepatitis B ay maaaring mantsang.
Ang mga solusyon sa orcein ay may mga tiyak na pag-andar sa paglamlam. Ang Orcein A ay may function ng paglambot ng mga lamad ng cell, na nagiging sanhi ng kanilang pagkamatay at pagkalumpo sa proseso ng kanilang dibisyon. Samantala, ang orcein B ay responsable sa pagkumpleto ng paglamlam sa pamamagitan ng pagdikit nito sa mga kromosoma.
Paghahanda
Aceto-orcein solution 1%
Upang maghanda ng isang 1% na solusyon ng aceto-orcein, ang 2 gramo ng orcein ay natunaw sa 45 ml ng glacial acetic acid, mas mabuti na mainit, at 55 ml ng distilled water ay idinagdag sa temperatura ng silid.
Pagkatapos, ito ay patuloy na halo-halong sa homogenize ang solusyon, upang kalaunan ay magpahinga ito hanggang sa lumamig. Sa wakas, naka-imbak ito sa 4ºC sa madilim na garapon. Ang paghahanda na ito ay ginamit ni Flores 2012, upang obserbahan ang mga yugto ng pagkahinog ng mga oocytes ng baka.
Sa kasong ito, halimbawa, ang solusyon ng aceto-orcein ay inilalagay sa tisyu na dati nang naayos sa acetic acid-ethanol sa loob ng 24 na oras. Ang prosesong pagnanasa na ito ay isinasagawa para sa 30 minuto at ang tisyu ay kalaunan ay nai-discol.
Gayundin, maaari itong magamit sa pagkilala sa mga organelles sa mga multicellular na tisyu. Sa kasong ito, ang isang smear ng buccal mucosa ay may mantsa na may isang patak ng solusyon ng aceto-orcein, ang mga coverlip ay inilalagay sa slide at ang nucleus ng cell na may mga substructure nito ay maaaring agad na masunod.
Lacto-proponic solution orcein 1%
Bilang karagdagan, ang orcein ay maaaring ihanda sa iba pang mga kemikal tulad ng lactic acid at propionic acid. Upang gawin ito, ang isang gramo ng orcein ay natunaw sa isang premixed solution sa temperatura ng silid na 23 ml ng lactic acid at 23 ml ng propionic acid; bumubuo ng lakas ng tunog na may dalisay na tubig hanggang sa 100 ml.
Sa ganitong lacto-propionic orcein solution posible na obserbahan ang iba't ibang mga phase ng meiotic division ng mga cell cells. Sa kasong ito, ang pre-fixed at hydrolyzed sample ay inilalagay sa loob ng 15 minuto sa lacto-propionic orcein solution at pagkatapos ay kumalat ang tissue sa mga mikroskopong slide.
Sa pag-aaral ng Duque 2016 sa mga polygenic chromosome, ginamit niya ang isang paghahanda ng 2 gramo ng orcein na diluted sa acetic acid at 85% lactic acid, diluting na may isang 65% acetic acid solution. Sa wakas, tiningnan niya ang mga kromosoma sa salivary glandula ng Drosophila melanogaster.
Orcein A at Orcein B
Mahalagang tandaan na depende sa sample at kung ano ang susuriin, handa ang naaangkop na solusyon sa orcein. Kaya, halimbawa, ang 1N hydrochloric acid ay idinagdag sa orcein A solution upang obserbahan ang paghahati ng mga cell.
Habang ang solusyon ng orcein B ay natunaw sa 45% acetic acid. Ang pamamaraan na ito ay isang pinaikling pamamaraan ng paglamlam at sa pangkalahatan ay ginagamit bilang isang kaakma sa paglamlam ng mga istruktura ng chromosomal.
Pangwakas na mga saloobin
Mula noong mga siglo na ang nakaraan, ang mga lichens tulad ng Lecanora, Parmelia at Umbilicaria ay matatagpuan sa mga bansa ng kontinente ng Amerika tulad ng Argentina, na mahusay na mapagkukunan ng orcein. Gayundin ang mga European area tulad ng Canary Islands, ay sa oras na ang mga malalaking prodyuser ng orchilla.
Na-export ito sa iba pang mga lungsod ng parehong kontinente tulad ng Genoa at mga bansa tulad ng England, habang ang Holland ay monopolyo ang paggawa ng litmus mula sa orchilla. Samakatuwid, ang lichen na ito ay nabawasan hanggang sa malapit na itong mawala.
Ito ang humantong sa orchilla na pinalitan ng iba pang mga halaman na may mga katangian ng pangulay. Gayunpaman, ang paglitaw ng mga sintetikong tina ay nag-ambag sa pagtatapos ng kalakalan sa lichen na pinagmulan ng orcein na ito.
Posible ito salamat kay Cocq, na noong 1812 ay inilarawan ang synthesis ng orcein, alam na pagkatapos na ito ay synthesized ng isang phenolic compound na tinatawag na orcinol. Gayunpaman, sa kabila nito, ang natural na orcein pa rin ang ginustong ngayon.
Maaaring ito ay dahil ang orcinol ay isang napakalakas na amoy na tambalang at ang matagal na pagkakalantad na maaaring humantong sa mga panganib sa kalusugan, tulad ng pagkawala ng kakayahang makita ang mga amoy. Ang mga pinsala sa pituitary ay maaaring pumunta mula sa pansamantala hanggang sa permanenteng mas malaki ang pagkakalantad.
Mga Sanggunian
- Ortega L, García R, Morales C. «Application ng laccase na ginawa ng fungi para sa pagkasira ng microbiological dyes (orcein at crystal violet).» Mga kabataan sa Agham 2. 2015; 633-637. Magagamit sa: jovenesenlaciencia.ugto.mx.
- Barcat J. Orceína at nababanat na Fibre. Gamot (Buenos Aires) 2003; 63: 453-456. Magagamit sa: Medicinabuenosaires.com.
- Silva J, Rojas M, Araya C, Villagra F. Makasaysayang katangian ng Flying Face Skin ng Thumb sa Chilean Indibidwal na may factylogram fading. J. Morphol. 2017; 35 (3): 1107-1113. Magagamit sa: scielo.conicyt.
- Orrillo M, Merideth B. "Mga patatas na biology at cytogenetics." International Potato Center (CIP). Teknikal na manu-manong. Magagamit sa: research.cip.cgiar.org/
- Flores F. «Koleksyon, kultura at sa vitro pagkahinog ng mga oocytes ng baka (bos taurus) sa mga liblib na Bolivian." . National University of the Altiplano, Puno-Peru; 2012.Ang magagamit sa: repositorio.unap.edu.pe.
- Duque C. Polytenic chromosome: Isang pagtingin sa kababalaghan ng endoreduplication. National University of Colombia, Medellín; 2016. Magagamit sa: edu.
- Camarena F. Cellular at Molecular Biology. Manwal ng praktikal. Autonomous University ng Baja California. 2017.Magagamit sa: pez.ens.uabc.mx.
- FAO / IAEA. 2018. Mano-manong pag-iba-ibahin ang wild at reared na Anastrepha ludens (Loew) ay lumilipad mula sa normal na pilay ("bi-sexual") at genetically sexed strain (Tapachula-7), irradiated at unirradiated. Guillen Aguilar JC, López Muñoz L, López Villalobos EF at Soto García DN Organisasyon ng Pagkain at Agrikultura ng United Nations. Roma, Italya, 95 p.
- Orcein. (2018, Nobyembre 30). Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. Petsa ng konsultasyon: 03:38, Hulyo 31, 2019 es.wikipedia.org.
- Merck Millipore. (2018, Hulyo 16). Ang mikroskopyo ng Orcein para sa mikroskopya ng Certistain. Magagamit sa: merckmillipore.com