- katangian
- Gumamit
- Mga pamamaraan sa lugar ng bacteriology
- Castañeda mantsahan para sa paglamlam
- Binago ang mantsa ng Koster
- Paglamlam ng capsule ng bakterya
- Pagnanasa ng spore
- Mantsang Gram-Hucker
- Mga pamamaraan sa lugar ng kasaysayan
- Kulchitsky cell staining (enterochromaffins)
- Osteoarthritis stain
- Mantsang para sa pagkakakilanlan ng macroalgae
- Pagkalasing
- Mga Sanggunian
Ang safranin ay isang meriquinoide dye, na pinangalanan para sa istrukturang kemikal nito na mayroong dalawang benzenoid singsing at ng 2 quinoid singsing, ang huli ay ang mga nagbibigay ng kulay pula.
Tinatawag din itong dimethyl safranin o pangunahing pula 2 sa maikli nitong anyo, dahil ang pang-agham na pangalan nito ay 3,7-diamino-2,8-dimethyl-5-phenyl-phenaziniumchloro dimethyl safranin at ang formula ng kemikal ay C 20 H 19 N 4 Cl.

Ang istruktura ng kemikal ng safranin na nagpapahiwatig ng benzenoid at quinoid singsing / Maasim na solusyon ng safranin. Pinagmulan: NEUROtiker na na-edit ni MSc. Marielsa Gil / LHcheM
Mayroong isang variant na tinatawag na trimethyl-safranin ngunit walang makabuluhang pagkakaiba sa pagitan ng dalawang sangkap.
Ang Safranin ay isang monochromatic dye at, depende sa mga katangian ng formula ng kemikal, ay isang positibong sisingilin na sangkap. Samakatuwid, mayroon itong isang ugnayan para sa mga negatibong istruktura na sisingilin. Ang mga istrukturang ito ay marumi pula.
Ang ari-arian na ito ay nagbibigay ng kakayahang magamit sa maraming mga teknolohikal na pamamaraan upang mantsang iba't ibang mga istruktura ng cellular, kapwa ng eukaryotic at prokaryotic na organismo.
Ang Safranin ay ginagamit bilang isang kaibahan ng pangulay sa mahalaga at kilalang pamamaraan para sa nakagawiang paggamit sa bacteriology. Ang mga pamamaraan na ito ay: mantsang Gram-Hucker, mantsa ng Schaeffer Fulton para sa mga spores o paglamlam ng mga capsule ng bakterya, bukod sa iba pa.
katangian
Ang kulay ng safron (isang pampalasa na nakuha mula sa mga stigmas ng bulaklak ng Crocus sativus) ay ang inspirasyon na pangalanan ang pangulay na ito. Mula sa salitang saffron ay nagmula ang pangalan ng safranin. Ito ay dahil sa mahusay na pagkakatulad sa pagitan ng kulay ng safron at pangkulay na ibinibigay ng pangulay na ito.
Ang Safranin ay magagamit bilang mga kristal o pulbos, ang parehong mga pagtatanghal na natutunaw sa tubig. Ang safranin dye ay walang amoy. Pula ang mga istraktura ng pula. Ang mga istruktura na nakakaakit ng safranin dye ay tinatawag na safranophiles.
Structurally safranin ay kumplikado, ito ay may dalawang benzenoid singsing sa mga sulok at sa sentro ay matatagpuan sa dalawang quinoid rings kung saan ang N + kasyon ay matatagpuan . Ang sentro ng istraktura ay ang sistema na namamahala sa pagbibigay ng kulay. Dahil sa katangian na ito, ang colorant na ito ay inuri sa loob ng kategorya II.
Gumamit
Ang Safranin ay ginamit upang mantsang iba't ibang mga istraktura. Lalo na nagha-highlight ang mga Kulchitsky cells na naroroon sa gastrointestinal tract, na tinatawag ding mga cell ng enterochromaffin.
May kakayahang mapanatili ang mga microorganism na kabilang sa pamilyang Rickettsiaceae. Gayundin, ginagamit ito sa iba't ibang mga pamamaraan, tulad ng pamamaraan ng Koster, isang nabagong ginamit upang mantsang bakterya ng genus na Brucella.
Sa kabilang banda, ang safranin ay ginagamit sa Schaeffer Fulton spore stain technique at sa Gram-Hucker staining. Sa parehong mga pamamaraan, ang safranin ay gumagana bilang isang kaibahan na pangulay.
Sa una, kinuha ng mga spores ang kulay ng berachite green at ang natitirang mga istraktura ay pula ng safranin. Sa pangalawa, ang mga negatibong bakterya ng Gram ay nawalan ng kulay ng kristal na kulay-lila sa hakbang na pagkawalan ng kulay, samakatuwid ang safranin ay ang isa na stains ang negatibong bakterya ng Gram.
Bilang karagdagan, ang safranin ay ginagamit sa bacteriology upang maghanda ng Brucella agar media na may isang pagbabanto ng safranin 1: 5000. Naghahatid ang medium na ito upang makilala ang mga species ng Brucella suis mula sa natitirang mga species. Ang Brucella melitensis at Brucella abortus ay lumalaki sa daluyan na ito ngunit ang B. suis ay hinarang.
Sa larangan ng agro-pang-industriya, ang safranin ay ginamit sa 2.25% at lasaw ng 1:10 upang mantsang mga halimbawa ng stem ng halaman ng tubo.
Ang halaman na ito ay karaniwang apektado ng bakterya Leifsonia xyli subsp. Si xyli, na pumipinsala sa xylem ng halaman. Nasusuri ang mga batik na tangkay upang matukoy ang pag-andar ng mga xylem vessel.
Mga pamamaraan sa lugar ng bacteriology
Castañeda mantsahan para sa paglamlam
Ang isang dugo o tissue smear ay inilalagay sa isang buffer solution (pospeyt buffer pH 7.6). Payagan na matuyo nang kusang at pagkatapos ay takpan ng asul na methylene sa loob ng 3 minuto at counterstain na may safranin. Ang mga Rickettsiae ay may kulay na asul, naiiba sa pulang background.
Binago ang mantsa ng Koster
Ang isang smear ay ginawa at sinusunog sa mas magaan para sa pag-aayos. Kasunod nito, sakop ito ng isang halo ng 2 bahagi ng puspos na may tubig na safranin na may 3 bahagi ng 1 mol / L KOH solution, para sa 1 minuto. Ang isang hugasan ay isinasagawa na may distilled water at counterstained na may 1% karbohidrat na asong methylene.
Kung ang sample ay naglalaman ng bakterya ng genus Brucella, lilitaw ang mga ito na orange sa isang asul na background.
Paglamlam ng capsule ng bakterya
Ang isang halo ng suspensyon ng bakterya ay ginawa gamit ang tinta ng India at safranin ay idinagdag. Sa ilalim ng mikroskopyo, isang mapula-pula na halo ang lilitaw sa paligid ng bawat kapsula ng bakterya na may itim na background.
Pagnanasa ng spore
Ang isang pagkalat ay ginawa gamit ang suspensyon ng bakterya. Pagkatapos ay naayos na ito upang magpainit. Nakasaklaw ito ng 5% berde malachite, madalas na nagniningas hanggang sa paglabas ng mga singaw. Ang proseso ay paulit-ulit para sa 6-10 minuto. Sa wakas, hugasan ito ng tubig at counterstained na may 0.5% safranin sa loob ng 30 segundo. Ang bacilli stain pula at berde ang spores.
Mantsang Gram-Hucker
Ang isang smear ay ginawa gamit ang suspensyon ng bakterya at naayos sa init. Takpan ang slide na may kristal na violet sa loob ng 1 minuto. Pagkatapos ang lugol ay inilalagay bilang isang mordant solution sa loob ng 1 minuto. Kasunod nito, napaputi ito ng acetone alkohol at sa wakas ay naisip na may safranin sa loob ng 30 segundo.
Gram positibong bakterya mantsang bluish violet at Gram negatibong bakterya pula.
Ang ilang mga laboratoryo ay tumigil sa paggamit ng pamamaraan ng Gram-Hucker upang magpatibay ng nabagong pamamaraan ng Gram-Kopeloff. Sa huli, ang safranin ay pinalitan ng pangunahing fuchsin. Ito ay dahil ang safranin ay mahina ang mga species ng Legionella, Campylobacter at Brucella genera.
Mga pamamaraan sa lugar ng kasaysayan
Kulchitsky cell staining (enterochromaffins)
Ang mga seksyon ng pagtanggal mula sa gastrointestinal tract ay namantsahan ng pilak na klorido. Pagkatapos ito ay decolorized na may sodium thiosulfate at sa wakas ay naisip na may safranin.
Ang mga selula ng Kulchitsky ay nakikilala sa pagkakaroon ng mga blackish-brown granules.
Osteoarthritis stain
Sapagkat ang safranin ay may positibong singil, napakahigpit ito sa mga carboxyl at sulfate na grupo ng mga glycosaminoglycans. Ang mga ito ay bahagi ng mga proteoglycans na bumubuo sa articular cartilage. Sa kahulugan na ito, kapag ang paglamlam sa safranin O, posible na matukoy kung may pagkawala ng kartilago o hindi.
Ang pagkawala ng cartilaginous tissue ay maaaring masukat gamit ang scale ng Mankin o tinawag ding scale ng osteoarthritis.
Ipinapaliwanag ang pamamaraan sa ibaba: ang seksyon ng histological ay nalubog sa isang tray na may solusyon na iron hematoxylin ng Weigert, pagkatapos ay dumaan sa acid alkohol at hugasan ng tubig.
Ipagpatuloy ang proseso ng pangkulay sa pamamagitan ng paglubog ng slide sa mabilis na berde, nahugasan ito ng acetic acid at ngayon ito ay nalubog sa safranin O. Upang matapos ang proseso, nalulubog ang paggamit ng mga alkohol sa iba't ibang mga konsentrasyon sa pataas na pagkakasunud-sunod. Ang huling hakbang ay nangangailangan ng xylene o xylene para sa sample upang linawin.
Ang mga slide ay nakondisyon sa balsamo ng Canada o katulad na sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo.
Gamit ang pamamaraan na ito, ang nuclei ay may kulay na itim, ang buto berde at ang kartilago kung saan ang mga proteoglycans ay matatagpuan na pula.
Mantsang para sa pagkakakilanlan ng macroalgae
Inirerekomenda ni Pérez et al noong 2003 ang isang simple at murang pamamaraan upang makulay ng macroalgae. Ang mga sample ay inihanda sa mga seksyon ng paraffin histological. Ang mga seksyon ay naayos na may 1% gliserin, na nagpapahintulot sa kanila na matuyo nang lubusan. Pagkatapos ay inilalagay ito sa xylol upang alisin ang paraffin.
Ang seksyon ay rehydrated sa pamamagitan ng pagpasa nito sa pamamagitan ng isang serye ng mga trays na naglalaman ng etanol sa iba't ibang mga degree ng konsentrasyon (pababang pagkakasunud-sunod), para sa 2 min sa bawat isa.
Kasunod nito, ito ay namantsahan para sa 5 minuto na may 3: 1 halo ng 1% safranin na may 1% toluidine asul, na parehong inihanda sa 50% ethanol. Ang tatlong patak ng picric acid ay idinagdag sa halo, na kumikilos bilang isang mordant.
Pagkatapos ito ay inalis ang tubig sa pamamagitan ng pagdaan muli sa mga tray ng alkohol, ngunit sa oras na ito sa isang pataas na paraan. Sa wakas, ito ay hugasan ng xylol at ang sample ay inihanda sa balsamo ng Canada na sundin.
Pagkalasing
Sa kabutihang palad, ang safranin ay isang pangulay na hindi kumakatawan sa isang panganib para sa mga humahawak nito. Ito ay isang hindi nakakapinsalang kulay, hindi ito carcinogenic at hindi ito nasusunog.
Ang direktang pakikipag-ugnay sa balat o mucosa ay maaaring maging sanhi ng isang bahagyang pamumula sa lugar, nang walang mga pangunahing komplikasyon. Para sa mga ito, inirerekumenda na hugasan ang apektadong lugar na may maraming tubig.
Mga Sanggunian
- García H. Colorante safranina O. Technician sa kalusugan, 2012; 1 (2): 83-85. Magagamit sa: medigraphic.com
- Gil M. Gram stain: pundasyon, materyales, pamamaraan at paggamit. 2019.Magagamit sa: lifeder.com
- Gil M. Spore staining: makatuwiran, pamamaraan at paggamit. 2019.Magagamit sa: lifeder.com
- Safranina. " Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 7 Mar 2017, 10:39 UTC. 3 Aug 2019, 20:49 en.wikipedia.org
- Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Ang kapaki-pakinabang na pamamaraan ng paglamlam sa anatomical interpretasyon ng Gracilariopsis tenuifrons at Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Kumilos ng Bot. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Magagamit sa: scielo.org.
- Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Kaugnayan ng pag-andar ng mga xylem vessel at ang pagkakaroon ng Leifsonia xyli subsp. xyli. Proteksyon ni Rev. Veg. 2007; 22 (1): 65-65. Magagamit sa: scielo.sld
