VOGEL-JOHNSON AGAR: MAKATUWIRAN, PAGHAHANDA, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang agar Vogel-Johnson ay isang solidong daluyan na pumipili at kaugalian na kultura, na espesyal na nabuo para sa paghihiwalay ng Staphylococcus aureus. Ang daluyong ito ay nilikha nina Vogel at Johnson noong 1960 mula sa pagbabago ng tellurite glycine agar na nabuo noong 1955 nina Zebovitz, Evans at Niven.

Ang pagbabago ay binubuo sa pagtaas ng konsentrasyon ng mannitol na naroroon sa daluyan at sa pagsasama ng isang tagapagpahiwatig ng pH. Ang kasalukuyang formula ay binubuo ng triptein, yeast extract, mannitol, dipot potassium phosphate, lithium chloride, glycine, phenol red, agar, 1% potassium tellurite solution, at tubig.

Pinagmulan: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. Flickr.

Dapat pansinin na mayroong iba pang media na, tulad ng Vogel-Johnson agar, ay pumipili para sa paghihiwalay ng S. aureus, tulad ng maalat na mannitol agar at Baird Parker agar. Sa ganitong kahulugan, masasabi na ang pundasyon ng Vogel-Johnson agar ay isang halo sa pagitan ng maalat na mannitol agar at Baird Parker agar.

Sa una, ang mga kolonya ng S. aureus ay nakikilala sa pamamagitan ng pagbuburo sa mannitol at pag-dilaw ang tagapagpahiwatig ng pH. Sa kabilang banda, sa pangalawa, ang S. aureus ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbabawas ng tellurite sa tellurium at bumubuo ng kulay-abo sa mga itim na kolonya. Ang parehong mga pag-aari ay sinusunod sa Vogel-Johnson agar.

Ang daluyan na ito, tulad ng mga katapat nito, ay kapaki-pakinabang para sa pagtuklas ng Staphylococcus aureus sa mga sample ng pagkain, mga kontrol sa sanitary ng mga produktong pang-industriya at sa mga klinikal na sample.

Batayan

Supply ng nutrisyon

Ang Vogel-Johnson medium ay naglalaman ng triptein at yeast extract; Ang parehong sangkap ay nagbibigay ng long-chain amino acid na nagsisilbing mapagkukunan ng carbon at nitrogen na kinakailangan para sa paglaki ng bakterya. Ang bakterya na may kakayahang lumaki sa daluyan na ito ay kukuha ng mga sustansya mula sa mga sangkap na ito.

Pinipiling kapangyarihan

Ang Vogel-Johnson agar ay may kakayahang pigilan ang paglaki ng mga negatibong bakterya ng Gram at kahit na ang ilang mga Gram na positibong bakterya, na pinapaboran ang pagbuo ng coagulase positibong staphylococci. Ang mga nakakapagpigil na sangkap ay potassium tellurite, lithium chloride, at glycine.

Pagkakaiba-iba ng kapangyarihan

Ang mga sangkap na gumagawa ng medium medium na ito ay mannitol at potassium tellurite. Ang Mannitol ay isang karbohidrat, at kapag ito ay naasimulan, ang mga acid ay ginawa na bumaling sa daluyan mula pula hanggang dilaw, na nangyayari salamat sa pagkakaroon ng tagapagpahiwatig ng red phenol pH.

Sapagkat, ang walang kulay na liturista kapag ito ay nabawasan upang malaya ang meturiiko na kwento, ay tumatagal ng isang madilim na kulay-abo sa itim na kulay.

Staphylococcus aureus ferment mannitol at binabawasan ang tellurite sa tellurium. Para sa kadahilanang ito, ang karaniwang mga kolonya ng S. aureus sa daluyan na ito ay kulay abo o itim na napapalibutan ng isang dilaw na daluyan.

Ang mga bakterya na lumalaki sa daluyan na ito at hindi binabawasan ang tellurite o pagbuburo na mannitol ay bubuo ng mga transparent na kolonya na napapaligiran ng isang pulang kulay na daluyan, kahit na mas matindi kaysa sa orihinal na kulay, dahil sa alkalization ng daluyan sa pamamagitan ng paggamit ng mga peptones.

Sa kabilang banda, ang mga bakterya na nagbabawas ng tellurite ngunit hindi mag-ferment mannitol ay lalago bilang kulay-abo o itim na kolonya na napapalibutan ng isang malalim na pulang daluyan.

Kung ang daluyan ay inihanda nang walang pagdaragdag ng potassium tellurite, ang mga colony ng S. aureus ay bubuo bilang dilaw na kolonya, napapaligiran ng dilaw na daluyan, tulad ng maalat na mannitol agar.

Osmotic balanse at solidifying agent

Ang potassium phosphate ay nagpapanatili ng balanse ng osmotic ng daluyan at inaayos ang pH sa neutralidad 7.2. Habang ang agar ay nagbibigay ng solidong pagkakapareho sa medium medium.

Paghahanda

Ang solusyon sa poturituridad sa potassium 1% w / v

Ang solusyon na ito ay hindi kasama sa dehydrated medium, dahil hindi ito maaaring isterilisado sa isang autoclave. Para sa kadahilanang ito ay inihanda nang hiwalay at idinagdag sa na isterilisado na daluyan.

Ang ilang mga komersyal na bahay ay nagbebenta ng handa na gamitin na 1% na solusyon sa potassium tellurite. Kung nais mong maghanda sa laboratoryo, magpatuloy tulad ng sumusunod:

Tumimbang ng 1.0 g ng potassium tellurite at sukatin ang 100 ml ng distilled water. I-dissolve ang potassium tellurite sa isang bahagi ng tubig at pagkatapos makumpleto ang dami ng tubig hanggang sa umabot sa 100 ml. Sterilize ang solusyon sa pamamagitan ng paraan ng pagsasala.

Vogel-Johnson Agar Base Medium

Timbang ng 60 gr ng dehydrated medium, at matunaw sa 1 litro ng distilled water. Ang halo ay pinainit sa isang pigsa upang matulungan ang kumpletong pagkabulok. Sa panahon ng proseso ng paglusaw ang daluyan ay madalas na hinalo.

Sterilize sa autoclave sa 15 pounds pressure at 121 ° C sa loob ng 15 minuto. Alisin mula sa autoclave at hayaan itong magpahinga hanggang sa ang medium ay umabot sa temperatura na humigit-kumulang na 45 hanggang 50 ° C. Magdagdag ng 20 ml ng naunang inihanda na 1% na potassium tellurite solution.

Paghaluin at ibuhos sa sterile pinggan Petri. Payagan na palakasin at mag-order baligtad sa mga may hawak na plato upang mag-imbak sa bandang huli hanggang sa gamitin.

Ang panghuling pH ng handa na daluyan ay dapat na 7.2 ± 0.2.

Bago ang paghahasik ng isang sample, hintaying maabot ang plato sa temperatura ng silid.

Ang kulay ng handa na daluyan ay pula.

Gumamit

Bagaman maaari itong magamit para sa paghihiwalay ng S. aureus sa anumang uri ng mga sample, pangunahing ginagamit ito para sa pagsusuri ng microbiological ng mga produktong parmasyutiko, kosmetiko at pagkain.

Inirerekomenda na ang inoculum ay siksik. Ang seeding ay maaaring gawin sa pamamagitan ng pagmamarka gamit ang isang platinum na hawakan o sa pamamagitan ng ibabaw na may isang Drigalski spatula.

Ang mga plato ay natupok sa 35-37 ° C sa loob ng 24 hanggang 48 na oras na aerobiosis.

QA

Ang sumusunod na mga kontrol ng galaw ay maaaring magamit upang maisagawa ang kalidad ng kontrol sa Vogel-Johnson medium:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Ang inaasahang resulta ay ang mga sumusunod: para sa S. aureus strains growth na kasiya-siya na may itim na kolonya na napapaligiran ng dilaw na daluyan. Para sa S. epidermidis regular na paglaki na may translucent o itim na kolonya na napapalibutan ng pulang daluyan.

Gayundin, inaasahan ang kabuuang pagsasama para sa E. coli, at bahagyang o kabuuang pagsugpo para sa Proteus mirabilis; kung lumalaki ito ay gagawa ito ng napakalaking at ang mga kolonya ay itim na napapalibutan ng isang pulang kulay.

Mga Sanggunian

1. Mga Laboratoryo ng BD. VJ (Vogel at Johnson Agar). 2006.Magagamit sa: bd.com
2. Britannia Laboratories. Vogel- Johnson Agar. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
3. Britannia Laboratories. Potasa tellurite. 2015.Magagamit sa: britania.com
4. Himedia Laboratory. Vogel- Johnson Agar Medium. 2018.Magagamit sa: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. Vogel- Johnson Agar Base. Manwal ng Mikrobiolohiya ng Merck. Ika-12 Edition, pp 502-503. Magagamit sa: Mga Gumagamit / Koponan / Mga Pag-download
6. Ang mga nag-ambag ng Wikipédia, "Ágar Vogel Jonhson", Wikipédia isang ensiklopedya libre, magagamit sa: wikipedia.org.
7. Pamantayang Pangunahing Tipan ng Venezuelan 1292-89. (1989). Mga Pagkain. Paghiwalay at enumeration ng Staphylococcus aureus. Magagamit sa: sencamer.gob.ve