XANTHOPROTEIN REAKSYON: MAKATUWIRAN, PAMAMARAAN, PAGGAMIT - CHEMISTRY - 2024

Ang reaksyon ng xanthoprotein ay isang pamamaraan ng kemikal na ginamit upang matukoy ang pagkakaroon o kawalan ng mga aromatic amino acid, tulad ng tyrosine at tryptophan, na maaaring maging libre sa form o bumubuo ng mga natutunaw na protina, peptides o polypeptides.

Ginamit din ito upang makita ang mga nakakalason na sangkap sa dugo na naglalaman ng isang pangkat na benzene sa kanilang istraktura. Ang pagsubok na ito ay kilala rin bilang reaksyon ng xanthoprotein Becher.

Positibong reaksyon ng xanthoprotein Pinagmulan: Kinuha mula sa video: https://youtu.be/GzGMbw5w4Wo

Ang reaksyon ng xanthoprotein ay gumagamit ng puro nitric acid, init, at isang neutralizing alkali. Kung ang solusyon ay lumiliko mula sa dilaw hanggang orange hanggang sa pag-neutralize ng reaksyon, ang pagsubok ay itinuturing na positibo. Ang sinusunod na kulay ay dahil sa pagbuo ng mga nitrogenous compound na nagmula sa nitrification ng mga pangkat ng benzene.

Kung ang dami ng kabuuang protina ay kailangang ma-dami, kinakailangan na gumamit ng iba pang mga pamamaraan ng pagpapasiya ng protina, tulad ng Biuret.

Ang reaksyon ng xanthoprotein ay ginagamit pangunahin kapag nasuri ang mga sangkap na hindi alam ang komposisyon ng kemikal. Ang reaksyon na ito ay karaniwang bahagi ng isang hanay ng mga pagsubok na makakatulong na matukoy ang komposisyon ng kemikal ng isang partikular na sangkap o katas. Iyon ang dahilan kung bakit ito ay malawak na ginagamit ng mga mananaliksik.

Sa kabilang banda, ang reaksyon ng Becher xanthoprotein ay ginagamit upang makita ang mga sangkap na phenoliko at indole sa dugo, na posible upang mahulaan ang hitsura ng nephropathy, bago ang iba pang mga ibang kalaunan na mga parameter ay nadagdagan.

Batayan

Ang reaksyon ay karaniwang nakita ang pagkakaroon ng benzene group, kapwa sa mga amino acid, pati na rin sa mga protina at peptides. Ang Nitric acid ay kumikilos sa benzene singsing ng mga amino acid na nagtataglay nito, na bumubuo ng mga phenoliko na nitro compound.

Ang reaksyon ay nangangailangan ng init na isinasagawa, sa pangkalahatan ang isang pag-uunlad ay nabuo na ang ulap ng daluyan, na pinapabagsak ito. Ang pag-ayos ay maaaring maputi o dilaw. Sa wakas, nangangailangan ito ng isang hakbang sa alkalization na pinasisigla ang kulay. Para sa mga ito, ginagamit ang isang batayang tulad ng 40% sodium hydroxide o ammonia.

Ang reaksyon ay isasalin bilang positibo kung ang isang malakas na kulay-dilaw na kulay ay sinusunod sa proseso ng pag-init o madilim na orange kapag ang reaksyon ay alkalize. Ang mga amino acid na nakita nito ay pangunahin ang tyrosine at tryptophan.

Xanthoprotein reaksyon. Pinagmulan: http://esteroisomeras.blogspot.com/2013/06/caracterizacion-de-proteinas.html

Sa kaso ng phenylalanine, bagaman ito ay isang aromatic amino acid, ang benzene nucleus ng amino acid na ito ay mahirap na ma-nitrate sa isang simpleng reaksyon, samakatuwid, ito ay magpapalabas ng isang negatibo o mahina na positibong reaksyon.

Sa pangkalahatan, ang pagsubok ng xanthoprotein ay maaaring pupunan sa pagsubok ng Hopkins-Cole, na ginagamit upang partikular na makilala ang tryptophan. Kung ang pagsusuri sa xanthoprotein ay positibo at ang pagsubok ng Hopkins-Cole ay negatibo, ang pagkakaroon ng tryptophan sa solusyon na iyon ay pinasiyahan, na tumuturo sa presensya ng pangunahin ng tyrosine. Gayundin, maaari rin itong mapunan sa reaksyon ng Millon para sa pagtuklas ng tyrosine, bukod sa iba pang mga bagay.

Ang reaksyon na ito ay maaari ring magamit sa mga halimbawa ng dugo, plasma o desalbuminated serum para sa pagsusuri ng uremia o pagkabigo sa bato. Sa kasong ito, ang hinahangad ay ang pagtuklas ng mga nakakalason na sangkap (phenolic at indole) na ginawa mula sa paglalagay ng bituka.

Ang mga sangkap na ito ay may pangkat na benzene at samakatuwid ay nagbibigay ng positibong reaksyon ng xanthoprotein, kahit na ang reaksyon ng sangkap ay hindi isang amino acid o isang protina.

Proseso

- Xanthoprotein reaksyon para sa pagtuklas ng mga amino acid na may mga aromatic na grupo

Ilagay ang 1 ml ng sample sample sa isang malinis at dry tube ng pagsubok.

-Add ng 0.5 ml ng puro nitrik acid.

-Suriin ang halo sa isang paliguan ng tubig sa 70 ° C sa loob ng 2 minuto. Dati’y ihanda ang paliguan ng tubig sa nabanggit na temperatura.

-Nang alisin ang tubo mula sa paliguan ng tubig posible na obserbahan na ang solusyon ay naka milky at kinuha sa isang tiyak na madilaw-dilaw na kulay.

-Ang solusyon ay pinalamig sa pamamagitan ng pagbagsak ng malamig na tubig sa base ng tubo.

-Ang paghahanda ay ginawa alkalina sa pamamagitan ng dahan-dahang pagdaragdag (pagbagsak sa pamamagitan ng pagbagsak) isang 40% na solusyon ng sodium hydroxide hanggang sa may pagbabago ng kulay.

-Kung positibo ang pagsubok, isang madilim na orange na singsing ang bubuo sa interface ng mga likido.

-Kung negatibo ang reaksyon, walang magiging pagbuo ng kulay.

- Xanthoprotein reaksyon upang makita ang mga hindi pangkaraniwang bagay at indole na sangkap sa dugo

-Dispense 5 cc ng 20% ​​trichloroacetic acid sa 5 cc ng venous blood, plasma o suwero, na ang huli ang pinaka ipinahiwatig. Paghaluin nang mabuti at i-filter.

Kumuha ng 2 ml ng pagsasala at ihalo ito sa 0.5 ml ng nitric acid. Pagkatapos ay pinainit sa kumukulo, para dito ang tubo ay inilalagay nang direkta sa mas magaan na siga sa loob ng 30 segundo. Ito ay pinalamig ng tubig at 1.5 ng 33% sosa klorido ay idinagdag.

Ito ay binibigyang kahulugan bilang mga sumusunod:

-Negatibong resulta: madilaw-dilaw na kulay.

-Positive (+) lemon dilaw na resulta.

- (++) gintong dilaw.

- (+++) madilim na dilaw hanggang kayumanggi

Maaari rin itong ma-kahulugan gamit ang isang referral na Autenrieth colorimetric scale, na binubuo ng iba't ibang mga konsentrasyon ng potassium dichromate. Inihanda ito sa 10 sa 10 mga dilum mula sa isang 0.03874% na solusyon sa stock. Ang bawat tubo ay kumakatawan sa isang porsyento.

Mga antas ng interpretasyon

Mayroong dalawang mga antas ng interpretasyon na tinatawag na sinaunang at moderno. Ang mga normal na halaga ay:

Matandang talahanayan: sa pagitan ng 75 hanggang 85%

Mga modernong talahanayan: sa pagitan ng 15 hanggang 25%

Kung ang kulay ng test tube ay nasa gitna ng dalawang karaniwang mga tubo, isang average ay ginawa sa pagitan ng dalawang mga sukat.

Ang pamantayang solusyon ng potassium dichromate ay inihanda tulad ng sumusunod: 7.9 ml ng 10 N potassium dichromate ay sinusukat at binubuo ng hanggang sa 100 ml sa isang volumetric flask. Sinusundan ang mga panlabas na tulad ng ipinapakita sa talahanayan ng kulay ng Autenrieth colorimetric.

Autenrieth colorimetric table. Pinagmulan: Vásquez A. Xanthoprotein reaksyon. Journal journal ng Espanya. 1949; 35 (5): 326-327. Magagamit sa: Elsevier

Gumamit

Ang paggamit ng reaksyon ng xanthoprotein ay bahagi ng isang hanay ng mga biochemical test na makakatulong upang malaman ang kemikal na komposisyon ng ilang hindi kilalang sangkap. Ang pagsubok na ito ay nag-aambag sa pagsusuri ng kemikal sa pagtuklas ng mga protina na naglalaman ng mga grupo ng benzene sa kanilang istraktura.

Ang reaksyong ito ay malawakang ginagamit ng mga mananaliksik sa iba't ibang pag-aaral ng mga sangkap na interes.

Sa kahulugan na ito, ginamit ito ng Vásquez-Jorge at mga tagasuporta upang siyasatin ang nilalaman ng protina ng mga likido na nakuha mula sa bakawan ng bakawan (Crassostrea rhizophorae).

Gayundin, ang Rojas et al. (2009) ay gumagamit ng isang serye ng mga pagsubok, kabilang ang reaksyong xanthoprotein, upang pag-aralan ang glycomacropeptides sa ricotta whey precipitates.

Sa kabilang banda, ang reaksyon ng Becher xanthoprotein ay binago ng Volhard upang magamit para sa iba pang mga layunin. Sa kasong ito, para sa pagtuklas ng mga phenoliko at indole na mga sangkap na maaaring tumaas nang mas maaga (linggo o buwan) bago ang antas ng urea at tira na nitroheno sa pagtaas ng dugo.

Ang mga nakakalason na basura ay nabuo mula sa paglalagay ng bituka ng pagkain ng bituka.

Ang mga sangkap na ito ay nag-iipon sa dugo kapag hindi sila tinanggal nang tama, samakatuwid, ang isang positibong pagsusuri sa xanthoprotein ay maaaring mahulaan ang maagang pagsisimula ng tama na kabiguan ng tama o isang estado ng uremia.

Depende sa kasidhian ng kulay, maaari mong matukoy kung gaano ito advanced. Sa kasong ito ang pagsusulit ay dami.

Sa mga malulusog na tao ang pagsubok na ito ay nagbibigay ng isang bahagyang dilaw na kulay, na naaayon sa normal na antas ng tryptophan at tyrosine na maaaring nasa dugo.

Samantalang, sa mga pasyente ng bato, ang reaksyon ng xanthoprotein ay malakas na positibo dahil sa pagkakaroon ng mga sumusunod na sangkap: phenol, indole, paracresol, aromatic oxyacids, bukod sa iba pa.

Pag-iingat

Ang pagsubok na ito ay dapat gawin ng mga sinanay na propesyonal. Ang lahat ng mga regulasyon ng biosafety ay dapat isaalang-alang, dahil ang mga reagents na ginamit ay mga kinakaing unti-unti acid at mga base.

Kung sa hindi sinasadya ang ilang mga patak ng nitric acid ay nahuhulog sa balat o sa mga kuko, sila ay magiging dilaw, dahil ang parehong mga istraktura ay naglalaman ng mga protina. Bilang karagdagan, sa balat at mauhog lamad nagiging sanhi ng matinding pagkasunog.

Kung nangyayari ang contact sa balat, dapat sundin ang protocol na dapat hugasan ang lugar kaagad ng sabon at tubig sa loob ng humigit-kumulang 20 minuto.

Kung splashes ito sa mga mata, dapat itong hugasan ng maraming sariwang tubig, sinusubukan na buksan ang mga mata.

Mga Sanggunian

1. "Xanthoprotein reaksyon" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 2 Sep 2019, 17:49 UTC. 21 Oktubre 2019, 20:31 wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge Y, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge Y. Physicalicochemical characterization and protein content of fluid extract of mangrove oyster (Crassostrea rhizophorae). Rev Cubana de Química, 2014; 26 (1): 66-74. Magagamit sa Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. paghihiwalay at pagganap ng GMP sa pamamagitan ng pag-ulan ng whey na may trichloroacetic acid. Cient. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Magagamit sa: ve.scielo.
4. Reaksyon ni Vásquez A. Xanthoprotein. Journal journal ng Espanya. 1949; 35 (5): 326-327. Magagamit sa: Elsevier
5. Gálvez I, Gárate O. Ang reaksyon nina Becher at Andrewes sa operasyon ng ihi. Serbisyo ng Urology ng Ospital ng Espanya. Argentine journal ng urology 395-404