SELENITE SABAW: PUNDASYON, PAGHAHANDA AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2025

Ang selenite ay isang napiling daluyan ng kultura ng likido. Ito ay dinisenyo ni Leifson para sa pagpapayaman ng mga sample kung saan ang pagkakaroon ng enteropathogen bacteria ng genus Salmonella ay pinaghihinalaan.

Ang medium na ito ay sumusunod sa mga kinakailangan ng American Public Health Association (APHA), at samakatuwid ay tinanggap para sa pagsisiyasat ng pagkakaroon ng Salmonella sa mga halimbawa ng mga feces, ihi, likido o solidong pagkain, tubig, bukod sa iba pa.

Selenite sabaw. Pinagmulan: Larawan na kinunan ng may-akda na si MSc. Marielsa gil

Ang komposisyon ng kemikal nito ay pinapaboran ang pagbawi ng mga microorganism at sa pagliko ay pinipigilan ang paglaki ng iba. Pangunahing nakakalason ito sa karamihan ng mga bakterya na kabilang sa Pamilyang Enterobacteriaceae. Gayunpaman, pinapayagan nito ang pagbawi ng mga Shigella strains at hindi pinipigilan ang paglaki ng Pseudomonas at Proteus.

Ito ay binubuo ng anhydrous sodium hydrogen selenite, anhydrous sodium phosphate, peptones, at lactose. Mayroon ding isang variant kung saan idinagdag ang cystine, samakatuwid ang pangalan nito ay selenite-cystine sabaw.

Sa kasalukuyan, ang paggamit ng sabenite-cystine sabaw ay ginustong, dahil ang isang mas mataas na porsyento ng pagbawi sa Salmonella ay nakuha, katumbas ng na sinusunod sa iba pang mga pumipili media para sa parehong layunin, tulad ng sodium tetrathionate sabaw.

Batayan

Ang mga peptones na nilalaman ng sabaw ay nagsisilbing mga nutrisyon para sa tamang pag-unlad ng mga microorganism. Ang mga salmonella strains ay gumagamit ng mga peptones bilang isang mapagkukunan ng nitrogen, bitamina, at amino acid.

Ang lactose ay ang fermentable na karbohidrat, samantalang ang sodium selenite ay ang sangkap na inhibitory na humihinto sa paglaki ng Gram positibong bakterya at karamihan sa mga bakterya na naroroon sa bituka na flora, lalo na ng Pamilyang Enterobacteriaceae. Ang sodium phosphate ay ang buffer na nagpapatatag sa pH ng medium.

Sa kaso ng selenite na sabaw na variant na naglalaman ng L-cystine, ang karagdagang tambalang ito ay isang pagbabawas ng ahente na nagpapaliit sa pagkakalason ng selenite, na pinatataas ang pagbawi ng Salmonella.

Paghahanda

-Selenite sabaw

Kung mayroon kang mga sangkap ng halo, maaari mong timbangin:

4 g ng anhydrous sodium hydrogen selenite.

10 g ng anhydrous sodium phosphate.

5 g ng mga peptones.

4 gramo ng lactose.

Iwaksi ang mga compound sa 1 litro ng sterile distilled water. Maaari itong maiinit nang bahagya upang matunaw nang lubusan.

Ang ilang mga laboratories ay naglalantad ng daluyan ng 10 minuto sa matatas na singaw upang isterilisado ito, dahil hindi ito dapat mai-autoclaved. Kung ang daluyan ay isterilisado, maaari itong maimbak sa ref hanggang magamit.

Maaari rin itong ihanda nonsterile at ihahatid ng direktang 10 hanggang 15 ml sa sterile test tubes.

Sa kasong ito dapat itong iwanan upang magpahinga at gamitin kaagad. Tulad ng medium ay hindi sterile hindi ito maiimbak sa isang ref para magamit sa ibang pagkakataon.

- Paghahanda ng kapaligiran sa komersyal

Kung magagamit ang komersyal na daluyan, timbangin ang 23 g ng dehydrated medium at matunaw ito sa isang litro ng sterile distilled water. Mainit saglit upang matapos na matunaw. Huwag mag-autoclave. Aseptically maghatid ng 10 o 15 ml sa mga sterile test tubes.

Ang pangwakas na pH ng daluyan ay dapat na 7.0 ± 0.2.

Dapat pansinin na ang kulay ng dehydrated medium ay beige at ang paghahanda ay magaan at translucent amber.

Ang selenite-cystine sabaw na variant

Naglalaman ito ng parehong mga compound tulad ng selenite na sabaw, ngunit idinagdag ang 10 mg ng cystine. Ang natitirang pamamaraan ay eksaktong kapareho ng inilarawan sa itaas.

Aplikasyon

Ang daluyan na ito ay espesyal na gagamitin sa mga pag-aaral ng epidemiological, sa mga kaso kung saan ang sakit ay wala sa talamak na yugto nito, mga pasyente ng asymptomatic o malulusog na tagadala.

Ang paghihiwalay ng genus na Salmonella sa pangkalahatan ay mahirap, dahil ang mga ito ay karaniwang hindi lamang kontaminadong mga sample. Ang pagiging sa maliit na dami, madaling overlap sa pamamagitan ng paglaki ng iba pang mga bakterya genera na matatagpuan sa mas maraming dami.

Sa kabilang banda, ang hilaw na materyal na kung saan ang mga naproseso na pagkain ay madalas na nakalantad sa mga proseso ng init, pag-aalis ng tubig, paggamit ng mga disimpektante, radiation at preservatives, bukod sa iba pa.

Samakatuwid, ang Salmonellas na naroroon sa hilaw na materyal ay napinsala sa pamamagitan ng pagpapasakop sa produkto sa nabanggit na mga pang-industriya na proseso. Gayundin, sa kaso ng mga klinikal na sample tulad ng feces, ang mga galaw ay maaaring mahina kung nagmula ito sa mga pasyente na na-tratuhin ng antibiotics.

Samakatuwid, ang anumang sample na kung saan ang pagkakaroon ng Salmonella ay pinaghihinalaang ay dapat na pre-enriched sa lactose sabaw, at pagkatapos ay pinayaman sa selenite sabaw upang mai-optimize ang pagbawi nito sa mga pumipili media, tulad ng SS agar, xylose agar, lysine deoxycholate (XLD ), enteric Hektoen agar (HE) at maliwanag na berdeng agar, bukod sa iba pa.

Sown

Para sa mga sample ng dumi ay kumuha ng 1 g ng sample at suspindihin sa isang tubo na may 10 hanggang 15 ml ng selenite na sabaw. Kung ang mga dumi ay likido, kumuha ng 1 ml at suspindihin ang sabaw. Para sa mga rectal swab, i-discharge ang swab material sa sabaw.

Sa mga solidong sample ng pagkain ay kumuha ng 1 gr at suspindihin sa selenite na sabaw.

Sa mga likidong pagkain ihalo sa pantay na mga bahagi na may selenite na sabaw sa dobleng konsentrasyon.

Para sa mga sample ng ihi, centrifuge, itapon ang supernatant, kunin ang lahat ng sediment at suspindihin ito sa selenite na sabaw.

Ang mga sabaw ay natutuyo sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras ng pagpapapisa ng itlog. Ang paglaki ng bakterya ay napatunayan sa pamamagitan ng kaguluhan. Ang isang karagdagang tubo bawat sample ay maaari ring isama para sa pagpapapisa ng itlog sa 42 ° C. Kasunod nito, ang seeding selective solid media mula sa selenite na sabaw.

QA

Upang makontrol ang sterility, ang isang selenit na sabaw mula sa bawat hindi nakaayos na batch ay natupok sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras. Inaasahan na walang kaguluhan o pagbabago ng kulay ng medium.

Ang mga kilalang pilay ay maaaring magamit upang makontrol ang tamang paggana ng daluyan, tulad ng:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 at Proteus mirabilis ATCC 43071.

Ang inaasahang resulta ay:

• Para sa unang tatlong bakterya na bakterya, ang kasiyahan ay dapat na kasiya-siya.
• Para sa Escherichia coli bahagyang pagsugpo.
• Para sa Proteus katamtaman na paglaki.

Mga Limitasyon

Ang Selenite sabaw daluyan ay nakakalason sa balat ng tao, samakatuwid ang direktang pakikipag-ugnay ay dapat iwasan.

Mga Sanggunian

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. Paghahambing sa pagitan ng media ng kultura ng sodium selenite at sodium tetrathionate, na parehong natubuan sa 37 ° C at 42 ° C para sa ang paghihiwalay ng Salmonella spp mula sa mga feces ng mga tagadala. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Britannia Laboratories. Selenito Broth. 2015.Magagamit sa: britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Selenite sabaw. Magagamit sa: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Microbiological na paghihiwalay ng Salmonella spp. at mga molekular na tool para sa pagtuklas nito. Kalusugan, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Magagamit mula sa: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.