KATAMTAMANG SIM: PUNDASYON, PAGHAHANDA AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2026

Ang SIM medium ay isang semisolid at kaugalian agar, na espesyal na idinisenyo upang matukoy ang ilang mga bakterya, lalo na ang Enterobacteriaceae. Ito ay binubuo ng triptein, peptone, iron sulfate, ammonium sulfate, sodium thiosulfate, at agar.

Pinapayagan ng daluyong ito ang pagpapatupad ng tatlong mahahalagang pagsubok: ang paggawa ng hydrogen sulfide (H ₂ S), ang pagbuo ng indole at motility, samakatuwid ang acronym SIM ay nagmula. Dahil sa mahusay na utility nito, hindi ito maaaring lumiban sa isang laboratoryo na bacteriology.

A. Daluyan ng Komersyal na SIM B. SIM H2S (-), Indole (-) at Motility (+) Pagsubok at SIM H2S (+), Indole (-), Pagganyak (+) Pagsubok. Pinagmulan: A. Larawan na kinunan ng may-akda na si MSc. Marielsa Gil B. Mfloayza

Hindi tulad ng iba pang media, dapat itong semi-solid upang ang kakayahang kilusan ng ilang mga bakterya ay makikita. Sa kahulugan na ito, ang pagsubok na ito ay gumagana nang maayos para sa Enterobacteriaceae, ngunit hindi sa hindi pagbuburo ng mga negatibong rod ng Gram, kung saan ito ay ginustong gumamit ng iba pang mga pamamaraan, tulad ng hanging drop.

Pinapayagan ng SIM medium na makilala ang ilang mga tiyak na katangian na nagpapakilala sa ilang mga bakterya na may kaugnayan sa iba. Halimbawa ang Escherichia coli ay nakikilala sa pamamagitan ng pagiging H ₂ S (-), Indole (+) at motility (+), habang ang Proteus mirabilis ay H ₂ S (+), indole (-), motility (+).

Batayan

Ito ay isang medium medium na itinuturing na pagkakaiba-iba, dahil ang paggamit nito ay nakikilala sa pagitan ng mga microorganism na may kakayahang gumawa ng hydrogen sulfide mula sa mga hindi; ipinapakita din nito ang mga bumubuo sa indole mula sa tryptophan mula sa mga hindi, at sa wakas ay naiiba ang mga motibo na bakterya mula sa mga hindi nagagalaw.

Pinagkukunan ng lakas

Tulad ng anumang kultura medium, mayroon itong mga elemento na nagbibigay ng mga kinakailangang nutrisyon upang ang mga hindi hinihingi na mga microorganism ay maaaring umunlad. Ang mga elementong ito ay kinakatawan ng mga peptones at triptein.

Ang pagbuo ng microorganism sa medium ay mahalaga upang ma-obserbahan ang pagkakaroon o kawalan ng mga katangian na sinusuri ng daluyan na ito.

Produksyon ng hydrogen sulfide

Ang titik S ng acronym SIM ay tumutukoy sa paggawa ng hydrogen sulfide (H ₂ S). Ang bakterya na may kakayahang bumubuo ng hydrogen sulfide ay aabutin ang asupre mula sa sodium thiosulfate.

Kapag nabuo ang H ₂ S -colourless gas-, gumanti ito kasama ang iron salt na nasa medium, na bumubuo ng ferrous sulfide, malinaw na nakikita (itim na pag-urong). Ang mga bakterya na hindi bumubuo ng H ₂ S, iwanan ang daluyan ng orihinal na kulay (beige).

Ang pagkakaroon ng itim na pag-ayos ay maaaring hadlangan ang interpretasyon ng motility. Gayunpaman, ang karamihan sa H ₂ S- paggawa ng Enterobacteriaceae ay kilala na positibong motile, tulad ng Salmonella, Proteus, at Citrobacter. Bukod dito, ang itim na pag-ulan na sumasaklaw sa halos buong daluyan ay nagmumungkahi ng positibong motility.

Pagbubuo ng Indole

Ang pangalawang liham ng acronym SIM ay "I", na kumakatawan sa pagbuo ng indole.

Sa kahulugan na ito, ang triptein, bilang karagdagan sa pagiging isang mapagkukunan ng nutrisyon, ay nagtutupad ng isa pang pangunahing pag-andar. Ang peptone na ito ay mayaman sa isang amino acid na tinatawag na tryptophan, samakatuwid, maaari itong magpakita ng bakterya na gumagawa ng tryptophanase.

Ang enzyme na ito ay responsable para sa pag-alis ng amino acid tryptophan, na may kahihinatnan na pagbuo ng indole (walang kulay na sangkap), pyruvic acid at ammonium.

Iyon ang dahilan kung bakit, upang ipakita ang reaksyon na ito, kinakailangan upang magdagdag ng isang naglalantad na sangkap (ang reagent ni Ehrlich o ang reagent ni Kovac). Alinman sa mga reaksyon sa indole, na bumubuo ng isang pulang-fuchsia na singsing na hugis na sangkap sa ibabaw ng agar. Kung lumilitaw ang singsing ng fuchsia, ang indole test ay binibigyang kahulugan bilang positibo.

Ang bakterya na hindi nagtataglay ng enzyme na ito ay hindi bubuo ng singsing at ito ay binibigyang kahulugan bilang isang negatibong pagsubok sa indole.

Mahalagang tandaan na ang indole test ay dapat na huli na ma-kahulugan, dahil sa sandaling idinagdag ang reagent, ang daluyan ay maulap, na ginagawang mahirap na mailarawan ang motility.

Kakayahan

Sa wakas ang titik na "M" ng salitang SIM ay nangangahulugang motility. Upang masuri ang paggalaw, ang daluyan na ito ay madiskarteng semi-solid, dahil ang katangian na ito ay mahalaga upang ma-obserbahan kung may bakterya na kilusan. Ang mga bakterya na nagtataglay ng flagella ay ang mga nagbibigay ng positibong pagsubok na ito.

Ang isang positibong pagsubok ay makikita kapag ang pagkagulo ay sinusunod, kapwa sa paunang inoculum, at sa paligid nito. Samantalang, ang mga bakteryang nonmotile ay bubuo lamang sa landas ng paunang inoculum.

Paghahanda

Medium SIM

Tumimbang ng 30 g ng dehydrated medium at matunaw sa isang litro ng distilled water. Ang halo ay naiwan upang tumayo ng 5 minuto at pagkatapos ay pinainit sa kumukulo, pagpapakilos nang madalas hanggang sa ganap na matunaw.

Ipamahagi ang halo sa mga tubo ng pagsubok na may mga cotton cap at autoclave sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto. Alisin ang rack ng tubo mula sa autoclave at payagan na matatag sa isang patayong posisyon, upang ang daluyan ay nasa hugis ng isang bloke.

Para sa pag-iingat nito ay pinananatili ito sa ref hanggang sa paggamit nito. Ang handa na daluyan ay dapat magkaroon ng isang panghuling pH na 7.3 ± 0.2.

Sa oras ng pag-inoculate ng daluyan, dapat itong nasa temperatura ng silid. Ang gitnang kulay ay murang kayumanggi.

Reakent ni Kovac

Sukatin ang 150 ml ng amyl o isoamyl o butyl alkohol. (Gumamit ng isa sa tatlong nabanggit).

Dissolve 10 g ng p-dimethylaminobenzaldehyde. Pagkatapos ay dahan-dahang magdagdag ng 50 ML ng puro hydrochloric acid.

Ang handa na gamitin na reagent ay walang kulay o magaan na dilaw. Dapat itong itago sa isang bote ng amber at maiimbak sa isang ref. Huwag gamitin kung lumiliko ito ng madilim na kayumanggi; na nagpapahiwatig na ito ay nasira. Ang reagent na ito ay ginustong pagdating sa Enterobacteriaceae.

Reagent ni Erlich

Tumimbang ng 2 g ng p-dimethylaminobenzaldehyde at matunaw noong 190 ML ng ganap na ethyl alkohol at ihalo nang dahan-dahan sa 40 ml ng puro hydrochloric acid. Mag-imbak sa parehong paraan ng reaksyon ni Kovac. Ang reagent ni Ehrlich ay ginagamit ng karamihan para sa hindi pagbuburo at anaerobic bacteria.

Aplikasyon

Ang SIM medium ay lubos na ginagamit sa mga laboratoryo ng bacteriology. Ang kalamangan nito ay ang tatlong mahahalagang katangian ay maaaring sundin sa parehong tubo sa pagkilala ng Enterobacteriaceae.

Sown

Ang tamang paraan upang maghasik ng daluyong ito ay ang paggamit ng karayom, na kung saan ang isang bahagi ng purong kolonya na mapag-aralan ay kinuha at ipinasok nang patayo sa gitna ng daluyan. Ang isang solong lungon ay dapat gawin. Ang pagbutas ay hindi dapat maabot ang ilalim ng tubo, ang tamang bagay ay upang masakop lamang ang dalawang thirds ng lalim.

Ang pag-uulit ng inoculum ay hindi inirerekomenda, dahil ito ay maaaring humantong sa mga maling interpretasyon ng positibong motility. Ang inoculated medium ay incubated aerobically sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras.

Sa sandaling natapos na ang oras, sinusunod kung mayroon man ang produksiyon ng H ₂ S at nabasa ang motility. Sa wakas ang indole ay isiniwalat, pagdaragdag ng 3 hanggang 4 na patak ng reaktor ng Ehrlich o Kovac, ihalo nang malumanay at bigyang kahulugan.

Pinagmulan: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.

QA

Bilang isang kontrol sa pag-iilaw, isa o dalawang tubes ay natutuyo nang walang inoculation sa isang oven sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras. Inaasahan na pagkatapos ng oras na ito walang paglago o pagbabago ng kulay.

Bilang kontrol sa kalidad, ang mga kilalang sertipikadong mga galaw ay maaaring magamit, tulad ng: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

Ang inaasahang mga resulta ay: Escherichia coli H ₂ S negatibo, indole at positibong motility, ang Enterobacter aerogenes lamang ang positibong motility, Salmonella typhimurium H ₂ S at positibong motility, na may negatibong indole. Ang lahat ng positibo sa proteus vulgaris, habang ang Klebsiella pneumoniae at Shigella ay lahat ay negatibo.

Mga Limitasyon

-Ang ilang mga strain ng Morganella morganii, bukod sa iba pang mga strain, ay maaaring makagawa ng isang brownish na pigment sa daluyan na ito dahil sa paggawa ng melanin, hindi ito dapat malito sa pag-unlad ng ferrous sulfide. Sa mga walang karanasan na propesyonal ang sitwasyong ito ay maaaring makabuo ng mga maling positibo sa interpretasyon ng pagsusulit H ₂ S.

-Strict aerobic bacteria ay lalago lamang sa ibabaw ng tubo, na ginagawang mahirap bigyang-kahulugan ang pagkilos.

Mga Sanggunian

1. Mga Laboratoryo ng BD. Medium ng BBL SIM. 2008. Magagamit sa: bd.com
2. Neogen Laboratories. SIM Medium. Magagamit sa: foodafety
3. Difco Francisco Soria Melguizo. SIM Medium. 2009.Magagamit sa: http://f-soria.es
4. Brizuela-Lab Laboratory. Medium SIM. Magagamit sa: .brizuela-lab.com
5. Britannia Laboratories. Medium SIM. 2015.Magagamit sa: studyres.es/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.