- Batayan
- Mga katangian ng paraan ng transportasyon
- Paghahanda
- Semi-solid Stuart medium na may tagapagpahiwatig ng redox
- Paghahanda sa bahay
- Mga sangkap
- Paghahanda gamit ang komersyal na daluyan
- Ang Modified Stuart Medium (gawang bahay)
- Aplikasyon
- Pagkilala ng sample sa paraan ng transportasyon
- QA
- Mga Limitasyon
- Mga Sanggunian
Ang medium Stuart ay isang semisolid agar o sabaw na walang mga nutrisyon, na ginagamit para sa transportasyon ng mga biological sample. Ang layunin nito ay upang mapanatili ang mga pilay sa sample na mabubuhay sa isang tiyak na oras, ngunit nang walang pagtaas ng populasyon ng microbial.
Ito ay nilikha ni Moffet, Young, at Stuart noong 1948 at kalaunan ay binago ng Toshach at Patsula. Binubuo ito ng sodium glycerophosphate, sodium thioglycolate, calcium chloride at agar-agar. Ang huli ay naroroon sa semi-solid medium at wala sa likido. Ang ilang mga laboratoryo ay nagdaragdag ng methylene na asul dito.
Culturette na may transportasyong Stuart. Pinagmulan: Ni: CDC / Dr. Gilda Jones, Kagandahang-loob: Public Library Image Library
Karaniwang ginagamit ang mga ito kapag hindi posible na maghasik agad ng sample. Sa kasong ito, ang sample ay inilalagay sa transport medium, habang inililipat ito sa laboratoryo na magpoproseso ng kultura.
Sa ganitong paraan, ginagarantiyahan na ang mga microorganism na naroroon ay nananatiling buhay hanggang sila ay inoculated sa kaukulang media media.
Sa una, ang paggamit nito ay inilaan upang magdala ng mga sample ng urethral o vaginal kung saan pinaghihinalaang ang pagkakaroon ng Neisseria gonorrhoeae. Nang maglaon, napagtanto nila na ang pagiging kapaki-pakinabang nito ay maaaring maging mas malawak.
Ang Stuart medium ay naging napakahusay sa pagpapanatili ng labile at mabilis na mga mikroorganismo tulad ng Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, at iba pa. Bilang karagdagan sa iba pang mga hindi nakakainis na microorganism tulad ng Enterobacteria.
Ang Stuart medium na talaga ay pinipigilan ang desiccation ng sample, pinapanatili ang balanse ng osmotic at pinapanatili ang mga microorganism sa isang perpektong pH. Sa kabilang banda, madiskarteng ang daluyan na ito ay hindi naglalaman ng mga sustansya, sa gayon pinipigilan ang mga microorganism mula sa pagdami.
Sa merkado mayroong mga espesyal na mga aparato ng halimbawang transportasyon na naglalaman nito o iba pang paraan ng transportasyon, na tinatawag na kulto. Maaari rin silang maghanda sa laboratoryo.
Batayan
Ang layunin ng mode na transportasyon ng Stuart ay upang mapanatili ang mga sample bilang malapit sa kanilang orihinal na kondisyon hanggang sa maiproseso ang mga ito.
Ang sodium glycerophosphate at calcium chloride ay isang sistema ng buffer na gumagana sa pamamagitan ng pagpapanatili ng pH at osmolarity.
Samantala, ang sodium thioglycollate ay kumikilos bilang isang pagbabawas ng ahente at sa kaso ng naglalaman ng agar, binibigyan ito ng isang pagkakapare-pareho ng semisolid, upang maantala ang oxygenation ng medium. Sa wakas, ang asul na methylene ay isang tagapagpahiwatig ng oksihenasyon, iyon ay, nakita nito ang pagkakaroon ng oxygen.
Ang semi-solid medium na may tagapagpahiwatig ng redox ay mainam para sa paglipat ng mga sample kung saan ang pagkakaroon ng anaerobic bacteria ay pinaghihinalaan.
Mga katangian ng paraan ng transportasyon
Ang daluyan ng Stuart, tulad ng lahat ng paraan ng transportasyon, nakakatugon sa ilang mga katangian, kabilang ang:
-Magbibigay ng mabubuhay na mikrobyo na mga galastong naroroon nang hindi dumarami
-Hindi naglalaman ng mga nutrisyon; Ang mga compound nito ay naglalayong mapanatili ang sample na hydrated, sa ilalim ng sapat na mga kondisyon ng pH at osmolarity.
-Nagpapakita ng autolyzate ng ilang mga pinong microorganism, tulad ng Pneumococcus.
-Ang paggamit ay pansamantala, hindi ito dapat matagal nang masyadong mahaba.
Paghahanda
Semi-solid Stuart medium na may tagapagpahiwatig ng redox
Paghahanda sa bahay
Mga sangkap
Sodium glycerophosphate 10 gr
Sodium thioglycollate 1.0 gr
Kaltsyum klorido 0.1 gr
Methylene asul na 0.002 gr
Agar-agar 3 gr
Natunaw na tubig 1 L
Paghaluin ang mga sangkap at init hanggang sa ganap na matunaw. Ibuhos sa mga tubo o mga espesyal na pamunas. Ipinakilala ang mga ito sa autoclave at isterilisado sa 121ºC sa loob ng 15 minuto. Hayaan ang mga tubo na cool sa isang patayong posisyon (sa hugis ng isang bloke). Manatili sa temperatura ng silid.
Paghahanda gamit ang komersyal na daluyan
Tumimbang ng 14.1 g ng daluyan sa 1 litro ng distilled water. Kadalasang nanginginig ang init hanggang sa ganap na matunaw, maaari itong pinakuluan. Ang natitirang bahagi ng pamamaraan tulad ng inilarawan.
Ang dehydrated medium ay may kulay na cream at handa dapat maging asul sa ibabaw nito. Ito ay dahil sa pagkakaroon ng asul na methylene.
Ang pH ng daluyan ay dapat na nababagay sa 7.4 ± 0.2
Ang Modified Stuart Medium (gawang bahay)
Mga sangkap
Sodium glycerophosphate 10 gr
Sodium thioglycollate 1 gr
Kaltsyum klorido dihydrate 0.1 gr
Natunaw na tubig 1000 ml
Ito ay may parehong sangkap tulad ng semi-solid, ngunit wala itong agar, o asul na methylene. Sa kasong ito, ang mga sangkap ay halo-halong walang pag-init at ang 0.5 ml ay ipinamamahagi sa mga 16 x 125 mm na tubo na may mga takip ng tornilyo.
Ito ay isterilisado sa isang autoclave sa 121 ° C sa loob ng 10 minuto. Para sa sampling, dapat gamitin ang mga dacron swabs kung ang sample ay para sa PCR o rayon kung ito ay para sa kultura.
Ang mga tubo ay nakaimbak sa temperatura ng silid.
Aplikasyon
Komersyal na mayroong mga espesyal na sample na aparato sa transportasyon na tinatawag na kultura ng kultura; Ang aparatong ito ay isang pinahabang, manipis na tubo na may swab sa loob at sa dulo mayroong isang segment na naglalaman ng semi-solid o likidong Stuart medium.
Binuksan ang aparato at ang sample ay kinuha gamit ang pamunas. Pagkatapos ay ipinakilala ito pabalik sa tubo hanggang sa dulo ng swab ay ipinasok sa semi-solid medium ng transportasyon; ang ilan ay nagdadala ng isang polyurethane sponge na pinapagbinhi ng likidong Stuart medium, na kung saan ang sample ay mapangalagaan ng basa.
Sa kaso na ang pagkakaroon ng mga pinong microorganism ay pinaghihinalaang, ang mga cotton swabs na may charcoal ay dapat gamitin upang mangolekta ng sample.
Ang mga halimbawang maaaring makuha gamit ang pamunas o pamunas at inilipat sa daluyan na ito ay mga exudates ng pharyngeal, rectal swabs, at iba't ibang mga pagtatago, kabilang ang: vaginal, urethral, sugat, ocular, tainga, at abscess.
Sa panahon ng paglipat ng sample sa transport medium sa laboratoryo, ang pagsasailalim ng daluyan sa matinding mga kondisyon sa kapaligiran (masyadong malamig o masyadong mainit) ay dapat iwasan. Ang mga biglaang pagbabago sa presyon ng atmospera ay dapat ding iwasan.
Ang oras kung saan ang medium ay may kakayahang mapanatili ang isang microorganism na mabubuhay ay depende sa pilay na pinag-uusapan. Halimbawa, para sa mga microorganism ng genus Neisserias at Haemophilus, maaari silang manatiling mabubuhay hanggang sa 24 na oras, ngunit ang mga strain tulad ng Salmonella o Shigella ay maaaring tumagal ng mga araw at kahit na linggo.
Kung tinatantya na ang pagproseso ng sample ay maaaring tumagal ng higit sa 4 na araw, mas mainam na i-freeze ang sample sa -70 ° C.
Pagkilala ng sample sa paraan ng transportasyon
Ang inihanda na paraan ng transportasyon o ang komersyal na kultura ay dapat magkaroon ng isang label kung saan mailalagay ang sumusunod na impormasyon:
Ang una at huling pangalan ng pasyente: maiiwasan ang pagkalito sa halimbawang.
Numero ng pagkakakilanlan: maginhawa upang mapanatili ang isang order sa trabaho.
Halimbawang pinagmulan ng koleksyon: tumutulong sa bacteriologist na pumili ng naaangkop na media media.
Papasok na doktor: Minsan kinakailangan para sa mga posibleng konsulta.
Petsa at oras ng koleksyon ng sample: kinakailangan para sa pagtanggap o pagtanggi ng sample ayon sa oras na lumipas sa pagitan ng koleksyon ng sample at pagtanggap sa laboratoryo.
Ang iba pang impormasyon na magiging kapaki-pakinabang upang mailakip ay:
Ang presumptive diagnosis: gagabay sa pagdaragdag ng mga espesyal na media ng media ayon sa pinaghihinalaang diagnosis.
Paggamot sa antibiotics: kapaki-pakinabang na maging isang karagdagan sa antibiogram.
Ang lahat ng impormasyong ito ay mahalaga upang matiyak ang tamang pagproseso ng sample.
QA
Upang masuri ang pagganap ng daluyan ng Stuart, ang kilalang mga galaw ay maaaring maiinip at itago sa 25 ° C, tulad ng: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
Sa lahat ng mga kaso inaasahan na mabawi ang microorganism na pinag-uusapan, na napreserba sa loob ng 24 na oras.
Sa kabilang banda, ang iba pang mga galaw ay maaaring magamit tulad ng: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 at Escherichia coli ATCC 11775.
Sa lahat ng mga kaso, ang masaganang pagbawi ay inaasahan ng hanggang sa 96 na oras.
Mga Limitasyon
Siniguro ng ilang mga pag-aaral na ang glycerophosphate na naroroon sa Stuart medium ay maaaring ma-metabolize ng ilang mga coliforms, bukod sa iba pang mga Gram na negatibong bakterya, at samakatuwid ay dumami sa daluyan na ito.
Ang panganib na ito ay nagdaragdag ng mas mahaba ang pagproseso ng sample ay naantala. Gayundin, ang pagkakalantad ng Stuart medium sa mataas na temperatura sa panahon ng transportasyon ay nakakaimpluwensya sa ito.
Mga Sanggunian
- "Katamtaman ng transportasyon (microbiology)." Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 13 Abr 2018, 10:36 UTC. Abr 1, 2019.Ang magagamit sa: es.wikipedia.org
- Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart Transportasyon. Magagamit sa: Magagamit sa: Medioscultivo.com
- LabLisan. Ang paraan ni Stuart ng transportasyon. Magagamit sa: lablinsan.cl
- Pang-agham MDM. Ang mga bentahe ng pagkakaroon ng Stuart microbiological transport medium. Magagamit sa: mdmcientifica.com
- Mga Laboratoryo ng Metrix. Stuart. 2017.Magagamit sa: metrixlab.mx
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.