COAGULASE TEST: MAKATUWIRAN, PAMAMARAAN, AT PAGGAMIT - BIOLOGY - 2026

Ang coagulase test ay isang pamamaraan sa laboratoryo na ginamit upang maihayag ang pagkakaroon ng coagulase ng enzyme. Ang enzyme na ito ay may pag-aari ng coagulate plasma. Loeb noong 1903 ang una na naglalarawan ng enzyme na ito.

Ang pagsusulit na ito ay isinasagawa sa Gram-positibo, catalase-positive cocci, na nagpapahintulot upang makilala ang Staphylococcus aureus strains mula sa natitirang bahagi ng staphylococci, dahil ito ay ang tanging microorganism ng klinikal na kahalagahan na gumagawa nito.

Ang parehong mga imahe ay nagpapakita ng isang positibong Pagsubok sa Coagulase. Pinagmulan: Kaliwa imahe: Philippinjl. Tamang imahe: Larawan na kinunan ng may-akda na MSc. Marielsa Gil.

Sa kahulugan na ito, ang mga miyembro ng Pamilyang Staphylococaceae na negatibo sa pagsubok ay madalas na tinutukoy bilang coagulase negatibong Staphylococcus.

Mayroong ilang mga maliban sa S. aureus na maaaring makagawa ng coagulase, tulad ng Staphylococcus schleiferi spp coagulans, S. hyicus, S. intermedius at S. delphini.

Gayunpaman, ang unang tatlo ay may kahalagahan sa klinikal sa antas ng beterinaryo at maaaring bihirang matagpuan bilang isang sanhi ng ahente ng mga impeksyon sa mga tao, habang ang S. delphini ay matatagpuan lamang sa mga kapaligiran sa dagat.

Bukod dito, madali silang natatangi dahil ang S. hyicus at S. intermedius ay hindi nagpapatubig sa mannitol at S. schleiferi spp coagulans ay hindi nagpanglaw ng maltose o trehalose, habang ang S. aureus ay gumagawa ng mga ferry na ito.

Ang pagkakaroon ng coagulase enzyme ay naka-link sa birtud ng mga strain. Gayunpaman, ang teoryang ito ay nababagsak, dahil ang iba pang mabulok na coagulase-negatibong species na may kakayahang gumawa ng mga makabuluhang impeksyon ay sinusunod.

Batayan

Pagbibigay kahulugan

Agglutination sa loob ng 5-20 seg (malakas na positibong pagsubok).

Ang pagkakaiba-iba ng pagsasama-sama na nagaganap sa pagitan ng 20 segundo at isang minuto (naantala ang positibong pagsubok).

Ang ilang antas ng pinagsama pagkatapos ng isang minuto (nagdududa na katibayan). Inirerekomenda na ulitin ang pagsubok o kumpirmahin ng paraan ng tubo.

Walang pag-iipon (negatibong pagsubok).

Resulta sa SSF. Dapat itong palaging magbigay ng negatibo, kung nagbibigay ito ng awtomatikong positibo ang resulta ng pagsubok ay hindi wasto.

-Tube coagulase test

materyales

-Sterile test tube

-Plasma

-Bath ni Maria sa 37 ° C.

Teknik

Pipette 0.5 ml ng plasma sa isang 12 x 75 na pagsubok na tubo na may isang sterile pipette.I-load ang platinum loop na may 2 hanggang 4 na purong kolonya upang pag-aralan mula sa isang solidong kultura sa loob ng 18 hanggang 24 na oras at matunaw sa plasma maingat na paghaluin at pag-incubate sa 37 ° C sa loob ng 4 na oras.

Suriin ang tubo sa unang oras nang walang pag-ilog nito, marahan lamang itong ikiling. Kung ang isang clot ay hindi pa nakikita, maaari itong sundin tuwing 30 minuto hanggang sa matapos ang 4 na oras. Kung pagkatapos ng 4 na oras ay negatibo pa rin, maaari itong iwanang hanggang sa 24 na oras ngunit sa temperatura ng kuwarto. Alamin at iulat ang resulta.

Batay sa karanasan, inirerekumenda ng ilang mga microbiologist ang paggamit ng 500 ofl ng isang suspensyon ng bakterya mula sa isang 18-oras na kultura sa likidong daluyan upang maisagawa ang pagsubok.

Lumilitaw na mag-alok ng mas mabilis at mas maaasahang mga resulta kaysa sa pag-emulize ng mga kolonya mula sa solidong media, lalo na kung ginamit ng tao ang plasma mula sa bangko ng dugo.

Ang paggamit ng mga strain mula sa isang sabaw ay nakakatulong upang matunaw ang posibleng pagkakaroon ng mga anti-staphylococcal antibodies sa plasma na maaaring pagbawalan ang pagkilos ng coagulase.

Pagbibigay kahulugan

Kung ang isang clot ay nakikita na sumasaklaw sa lahat ng likido (kumpletong clotting) o namumula na walang anuman sa natitirang likido (bahagyang clotting) dapat itong isaalang-alang na isang positibong pagsubok.

Kung walang nabuo na clot, iyon ay, ang suspensyon ay nananatiling homogenous, negatibo ang pagsubok.

-Coagulase test gamit ang fibrinogen

Ang Fibrinogen ay ginagamit katulad ng plasma at ginagamit para sa parehong mga slide at tube test. Magpatuloy tulad ng inilarawan para sa plasma at bigyang-kahulugan sa parehong paraan.

Gumamit

Ginagamit ito upang makilala ang Staphylococcus aureus mula sa coagulase negatibong staphylococci.

QA

Magkaroon ng mga sariwang kultura ng isang S. aureus strain na magagamit bilang isang positibong kontrol. Ang isang S. epidermidis strain ay magagamit din bilang isang negatibong kontrol.

Mga Limitasyon

-Ang positibong pagsubok ay hindi dapat iwanan sa pagpapapisa ng itlog sa loob ng 24 na oras, dahil ang S. aureus ay gumagawa ng isang fibrinolysin na nagpapawalang-bisa.

-Para sa isang maaasahang pagsubok, sariwa o bagong reconstituted na plasma ay dapat gamitin, pati na rin mahalaga na gumamit ng mga sariwang kultura ng bakterya (18 hanggang 24 h). Iniiwasan nito ang mga maling negatibo.

-Ang pagsubok ay dapat isagawa kasama ng isang negatibo at isang positibong kontrol.

-Ang isang solidong media ay maaaring makagambala sa coagulase test. Hindi inirerekumenda na gumamit ng mga kolonya mula sa maalat na mannitol agar.

-Kung ginamit ang citrated na plasma, inirerekumenda na maglagay ng 5 yunit ng heparin bawat ml ng plasma upang maiwasan ang mga maling positibo. Ito ay dahil ang ilang mga microorganism maliban sa S. aureus ay maaaring masira ang citrate at maging sanhi ng pamumula ng plasma. Sa kasong ito, ipinapayong gumawa ng isang Gram at isang catalase test.

Ito ay mahalaga, sa pagsubok ng tubo, upang masubaybayan ang reaksyon tuwing 30 minuto, dahil may mga galaw ng S. aureus na gumagawa ng mataas na konsentrasyon ng fibrinolysin at mabilis na mabubura ang bagong nabuo na clot. Iwasan ang mga maling negatibo.

-Kapag sinusubaybayan ang pagsubok, maiwasan ang pag-alog ng tubo nang bigla, maaari itong sirain ang pagsisimula ng pagbuo ng clot na hindi maibabalik mamaya, na magdulot ng mga maling negatibo.

Mga Sanggunian

1. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiological Diagnosis. Ika-5 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis ng Bailey at Scott Microbiological. 12 ed. Editoryal Panamericana SA Argentina.
3. Mac Faddin J. (2003). Mga pagsubok sa biochemical para sa pagkilala ng mga bakterya na kahalagahan ng klinikal. 3rd ed. Editoryal Panamericana. Buenos Aires. Argentina.
4. Pro-Lab Laboratories. Ang kuneho coagulate plasma. Magagamit sa: pro-lab.com
5. "Coagulase." Wikipedia, Ang Malayang Encyclopedia. 12 Peb 2019, 04:23 UTC. 22 Abril 2019, 15:50 wikipedia.org.