MGA PAGSUBOK SA BIOCHEMICAL: URI, KUNG ANO ANG MGA ITO AT KAHALAGAHAN - BIOLOGY - 2025

Ang biochemical test sa microbiology ay isang hanay ng mga pagsubok na kemikal ay dinadala sa mga microorganism na naroroon sa isang sample upang makilala ang mga ito ; Ang mga microorganism na ito ay karaniwang bakterya. Mayroong isang malaking bilang ng mga biochemical test na magagamit sa isang microbiologist.

Gayunpaman, ang pagpili ng mga pagsubok na ito ay batay sa paunang natuklasan, tulad ng pattern ng mantsa ng Gram at mga katangian ng paglago, na nagpapahintulot sa mga bakterya na itinalaga sa isang partikular na kategorya. Ang mga pagsubok sa biochemical ay pangunahing batay sa mga metabolic na katangian ng bawat uri ng bakterya.

Hindi lahat ng bakterya ay may parehong mga katangian, kaya iniimbestigahan kung nagtataglay sila ng anumang partikular na enzyme sa pamamagitan ng pagdaragdag ng substrate at naghihintay na maganap ang reaksyon. Karaniwan ang pagpapasiyang ito ay ibinibigay ng pagbabago sa kulay o pH sa medium ng kultura.

Mas mababa sa 15 biochemical test ay madalas na kinakailangan para sa maaasahang pagkakakilanlan ng isang bakterya hanggang sa antas ng species. Ang pagsasagawa ng higit pang mga pagsubok sa biochemical ay maaaring dagdagan ang kumpiyansa sa pagkilala.

Karamihan sa mga pagsubok na biochemical na ito ay isinasagawa sa suwero o plasma ng dugo. Gayunpaman, maaari rin silang isagawa sa iba pang mga biological secretion tulad ng: ihi, cerebrospinal fluid, pleural fluid at feces, bukod sa iba pa.

Pag-uuri

Ang mga pagsubok na biochemical ay maaaring maiuri sa 3 mga grupo:

Universal

Ang mga ito ang mga pagsubok na maaaring isagawa sa anumang halimbawang at gumagabay sa microbiologist sa mga sumusunod na biochemical test na dapat gawin upang makakuha ng isang maaasahang pagkakakilanlan.

Halimbawa

Ang pagsubok ng catalase at oxidase.

Mga Pagkakaiba-iba

Ang mga ito ang mga pagsubok na isinasagawa upang makilala ang mga microorganism na naroroon sa sample hanggang sa antas ng species.

Ang pagkakakilanlan ay ginawa batay sa mga resulta ng isang kumbinasyon ng mga pagsubok, dahil ang mga indibidwal na mga resulta ay hindi sapat na nagbibigay kaalaman upang gumawa ng pagkakakilanlan.

Halimbawa

Ang mga pagsusuri sa IMViC at mga pagsubok sa paggamit ng asukal.

Tukoy

Ang mga ito ay tiyak na mga pagsubok para sa isang partikular na hanay ng mga species o upang subtype ang isang species. Ang mga pagsubok na ito ay karaniwang ginagawa upang kumpirmahin o makilala sa antas ng subspesies. Ang mga indibidwal na pagsubok ay nagbibigay kaalaman sa kanilang sarili.

Halimbawa

Ang pagsubok ng γ-Glutamyl aminopeptidase.

Mga uri ng mga pagsubok sa biochemical

Ang catalase test

Ang catalase test ay isang pagsubok upang ipakita ang pagkakaroon ng catalase enzyme sa pamamagitan ng pagbabagsak ng hydrogen peroxide sa oxygen at tubig. Ang isang maliit na halaga ng bakterya ay idinagdag sa isang patak ng hydrogen peroxide (3%) sa slide.

Ang catalase test ay isang simpleng pagsubok na ginagamit ng mga microbiologist upang makatulong na makilala ang mga species ng bakterya at upang matukoy ang kakayahan ng ilang mga mikrobyo na masira ang hydrogen peroxide sa pamamagitan ng paggawa ng enzyme catalase.

Kung ang mga bula ng oxygen ay sinusunod, nangangahulugan ito na ang bakterya ay mayroong catalase ng enzyme, sapagkat pinangangasiwaan nito ang agnas ng hydrogen peroxide sa oxygen at tubig. Ang organismo ay sinasabing positibo sa catalase (hal. Staphylococcus aureus).

Ang pagsubok sa oxidase

Ang pagsubok na ito ay ginagamit upang makilala ang mga microorganism na naglalaman ng enzyme cytochrome oxidase (mahalaga sa chain ng transportasyon ng elektron). Karaniwan itong ginagamit upang makilala sa pagitan ng mga pamilya Enterobacteriaceae at Pseudomadaceae.

Ang Cytochrome oxidase ay naglilipat ng mga electron mula sa chain ng transportasyon ng elektron hanggang oxygen (ang panghuling tumatanggap ng elektron) at binabawasan ito sa tubig. Ang mga artipisyal na donor na electron at acceptor ay ibinibigay sa pagsubok ng oxidase.

Kapag ang elector donor ay na-oxidized ng aksyon ng cytochrome oxidase, ang daluyan ay nagiging madilim na lila at itinuturing na isang positibong resulta. Ang microorganism Pseudomonas aeruginosa ay isang halimbawa ng isang oxidase positibong bacterium.

Salted Mannitol Agar (MSA) Test

Ang ganitong uri ng pagsubok ay parehong pumipili at pagkakaiba. Pipiliin ng MSA ang mga organismo na may kakayahang manirahan sa mga kapaligiran na may mataas na konsentrasyon ng asin, tulad ng mga species ng Staphylococcus kumpara sa mga species ng Streptococcus, na ang paglago ay hinarang sa ilalim ng mga kondisyong ito.

Ang pagkakaiba-iba ng sangkap sa pagsubok na ito ay asukal sa mannitol. Ang mga organismo na may kakayahang gumamit ng mannitol bilang isang mapagkukunan ng pagkain ay gagawa ng mga produkto ng pagbuburo, na acidic at sa gayon ay mas mababa ang pH ng daluyan.

Ang kaasiman ng daluyan ay nagiging sanhi ng tagapagpahiwatig ng pH, pula ng pula, upang maging dilaw. Ang mga halimbawa ng mga species ng bakterya na maaaring magkakaiba sa pamamaraang ito ay: Staphylococcus aureus (positibo dahil ito ay nagpapagana ng mannitol) at Staphylococcus epidermidis (negatibo dahil hindi ito pagbuburo sa mannitol).

Pagsubok ng coagulase

Ang Coagulase ay isang enzyme na tumutulong sa clot ng plasma ng dugo. Ang pagsubok na ito ay isinasagawa sa Gram positibo at catalase positibong mga species ng bakterya upang makilala ang Staphylococcus aureus (coagulase positibo). Sa katunayan, ang coagulase ay isang kadahilanan ng virulence na species na ito ng bakterya.

Ang pagbuo ng damit sa paligid ng isang impeksyong sanhi ng bacterium na ito ay marahil ay pinoprotektahan ito mula sa phagocytosis. Ang pagsubok na ito ay kapaki-pakinabang kapag nais mong pag-iba-ibahin ang Staphylococcus aureus mula sa iba pang mga species ng Staphylococcus na negatibo.

Ang urease test

Ginagamit ang pagsubok na ito upang makilala ang bakterya na may kakayahang mag-hydrolyzing urea, gamit ang enzyme urease. Karaniwang ginagamit ito upang makilala ang genus na Proteus mula sa iba pang mga bacteria na enteric.

Ang hydrolysis ng urea ay gumagawa ng ammonia bilang isa sa mga produkto nito. Ang mahinang base na ito ay nagdaragdag ng pH ng daluyan sa itaas ng 8.4 at ang tagapagpahiwatig ng pH (phenol red) ay nagbabago mula sa dilaw hanggang pink. Ang isang halimbawa ng isang positibong bakterya ng urease ay Proteus mirabilis.

Ano ang mga biochemical test para sa?

Ang mga biochemical test sa microbiology ay ginagamit upang mag-diagnose ng mga sakit na dulot ng microbes at upang masubaybayan ang mga paggamot na pinangangasiwaan upang labanan ang mga ito. Bilang karagdagan, ginagamit ang mga ito para sa screening ng mga nakakahawang sakit at para sa kanilang pagbabala.

Ang biochemical pagkakakilanlan ng mga microorganism ay nag-aalok ng isang ideya kung ano ang may kakayahang ang mga microorganism na ito, posible ang diskriminasyon ng iba't ibang mga strain ng parehong species sa pamamagitan ng mga tiyak na biochemical profile.

Ang mga pagkakaiba sa mga tiyak na aktibidad ng enzyme ay nagpapabatid sa ekolohiya, pisyolohiya o likas na tirahan ng microorganism, na sa ilang mga kaso ay maaaring isaalang-alang na mahalagang impormasyon.

Kahalagahan

Ang mga pagkakaiba-iba ng istruktura sa hugis, sukat, at pag-aayos ng mga bakterya ay makakatulong sa maliit na proseso ng pagkakakilanlan, sapagkat maraming mga species ng bakterya na katulad sa hugis, sukat, at pag-aayos.

Para sa kadahilanang ito, ang pagkakakilanlan ng mga bakterya ay pangunahing batay sa pagkakaiba-iba sa kanilang mga aktibidad na biochemical.

Ang bawat species ng bakterya ay may mahusay na tinukoy na hanay ng mga aktibidad na metabolic na naiiba sa lahat ng iba pang mga species. Ang mga biochemical "fingerprint" ay mga pag-aari na kinokontrol ng mga bacterial enzymes.

Sa gayon, mahalaga ang mga pagsubok sa biochemical dahil makakatulong sila sa mananaliksik na tama na matukoy ang mga pathogens na naroroon sa isang sample at, sa ganitong paraan, upang mairekomenda ang naaangkop na paggamot sa pasyente.

Mga Sanggunian

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Biochemistry ng Klinikal (ika-8 ng ed.). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, & Cowan, ST (1952). Mga pamamaraan ng biochemical para sa bacteriology. Journal of General Microbiology, 6 (1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Biochemistry ng Klinikal (Ika-5 ed.). Elsevier Mga Agham sa Kalusugan.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktikal na Handbook ng Microbiology (ika-2 ng ed.). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Mga Paraan ng Laboratory sa Microbiology ng Pagkain (Ika-3 ed.). Akademikong Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktikal na Mikrobiolohiya. BI Publications Pvt Ltd.